Manuelle magnetische Perlenextraktion im Winter: Wichtige Vorsichtsmaßnahmen für die Handhabung bei niedrigen Temperaturen

Vorwort

Bei manueller Verwendung der Magnetperle – basierte Nukleinsäure-Extraktionsreagenzien im kalten Winter, Besonderes Augenmerk sollte auf den Einfluss der Temperatur auf die Reagenzaktivität gelegt werden, Adsorptionseffizienz der Magnetkügelchen, und experimentelle Operationen. Die spezifischen Vorsichtsmaßnahmen sind wie folgt:

1. Aufwärmen der Reagenzien im Voraus

Reagenzien wie magnetische Bead-Suspensionen, Lysepuffer, und Waschpuffer neigen bei niedrigen Temperaturen zur Ausfällung von Komponenten oder zur Aggregation magnetischer Perlen. Nehmen Sie sie aus dem Kühlschrank 15 – 30 Minuten im Voraus, Lassen Sie sie bei Zimmertemperatur aufwärmen, und vorsichtig umdrehen und mischen. Vermeiden Sie heftiges Schütteln, um ein Zerbrechen der Magnetperlen zu verhindern.

2. Sorgen Sie für eine stabile Betriebsumgebungstemperatur

Versuchen Sie, in einem Labor mit einer Raumtemperatur von zu arbeiten 18 – 25℃. Vermeiden Sie Bereiche, die direkt von kalter Luft geblasen werden, wie Luft – Klimaanlagensteckdosen sowie Türen und Fenster. Wenn die Umgebungstemperatur zu niedrig ist, Verwenden Sie eine Konstante – Temperatur-Metallbad oder Wasserbad zur Aufrechterhaltung der Temperatur von Proben und Reagenzien, Verhindert eine Verringerung der Effizienz des Lysepuffers und eine unzureichende Bindung zwischen DNA und Magnetkügelchen.

3. Kontrollzeit in den Adsorptions- und Trennschritten magnetischer Perlen

Niedrige Temperaturen verlangsamen die Bindungsgeschwindigkeit von Magnetkügelchen und Nukleinsäuren. Verlängern Sie die Inkubationszeit der Magnetkügelchen entsprechend (normalerweise um erhöhen 5 – 10 Minuten). Gleichzeitig, beim Trennen von Magnetperlen auf dem Magnetständer, Die Sedimentationsgeschwindigkeit von Magnetkügelchen verlangsamt sich bei niedrigen Temperaturen. Verlängern Sie die Standzeit, um sicherzustellen, dass die Magnetkügelchen vollständig an der Röhrchenwand adsorbiert sind, bevor Sie die Abfallflüssigkeit entsorgen, um den Verlust von Magnetkügelchen zu vermeiden.

4. Optimieren Sie die Temperatur des Eluenten

Die Temperatur des Eluenten beeinflusst direkt die Effizienz der Nukleinsäureelution. Im Winter, vor – Erwärmen Sie den Eluenten auf 50 – 65℃ vor Gebrauch. Während der Elution kurz vortexen und mischen und stehen lassen 2 – 3 Minuten, um die Nukleinsäure-Rückgewinnungsrate zu verbessern. Die eluierte Nukleinsäureprobe sollte so schnell wie möglich bei niedriger Temperatur gelagert werden, um einen Abbau zu verhindern.

5. Betriebsdetails und Vorbereitung der Verbrauchsmaterialien

Vor – Erwärmen Sie die Pipette im Voraus, um eine ungenaue Flüssigkeitsaufnahme durch die Pipette bei niedrigen Temperaturen zu vermeiden. Enzym verwenden – Kostenlose Zentrifugenröhrchen und Pipettenspitzen, um den Verlust von Nukleinsäuren, die auf der Oberfläche von Verbrauchsmaterialien adsorbiert sind, in einem niedrigen Zustand zu verhindern – Temperaturumgebung. Gehen Sie vorsichtig vor, um die Verflüchtigung der Reagenzien und die Kontamination der Probe zu reduzieren.

Anbieter

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