Panduan Terbaik untuk Memaksimumkan Kepekatan RNA Anda

pengenalan

Bertambah kepekatan RNA adalah keperluan yang sangat biasa dalam eksperimen biologi molekul. Dua perkara berikut adalah penting.

1. Pemilihan dan Pemprosesan Bahan Permulaan

1.1 Meningkatkan jumlah bahan permulaan:

Ini adalah pendekatan yang paling mudah. Gunakan lebih banyak tisu atau sel dalam kapasiti yang dibenarkan penimbal lisis. Contohnya, jika kit mengesyorkan 10–50 mg tisu, anda boleh cuba menggunakan had atas 50 mg atau lebih sedikit (memastikan penimbal lisis menutup dan melisiskan bahan sepenuhnya).

1.2 Pilih bahan dengan ekspresi RNA tinggi:

Jika eksperimen membenarkan, pilih tisu atau sel yang kaya dengan sitoplasma dan aktif secara metabolik, kerana ia secara semula jadi mengandungi tahap RNA yang lebih tinggi.

1.3 Mengganggu sampel dengan cekap:

• Tisu: Kisar dengan teliti dalam nitrogen cecair sehingga ia menjadi serbuk halus sebelum menambah penimbal lisis. Sebagai alternatif, gunakan penghomogen tisu untuk penghomogenan lengkap. Gangguan yang tidak cekap adalah salah satu sebab utama hasil yang rendah.
• sel: Pastikan penimbal lisis membuat sentuhan penuh dan pantas dengan sel. Untuk sel yang melekat, terus menambah penimbal lisis ke dalam hidangan kultur dan pipet untuk lisis.

2. Mengoptimumkan Proses Pengekstrakan

Pengekstrakan RNA Berasaskan Manik Magnet: Cara Mudah Mendapatkan RNA Kepekatan Tinggi dan Lebih Memusatkannya

Kunci untuk mencapai kepekatan RNA yang tinggi dengan pengekstrakan berasaskan manik magnet ialah memaksimumkan pengikatan dan meminimumkan volum elusi.

Langkah Meningkatkan Kepekatan Semasa Pengekstrakan:

• Tingkatkan input sampel tanpa mencairkan: Secara asasnya, menggunakan lebih banyak tisu atau sel dalam kapasiti penimbal lisis.
• Optimumkan pengikatan: Pastikan pencampuran menyeluruh penimbal lisis dengan sampel untuk lisis lengkap. Selepas menambah manik magnet, membenarkan masa inkubasi yang mencukupi (cth., 10 minit pada suhu bilik) untuk RNA mengikat sepenuhnya pada manik.
• Langkah kritikal: Kurangkan isipadu elusi! Ini adalah kaedah yang paling langsung dan berkesan. Daripada menggunakan volum elusi maksimum yang disyorkan (cth., 50 μL), cuba elusi dengan 20 μL atau pun 15 μL air bebas RNase. Pra-memanaskan penimbal elusi kepada 55–65°C dan membiarkannya mengeram selama 2–5 minit boleh meningkatkan kecekapan elusi dengan ketara.

3.Kesimpulan

Untuk hasil yang optimum, pertimbangkan untuk menggunakan reagen pengekstrakan berasaskan manik magnet daripada Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd. Syarikat itu mempunyai lebih sedekad pengalaman berdedikasi dalam teknologi pengekstrakan berasaskan manik magnetik dan pakar dalam penyelidikan manik magnetik.

Pembekal

Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd.ditubuhkan pada 2016 yang merupakan pengilang profesional bahan biomagnet dan reagen pengekstrakan asid nukleik.

Kami mempunyai pengalaman yang kaya dalam pengekstrakan dan penulenan asid nukleik, penulenan protein, pemisahan sel, chemiluminescence, dan bidang teknikal yang lain.

Produk kami digunakan secara meluas dalam pelbagai bidang, seperti ujian perubatan, ujian genetik, penyelidikan universiti, pembiakan genetik, dan seterusnya. Kami bukan sahaja menyediakan produk tetapi juga boleh menjalankan OEM, ODM, dan keperluan lain. Jika anda mempunyai keperluan yang berkaitan, sila hubungi kami .