O guia definitivo para maximizar sua concentração de RNA

Introdução

Aumentando Concentração de RNA é um requisito muito comum em experimentos de biologia molecular. Os dois pontos a seguir são cruciais.

1. Seleção e Processamento de Material Inicial

1.1 Aumentar a quantidade de material inicial:

Esta é a abordagem mais direta. Use mais tecidos ou células dentro da capacidade permitida do tampão de lise. Por exemplo, se o kit recomendar 10–50 mg de tecido, você pode tentar usar o limite superior de 50 mg ou até um pouco mais (garantindo que o tampão de lise cubra totalmente e lise o material).

1.2 Selecione materiais com alta expressão de RNA:

Se o experimento permitir, escolha tecidos ou células que sejam ricos em citoplasma e metabolicamente ativos, pois eles contêm naturalmente níveis mais elevados de RNA.

1.3 Interrupção eficiente da amostra:

• Tecido: Moa bem em nitrogênio líquido até formar um pó fino antes de adicionar o tampão de lise. Alternativamente, use um homogeneizador de tecidos para homogeneização completa. A interrupção ineficiente é uma das principais razões para o baixo rendimento.
• Células: Certifique-se de que o tampão de lise faça contato completo e rápido com as células. Para células aderentes, adicione diretamente o tampão de lise ao prato de cultura e pipete para lisar.

2. Otimizando o Processo de Extração

Extração de RNA baseada em esferas magnéticas: Como obter facilmente RNA de alta concentração e concentrá-lo ainda mais

A chave para alcançar alta concentração de RNA com extração baseada em esferas magnéticas é maximizar a ligação e minimizar o volume de eluição.

Passos para aumentar a concentração durante a extração:

• Aumente a entrada de amostras sem diluir: Fundamentalmente, usar mais tecidos ou células dentro da capacidade do tampão de lise.
• Otimizar vinculação: Garanta a mistura completa do tampão de lise com a amostra para lise completa. Depois de adicionar contas magnéticas, permitir tempo de incubação suficiente (por exemplo, 10 minutos à temperatura ambiente) para o RNA se ligar totalmente às contas.
• Etapa crítica: Reduza o volume de eluição! Este é o método mais direto e eficaz. Em vez de usar o volume máximo de eluição recomendado (por exemplo, 50 μL), tente eluir com 20 μL ou mesmo 15 μL de água livre de RNase. Pré-aquecer o tampão de eluição a 55–65°C e deixá-lo incubar por 2–5 minutos pode melhorar significativamente a eficiência da eluição.

3.Conclusão

Para resultados ideais, considere o uso de reagentes de extração baseados em esferas magnéticas da Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltda. A empresa tem mais de uma década de experiência dedicada em tecnologia de extração baseada em esferas magnéticas e é especializada em pesquisa de esferas magnéticas..

Fornecedor

Xangai Lingjun Biotecnologia Co., Ltda.foi estabelecido em 2016 que é um fabricante profissional de materiais biomagnéticos e reagentes de extração de ácido nucleico.

Temos vasta experiência em extração e purificação de ácidos nucleicos, purificação de proteínas, separação celular, quimioluminescência, e outras áreas técnicas.

Nossos produtos são amplamente utilizados em muitos campos, como exames médicos, testes genéticos, pesquisa universitária, melhoramento genético, e assim por diante. Nós não apenas fornecemos produtos, mas também podemos realizar OEM, ODM, e outras necessidades. Se você tiver uma necessidade relacionada, não hesite em contactar-nos .