Den ultimate guiden for å maksimere RNA-konsentrasjonen din

Introduksjon

Økende RNA-konsentrasjon er et veldig vanlig krav i molekylærbiologiske eksperimenter. De følgende to punktene er avgjørende.

1. Valg og bearbeiding av utgangsmateriale

1.1 Øk mengden startmateriale:

Dette er den mest enkle tilnærmingen. Bruk mer vev eller celler innenfor den tillatte kapasiteten til lyseringsbufferen. For eksempel, hvis settet anbefaler 10–50 mg vev, du kan prøve å bruke den øvre grensen på 50 mg eller til og med litt mer (sikre at lyseringsbufferen dekker og lyserer materialet fullstendig).

1.2 Velg materialer med høyt RNA-uttrykk:

Hvis eksperimentet tillater det, velge vev eller celler som er rike på cytoplasma og metabolsk aktive, da de naturlig inneholder høyere RNA-nivåer.

1.3 Forstyrr prøven effektivt:

• Vev: Mal grundig i flytende nitrogen til det blir et fint pulver før lyseringsbufferen tilsettes. Alternativt, bruk en vevshomogenisator for fullstendig homogenisering. Ineffektiv forstyrrelse er en av hovedårsakene til lavt utbytte.
• Celler: Sørg for at lyseringsbufferen har full og rask kontakt med cellene. For adherente celler, legg lyseringsbufferen direkte til kulturskålen og pipetter for å lysere.

2. Optimalisering av utvinningsprosessen

Magnetisk perlebasert RNA-ekstraksjon: Hvordan enkelt få RNA med høy konsentrasjon og konsentrere det ytterligere

Nøkkelen til å oppnå høy RNA-konsentrasjon med magnetisk perlebasert ekstraksjon er å maksimere binding og minimere elueringsvolum.

Trinn for å øke konsentrasjonen under ekstraksjon:

• Øk prøveinngang uten å fortynne: I bunn og grunn, bruke mer vev eller celler innenfor lyseringsbufferens kapasitet.
• Optimaliser bindingen: Sørg for grundig blanding av lyseringsbufferen med prøven for fullstendig lysering. Etter å ha lagt til magnetiske perler, tillate tilstrekkelig inkubasjonstid (f.eks., 10 minutter ved romtemperatur) for at RNA skal bindes fullstendig til kulene.
• Kritisk trinn: Reduser elueringsvolumet! Dette er den mest direkte og effektive metoden. I stedet for å bruke maksimalt anbefalt elueringsvolum (f.eks., 50 μL), prøv å eluere med 20 μL eller til og med 15 μL RNase-fritt vann. Forvarming av elueringsbufferen til 55–65 °C og la den inkubere i 2–5 minutter kan forbedre elueringseffektiviteten betydelig..

3.Konklusjon

For optimale resultater, vurder å bruke magnetiske perlebaserte ekstraksjonsreagenser fra Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd. Selskapet har over et tiår med dedikert erfaring innen magnetisk perlebasert utvinningsteknologi og spesialiserer seg på magnetisk perleforskning.

Leverandør

Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd.ble etablert i 2016 som er en profesjonell produsent av biomagnetiske materialer og nukleinsyreekstraksjonsreagenser.

Vi har rik erfaring innen utvinning og rensing av nukleinsyre, proteinrensing, celleseparasjon, kjemiluminescens, og andre tekniske felt.

Våre produkter er mye brukt på mange felt, som medisinsk testing, genetisk testing, universitetsforskning, genetisk avl, og så videre. Vi leverer ikke bare produkter, men kan også påta oss OEM, ODM, og andre behov. Hvis du har et relatert behov, ta gjerne kontakt med oss .