Der ultimative Leitfaden zur Maximierung Ihrer RNA-Konzentration

Einführung

Zunehmend RNA-Konzentration ist eine sehr häufige Anforderung in molekularbiologischen Experimenten. Die folgenden zwei Punkte sind entscheidend.

1. Auswahl und Verarbeitung des Ausgangsmaterials

1.1 Erhöhen Sie die Menge an Ausgangsmaterial:

Dies ist der einfachste Ansatz. Verwenden Sie mehr Gewebe oder Zellen innerhalb der zulässigen Kapazität des Lysepuffers. Zum Beispiel, wenn im Kit 10–50 mg Gewebe empfohlen werden, Sie können versuchen, die Obergrenze von zu verwenden 50 mg oder sogar etwas mehr (Sicherstellen, dass der Lysepuffer das Material vollständig bedeckt und lysiert).

1.2 Wählen Sie Materialien mit hoher RNA-Expression:

Wenn das Experiment es zulässt, Wählen Sie Gewebe oder Zellen, die reich an Zytoplasma und stoffwechselaktiv sind, da sie von Natur aus höhere RNA-Werte enthalten.

1.3 Lösen Sie die Probe effizient auf:

• Gewebe: Vor der Zugabe des Lysepuffers gründlich in flüssigem Stickstoff mahlen, bis ein feines Pulver entsteht. Alternativ, Verwenden Sie zur vollständigen Homogenisierung einen Gewebehomogenisator. Eine ineffiziente Störung ist einer der Hauptgründe für niedrige Erträge.
• Zellen: Stellen Sie sicher, dass der Lysepuffer vollständigen und schnellen Kontakt mit den Zellen hat. Für adhärente Zellen, Geben Sie den Lysepuffer direkt in die Kulturschale und pipettieren Sie ihn zur Lyse.

2. Optimierung des Extraktionsprozesses

Magnetische Bead-basierte RNA-Extraktion: Wie man hochkonzentrierte RNA einfach erhält und weiter konzentriert

Der Schlüssel zum Erreichen einer hohen RNA-Konzentration bei der Extraktion auf Magnetkügelchenbasis liegt in der Maximierung der Bindung und der Minimierung des Elutionsvolumens.

Schritte zur Erhöhung der Konzentration während der Extraktion:

• Erhöhen Sie die Probenzufuhr, ohne sie zu verdünnen: Grundsätzlich, Verwenden Sie mehr Gewebe oder Zellen innerhalb der Kapazität des Lysepuffers.
• Bindung optimieren: Sorgen Sie für eine gründliche Vermischung des Lysepuffers mit der Probe, um eine vollständige Lyse zu gewährleisten. Nach dem Hinzufügen von Magnetperlen, ausreichend Inkubationszeit einplanen (z.B., 10 Minuten bei Raumtemperatur) damit die RNA vollständig an die Perlen bindet.
• Kritischer Schritt: Elutionsvolumen reduzieren! Dies ist die direkteste und effektivste Methode. Anstatt das maximal empfohlene Elutionsvolumen zu verwenden (z.B., 50 μL), Versuchen Sie es mit zu eluieren 20 μL oder sogar 15 μL RNase-freies Wasser. Das Vorwärmen des Elutionspuffers auf 55–65 °C und das Inkubieren für 2–5 Minuten kann die Elutionseffizienz erheblich verbessern.

3.Abschluss

Für optimale Ergebnisse, Erwägen Sie die Verwendung magnetischer Bead-basierter Extraktionsreagenzien von Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd. Das Unternehmen verfügt über mehr als ein Jahrzehnt Erfahrung in der Extraktionstechnologie auf Basis von Magnetkügelchen und ist auf die Forschung zu Magnetkügelchen spezialisiert.

Anbieter

Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd.wurde gegründet in 2016 Das ist ein professioneller Hersteller von biomagnetischen Materialien und Nukleinsäure-Extraktionsreagenzien.

Wir verfügen über umfangreiche Erfahrung in der Extraktion und Reinigung von Nukleinsäuren, Proteinreinigung, Zelltrennung, Chemilumineszenz, und anderen technischen Bereichen.

Unsere Produkte werden in vielen Bereichen weit verbreitet eingesetzt, wie zum Beispiel medizinische Tests, Gentests, universitäre Forschung, genetische Zucht, und so weiter. Wir liefern nicht nur Produkte, sondern können auch OEM übernehmen, ODM, und andere Bedürfnisse. Wenn Sie einen entsprechenden Bedarf haben, Nehmen Sie gerne Kontakt zu uns auf .