Befinden sich virale Nukleinsäuren innerhalb oder außerhalb der Wirtszellen??

Der erste Schritt bei der Extraktion viraler Nukleinsäuren besteht darin, Viruspartikel aus einer mit dem Virus infizierten Probe zu isolieren, und dann Nukleinsäuren reinigen (DNA oder RNA) von diesen Viruspartikeln. Virale Nukleinsäuren sind im Inneren viraler Partikel vorhanden, während Viruspartikel innerhalb oder außerhalb der Zellen vorhanden sein können, Dies hängt vom Stadium des viralen Lebenszyklus ab.

Extrazelluläre Viruspartikel

Während des Infektionsprozesses, Viren können sich in Wirtszellen vermehren und zu reifen Viruspartikeln zusammenfügen. Einmal reif, Diese Viruspartikel werden durch Zelllyse oder Knospung freigesetzt und in Körperflüssigkeiten verteilt, Sekrete oder die Umwelt.

Extrazelluläre Viruspartikel enthalten intakte virale Nukleinsäuren, die durch physikalische und chemische Methoden aus Viruspartikeln zur anschließenden Reinigung und Analyse freigesetzt werden können.

Intrazelluläre Viruspartikel

In den frühen Stadien des viralen Lebenszyklus, Virale Nukleinsäuren können direkt im Zytoplasma oder Zellkern vorhanden sein, Beteiligung an der Replikation und Transkription des viralen Genoms.

Wenn das Ziel darin besteht, intrazelluläre virale Nukleinsäuren zu extrahieren, Um die Viruspartikel freizusetzen, muss zunächst die Wirtszellmembran zerstört werden, und dann können die Nukleinsäuren aus diesen Viruspartikeln extrahiert werden.

Grundlegende Schritte für Extraktion viraler Nukleinsäuren

Probenverarbeitung: Zellen lysieren, um Viruspartikel freizusetzen.

Niederschlag oder Konzentration von Viruspartikeln: Verwenden Sie Zentrifugation oder andere Methoden, um Viruspartikel aus der Probe zu trennen.

Lyse viraler Partikel: Verwenden Sie chemische Reagenzien, um das Proteinkapsid des Virus zu zerstören und Nukleinsäuren freizusetzen.

Nukleinsäurereinigung: Proteine ​​entfernen, Lipide und andere Verunreinigungen zur Reinigung hochreiner viraler Nukleinsäuren.

Quantifizierung und Qualitätsbewertung von Nukleinsäuren: Verwenden Sie Ultraviolettspektroskopie oder Fluoreszenzquantifizierung und andere Techniken, um die extrahierten Nukleinsäuren zu quantifizieren.

Im realen Laborbetrieb, ob es sich um eine intrazelluläre oder extrazelluläre virale Nukleinsäureextraktion handelt, ähnliche Lyse, Durch Reinigungs- und Schutzmaßnahmen wird die Qualität und Integrität der Nukleinsäuren sichergestellt. Jedoch, Die spezifischen Betriebsdetails und Vorbehandlungsschritte müssen entsprechend den verschiedenen Nukleinsäurequellen angepasst werden.

Lieferantenvorstellung

Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd.wurde gegründet in 2016 Das ist ein professioneller Hersteller von biomagnetischen Materialien und Nukleinsäure-Extraktionsreagenzien.

Wir verfügen über umfangreiche Erfahrung in der Isolierung und Reinigung von Nukleinsäuren, Proteinreinigung, Zelltrennung, Chemilumineszenz und andere technische Bereiche.

Unsere Produkte werden in vielen Bereichen weit verbreitet eingesetzt, wie zum Beispiel medizinische Tests, Gentests, universitäre Forschung, genetische Zucht, usw. Wir liefern nicht nur Produkte, sondern können auch OEM übernehmen, ODM, und andere Bedürfnisse. Wenn Sie entsprechende Bedürfnisse haben, Bitte kontaktieren Sie uns untersales01@lingjunbio.com.