सर्दियों में मैनुअल चुंबकीय मनका निष्कर्षण: कम तापमान वाले हैंडलिंग के लिए मुख्य सावधानियाँ

प्रस्तावना

मैन्युअल रूप से चुंबकीय मनका का उपयोग करते समय – ठंडी सर्दियों में आधारित न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण अभिकर्मक, अभिकर्मक गतिविधि पर तापमान के प्रभाव पर विशेष ध्यान दिया जाना चाहिए, चुंबकीय मनका सोखना दक्षता, और प्रायोगिक संचालन. विशिष्ट सावधानियां इस प्रकार हैं:

1. अभिकर्मक को अग्रिम रूप से पुनः गर्म करना

चुंबकीय मनका निलंबन जैसे अभिकर्मक, लाइसिस बफ़र्स, और वाशिंग बफ़र्स कम तापमान पर घटक अवक्षेपण या चुंबकीय मनका एकत्रीकरण के लिए प्रवण होते हैं. इन्हें रेफ्रिजरेटर से बाहर निकालें 15 – 30 मिनट पहले, उन्हें कमरे के तापमान पर फिर से गर्म होने दें, और धीरे से पलट कर मिला दीजिये. चुंबकीय मोतियों को टूटने से बचाने के लिए तेज़ झटकों से बचें.

2. एक स्थिर परिचालन वातावरण तापमान बनाए रखें

के कमरे के तापमान वाली प्रयोगशाला में काम करने का प्रयास करें 18 – 25℃. ठंडी हवा से सीधे प्रभावित क्षेत्रों से बचें, जैसे हवा – कंडीशनर आउटलेट और दरवाजे और खिड़कियां. यदि परिवेश का तापमान बहुत कम है, एक स्थिरांक का उपयोग करें – नमूनों और अभिकर्मकों का तापमान बनाए रखने के लिए तापमान धातु स्नान या जल स्नान, लसीका बफर की दक्षता में कमी और डीएनए और चुंबकीय मोतियों के बीच अपर्याप्त बंधन को रोकना.

3. चुंबकीय मनका सोखना और पृथक्करण चरणों में नियंत्रण समय

कम तापमान चुंबकीय मोतियों और न्यूक्लिक एसिड की बंधन गति को धीमा कर देगा. चुंबकीय मोतियों के ऊष्मायन समय को उचित रूप से बढ़ाएं (आमतौर पर बढ़ जाती है 5 – 10 मिनट). एक ही समय पर, चुंबकीय मोतियों को चुंबकीय स्टैंड पर अलग करते समय, कम तापमान पर चुंबकीय मोतियों की अवसादन गति धीमी हो जाती है. यह सुनिश्चित करने के लिए खड़े रहने के समय को बढ़ाएं कि चुंबकीय मोतियों के नुकसान से बचने के लिए अपशिष्ट तरल को त्यागने से पहले चुंबकीय मोती ट्यूब की दीवार पर पूरी तरह से सोख लिए जाएं।.

4. एलुएंट के तापमान को अनुकूलित करें

निक्षालक का तापमान सीधे न्यूक्लिक एसिड निक्षालन दक्षता को प्रभावित करता है. सर्दियों में, पूर्व – एलुएंट को गर्म करें 50 – 65उपयोग से पहले ℃. संक्षेप में भंवर और निक्षालन के दौरान मिश्रण और इसे खड़े रहने दें 2 – 3 न्यूक्लिक एसिड रिकवरी दर में सुधार के लिए मिनट. गिरावट को रोकने के लिए एल्युटेड न्यूक्लिक एसिड के नमूने को जल्द से जल्द कम तापमान पर संग्रहित किया जाना चाहिए.

5. परिचालन विवरण और उपभोज्य तैयारी

पूर्व – कम तापमान पर पिपेट द्वारा गलत तरल आकांक्षा से बचने के लिए पिपेट को पहले से गर्म करें. एंजाइम का प्रयोग करें – कम मात्रा में उपभोग्य सामग्रियों की सतह पर अधिशोषित न्यूक्लिक एसिड के नुकसान को रोकने के लिए मुफ्त सेंट्रीफ्यूज ट्यूब और पिपेट युक्तियाँ – तापमान वातावरण. अभिकर्मक वाष्पीकरण और नमूना संदूषण को कम करने के लिए धीरे से काम करें.

देने वाला

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