Le guide ultime pour maximiser votre concentration en ARN

Introduction

Croissant Concentration d'ARN est une exigence très courante dans les expériences de biologie moléculaire. Les deux points suivants sont cruciaux.

1. Sélection et traitement du matériel de départ

1.1 Augmenter la quantité de matière première:

C'est l'approche la plus simple. Utilisez plus de tissus ou de cellules dans la limite de la capacité autorisée du tampon de lyse. Par exemple, si le kit recommande 10 à 50 mg de tissu, vous pouvez essayer d'utiliser la limite supérieure de 50 mg ou même un peu plus (s'assurer que le tampon de lyse recouvre et lyse entièrement le matériau).

1.2 Sélectionnez des matériaux avec une expression élevée d’ARN:

Si l'expérience le permet, choisir des tissus ou des cellules riches en cytoplasme et métaboliquement actifs, car ils contiennent naturellement des niveaux d’ARN plus élevés.

1.3 Perturber efficacement l'échantillon:

• Tissu: Grind thoroughly in liquid nitrogen until it becomes a fine powder before adding the lysis buffer. Alternatively, use a tissue homogenizer for complete homogenization. Inefficient disruption is one of the main reasons for low yield.
• Cells: Ensure the lysis buffer makes full and rapid contact with the cells. For adherent cells, directly add the lysis buffer to the culture dish and pipette to lyse.

2. Optimizing the Extraction Process

Magnetic Bead-Based RNA Extraction: How to Easily Obtain High-Concentration RNA and Further Concentrate It

The key to achieving high RNA concentration with magnetic bead-based extraction is maximizing binding and minimizing elution volume.

Steps to Increase Concentration During Extraction:

• Increase sample input without diluting: Fondamentalement, utiliser plus de tissus ou de cellules dans la limite de la capacité du tampon de lyse.
• Optimiser la liaison: Assurer un mélange complet du tampon de lyse avec l’échantillon pour une lyse complète. Après avoir ajouté des billes magnétiques, laisser un temps d'incubation suffisant (par ex., 10 minutes à température ambiante) pour que l'ARN se lie complètement aux billes.
• Étape critique: Réduire le volume d'élution! C'est la méthode la plus directe et la plus efficace. Au lieu d'utiliser le volume d'élution maximum recommandé (par ex., 50 µL), essayez d'éluer avec 20 μL ou même 15 µL d'eau sans RNase. Préchauffer le tampon d'élution à 55-65°C et le laisser incuber pendant 2 à 5 minutes peut améliorer considérablement l'efficacité de l'élution..

3.Conclusion

Pour des résultats optimaux, envisagez d'utiliser des réactifs d'extraction à base de billes magnétiques de Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltée. L'entreprise possède plus d'une décennie d'expérience dans la technologie d'extraction à base de billes magnétiques et se spécialise dans la recherche sur les billes magnétiques..

Fournisseur

Société de biotechnologie Shanghai Lingjun., Ltd.a été établi en 2016 qui est un fabricant professionnel de matériaux biomagnétiques et de réactifs d'extraction d'acide nucléique.

Nous avons une riche expérience dans l'extraction et la purification des acides nucléiques, purification des protéines, séparation cellulaire, chimiluminescence, et autres domaines techniques.

Nos produits sont largement utilisés dans de nombreux domaines, comme les tests médicaux, tests génétiques, recherche universitaire, sélection génétique, et ainsi de suite. Nous fournissons non seulement des produits, mais pouvons également entreprendre des OEM, ODM, et autres besoins. Si vous avez un besoin connexe, n'hésitez pas à nous contacter .