De ultieme gids voor het maximaliseren van uw RNA-concentratie

Invoering

Toenemend RNA-concentratie is een veel voorkomende vereiste bij experimenten in de moleculaire biologie. De volgende twee punten zijn cruciaal.

1. Selectie en verwerking van uitgangsmateriaal

1.1 Verhoog de hoeveelheid uitgangsmateriaal:

Dit is de meest eenvoudige benadering. Gebruik meer weefsel of cellen binnen de toegestane capaciteit van de lysisbuffer. Bijvoorbeeld, als de kit 10-50 mg weefsel aanbeveelt, je kunt proberen de bovengrens van te gebruiken 50 mg of zelfs iets meer (ervoor zorgen dat de lysisbuffer het materiaal volledig bedekt en lyseert).

1.2 Selecteer materialen met hoge RNA-expressie:

Als het experiment het toelaat, kies weefsels of cellen die rijk zijn aan cytoplasma en metabolisch actief zijn, omdat ze van nature hogere RNA-niveaus bevatten.

1.3 Verstoor het monster efficiënt:

• Weefsel: Maal grondig in vloeibare stikstof tot het een fijn poeder wordt voordat u de lysisbuffer toevoegt. Als alternatief, gebruik een weefselhomogenisator voor volledige homogenisatie. Inefficiënte verstoring is een van de belangrijkste redenen voor een laag rendement.
• Cellen: Zorg ervoor dat de lysisbuffer volledig en snel contact maakt met de cellen. Voor hechtende cellen, voeg de lysisbuffer direct toe aan de kweekschaal en pipet om te lyseren.

2. Optimalisatie van het extractieproces

Op magnetische kralen gebaseerde RNA-extractie: Hoe u gemakkelijk RNA met een hoge concentratie kunt verkrijgen en het verder kunt concentreren

De sleutel tot het bereiken van een hoge RNA-concentratie met op magnetische kralen gebaseerde extractie is het maximaliseren van de binding en het minimaliseren van het elutievolume.

Stappen om de concentratie te verhogen tijdens extractie:

• Verhoog de monsterinvoer zonder verdunning: Fundamenteel, gebruik meer weefsel of cellen binnen de capaciteit van de lysisbuffer.
• Optimaliseer de binding: Zorg voor een grondige menging van de lysebuffer met het monster voor volledige lyse. Na het toevoegen van magnetische kralen, zorg voor voldoende incubatietijd (bijv., 10 minuten bij kamertemperatuur) zodat RNA volledig aan de kralen kan binden.
• Cruciale stap: Verminder het elutievolume! Dit is de meest directe en effectieve methode. In plaats van het maximale aanbevolen elutievolume te gebruiken (bijv., 50 μl), probeer ermee te elueren 20 μL of zelfs 15 μl RNase-vrij water. Het voorverwarmen van de elutiebuffer tot 55–65 °C en het 2–5 minuten laten incuberen kan de elutie-efficiëntie aanzienlijk verbeteren.

3.Conclusie

Voor optimale resultaten, overweeg het gebruik van op magnetische kralen gebaseerde extractiereagentia van Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd. Het bedrijf heeft meer dan tien jaar toegewijde ervaring met op magnetische kralen gebaseerde extractietechnologie en is gespecialiseerd in onderzoek naar magnetische kralen.

Leverancier

Shanghai Lingjun Biotechnologie Co., Ltd.werd opgericht in 2016 dat een professionele fabrikant is van biomagnetische materialen en reagentia voor nucleïnezuurextractie.

We hebben een rijke ervaring in de extractie en zuivering van nucleïnezuren, eiwit zuivering, cel scheiding, chemiluminescentie, en andere technische gebieden.

Onze producten worden op veel gebieden veel gebruikt, zoals medische testen, genetische testen, universitair onderzoek, genetische veredeling, enzovoort. Wij leveren niet alleen producten, maar kunnen ook OEM ondernemen, ODM, en andere behoeften. Als u een gerelateerde behoefte heeft, Neem gerust contact met ons op .