Er virale nukleinsyrer inde i eller uden for værtscellerne?

Det første trin i at udvinde virale nukleinsyrer er at isolere virale partikler fra en prøve inficeret med viruset, og derefter rense nukleinsyrer (DNA eller RNA) fra disse virale partikler. Virale nukleinsyrer er til stede inde i virale partikler, mens viruspartikler kan være til stede i eller uden for cellerne, hvilket afhænger af stadiet af den virale livscyklus.

Ekstracellulære virale partikler

Under infektionsprocessen, vira kan replikere og samle sig til modne virale partikler inde i værtsceller. En gang moden, disse virale partikler frigives ved cellelyse eller knopskydning og fordeles i kropsvæsker, sekret eller miljøet.

Ekstracellulære virale partikler indeholder intakte virale nukleinsyrer, som kan frigives fra virale partikler ved fysiske og kemiske metoder til efterfølgende oprensning og analyse.

Intracellulære virale partikler

I de tidlige stadier af den virale livscyklus, virale nukleinsyrer kan eksistere direkte i cytoplasmaet eller kernen, deltager i replikationen og transkriptionen af ​​det virale genom.

Hvis målet er at udvinde intracellulære virale nukleinsyrer, værtscellemembranen skal først ødelægges for at frigive viruspartiklerne, og så kan nukleinsyrerne ekstraheres fra disse virale partikler.

Grundlæggende trin til viral nukleinsyreekstraktion

Prøvebehandling: lysere celler for at frigive virale partikler.

Udfældning eller koncentration af viruspartikler: bruge centrifugering eller andre metoder til at adskille viruspartikler fra prøven.

Lysis af virale partikler: bruge kemiske reagenser til at ødelægge proteinkapsiden af ​​viruset og frigive nukleinsyrer.

Nukleinsyreoprensning: fjerne proteiner, lipider og andre urenheder for at rense virale nukleinsyrer med høj renhed.

Nukleinsyrekvantificering og kvalitetsvurdering: bruge ultraviolet spektroskopi eller fluorescens kvantificering og andre teknikker til at kvantificere de ekstraherede nukleinsyrer.

I egentlige laboratorieoperationer, om det er intracellulær eller ekstracellulær viral nukleinsyreekstraktion, lignende lysis, oprensnings- og beskyttelsesforanstaltninger anvendes til at sikre nukleinsyrernes kvalitet og integritet. Imidlertid, de specifikke operationelle detaljer og forbehandlingstrin skal justeres i overensstemmelse med de forskellige kilder til nukleinsyrer.

Leverandørintroduktion

Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd.blev etableret i 2016 som er en professionel producent af biomagnetiske materialer og nukleinsyreekstraktionsreagenser.

Vi har stor erfaring med nukleinsyreisolering og oprensning, proteinoprensning, celleadskillelse, kemiluminescens og andre tekniske områder.

Vores produkter er meget udbredt inden for mange områder, såsom medicinsk test, genetisk testning, universitetsforskning, genetisk avl, osv. Vi leverer ikke kun produkter, men kan også påtage os OEM, ODM, og andre behov. Hvis du har relaterede behov, er du velkommen til at kontakte os påsales01@lingjunbio.com.