الدليل النهائي لتعظيم تركيز الحمض النووي الريبي (RNA) الخاص بك

مقدمة

زيادة تركيز الحمض النووي الريبي وهو متطلب شائع جدًا في تجارب البيولوجيا الجزيئية. النقطتان التاليتان حاسمتان.

1. اختيار ومعالجة المواد الأولية

1.1 زيادة كمية المواد الأولية:

هذا هو النهج الأكثر مباشرة. استخدام المزيد من الأنسجة أو الخلايا ضمن القدرة المسموح بها للمخزن المؤقت للتحلل. على سبيل المثال, إذا أوصت المجموعة بـ 10-50 ملجم من الأنسجة, يمكنك تجربة استخدام الحد الأعلى لـ 50 ملغ أو حتى أكثر قليلا (التأكد من أن المخزن المؤقت للتحلل يغطي المادة بالكامل ويتحللها).

1.2 حدد المواد ذات التعبير العالي عن الحمض النووي الريبي (RNA).:

إذا سمحت التجربة, اختر الأنسجة أو الخلايا الغنية بالسيتوبلازم والنشطة أيضيًا, لأنها تحتوي بشكل طبيعي على مستويات أعلى من الحمض النووي الريبي (RNA)..

1.3 تعطيل العينة بكفاءة:

• منديل: طحن جيدا في النتروجين السائل حتى يصبح مسحوق ناعم قبل إضافة المخزن المؤقت للتحلل. بدلاً عن ذلك, استخدام الخالط الأنسجة للتجانس الكامل. يعد الاضطراب غير الفعال أحد الأسباب الرئيسية لانخفاض العائد.
• الخلايا: تأكد من أن المخزن المؤقت للتحلل يجعل الاتصال الكامل والسريع مع الخلايا. للخلايا الملتصقة, مباشرة إضافة المخزن المؤقت للتحلل إلى طبق الثقافة وماصة للليز.

2. تحسين عملية الاستخراج

استخراج الحمض النووي الريبي القائم على الخرز المغناطيسي: كيفية الحصول بسهولة على الحمض النووي الريبوزي عالي التركيز وزيادة تركيزه

إن المفتاح لتحقيق تركيز عالٍ من الحمض النووي الريبي (RNA) من خلال الاستخلاص المعتمد على الخرز المغناطيسي هو زيادة حجم الارتباط وتقليل حجم الشطف إلى الحد الأقصى.

خطوات زيادة التركيز أثناء الاستخراج:

• زيادة مدخلات العينة دون تمييع: بشكل أساسي, استخدام المزيد من الأنسجة أو الخلايا ضمن قدرة المخزن المؤقت للتحلل.
• تحسين الربط: ضمان الخلط الدقيق للمخزن المؤقت للتحلل مع العينة للتحلل الكامل. بعد إضافة الخرز المغناطيسي, السماح بوقت حضانة كاف (على سبيل المثال, 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة) لكي يرتبط RNA بالخرز بشكل كامل.
• خطوة حاسمة: تقليل حجم شطف! هذه هي الطريقة الأكثر مباشرة وفعالية. بدلاً من استخدام الحد الأقصى لحجم الشطف الموصى به (على سبيل المثال, 50 ميكرولتر), حاول الشطف مع 20 ميكرولتر أو حتى 15 ميكروليتر من الماء الخالي من RNase. يمكن أن يؤدي التسخين المسبق لمحلول الشطف إلى 55-65 درجة مئوية وتركه في حالة احتضان لمدة 2-5 دقائق إلى تحسين كفاءة الشطف بشكل كبير.

3.خاتمة

للحصول على نتائج مثالية, فكر في استخدام كواشف الاستخلاص المعتمدة على الخرز المغناطيسي من شركة Shanghai Lingjun Biotechnology Co., المحدودة. تتمتع الشركة بأكثر من عشر سنوات من الخبرة المتخصصة في مجال تكنولوجيا الاستخلاص المعتمدة على الخرز المغناطيسي وتتخصص في أبحاث الخرز المغناطيسي.

مزود

شركة شنغهاي لينغجون للتكنولوجيا الحيوية, المحدودة.تأسست في 2016 وهي شركة متخصصة في تصنيع المواد المغناطيسية الحيوية وكواشف استخلاص الحمض النووي.

لدينا خبرة غنية في استخراج وتنقية الحمض النووي, تنقية البروتين, فصل الخلايا, التألق الكيميائي, وغيرها من المجالات التقنية.

منتجاتنا تستخدم على نطاق واسع في العديد من المجالات, مثل الفحوصات الطبية, الاختبارات الجينية, البحوث الجامعية, التكاثر الوراثي, وهكذا. نحن لا نقدم المنتجات فحسب، بل يمكننا أيضًا إجراء تصنيع المعدات الأصلية, أوديإم, وغيرها من الاحتياجات. إذا كان لديك حاجة ذات صلة, لا تتردد في الاتصال بنا .