Er virale nukleinsyrer inne i eller utenfor vertscellene?

Det første trinnet i å ekstrahere virale nukleinsyrer er å isolere virale partikler fra en prøve infisert med viruset, og deretter rense nukleinsyrer (DNA eller RNA) fra disse virale partiklene. Virale nukleinsyrer er tilstede inne i virale partikler, mens viruspartikler kan være tilstede i eller utenfor cellene, som avhenger av stadiet av den virale livssyklusen.

Ekstracellulære virale partikler

Under infeksjonsprosessen, virus kan replikere og sette seg sammen til modne virale partikler inne i vertsceller. En gang moden, disse virale partiklene frigjøres ved cellelyse eller spirende og distribueres i kroppsvæsker, sekret eller miljøet.

Ekstracellulære virale partikler inneholder intakte virale nukleinsyrer, som kan frigjøres fra virale partikler ved fysiske og kjemiske metoder for påfølgende rensing og analyse.

Intracellulære virale partikler

I de tidlige stadiene av den virale livssyklusen, virale nukleinsyrer kan eksistere direkte i cytoplasmaet eller kjernen, deltar i replikasjonen og transkripsjonen av det virale genomet.

Hvis målet er å trekke ut intracellulære virale nukleinsyrer, vertscellemembranen må ødelegges først for å frigjøre viruspartiklene, og så kan nukleinsyrene ekstraheres fra disse virale partiklene.

Grunnleggende trinn for viral nukleinsyreekstraksjon

Prøvebehandling: lysere celler for å frigjøre viruspartikler.

Utfelling eller konsentrasjon av viruspartikler: bruke sentrifugering eller andre metoder for å skille viruspartikler fra prøven.

Lysis av virale partikler: bruke kjemiske reagenser for å ødelegge proteinkapsiden til viruset og frigjøre nukleinsyrer.

Nukleinsyrerensing: fjerne proteiner, lipider og andre urenheter for å rense virale nukleinsyrer med høy renhet.

Nukleinsyrekvantifisering og kvalitetsvurdering: bruke ultrafiolett spektroskopi eller fluorescenskvantifisering og andre teknikker for å kvantifisere de ekstraherte nukleinsyrene.

I faktiske laboratorieoperasjoner, enten det er intracellulær eller ekstracellulær viral nukleinsyreekstraksjon, lignende lysering, rense- og beskyttelsestiltak brukes for å sikre kvaliteten og integriteten til nukleinsyrene. Imidlertid, de spesifikke operasjonsdetaljene og forbehandlingstrinnene må justeres i henhold til de forskjellige kildene til nukleinsyrer.

Leverandørintroduksjon

Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd.ble etablert i 2016 som er en profesjonell produsent av biomagnetiske materialer og nukleinsyreekstraksjonsreagenser.

Vi har rik erfaring innen nukleinsyreisolering og rensing, proteinrensing, celleseparasjon, kjemiluminescens og andre tekniske felt.

Våre produkter er mye brukt på mange felt, som medisinsk testing, genetisk testing, universitetsforskning, genetisk avl, osv. Vi leverer ikke bare produkter, men kan også påta oss OEM, ODM, og andre behov. Hvis du har relaterte behov, ta gjerne kontakt med oss ​​påsales01@lingjunbio.com.