La guía definitiva para maximizar su concentración de ARN

Introducción

Creciente concentración de ARN Es un requisito muy común en experimentos de biología molecular.. Los siguientes dos puntos son cruciales.

1. Selección y procesamiento de material de partida.

1.1 Aumentar la cantidad de material de partida.:

Este es el enfoque más sencillo.. Utilice más tejido o células dentro de la capacidad permitida del tampón de lisis. Por ejemplo, si el kit recomienda entre 10 y 50 mg de tejido, puedes intentar usar el límite superior de 50 mg o incluso un poco más (asegurar que el tampón de lisis cubra completamente y lisa el material).

1.2 Seleccionar materiales con alta expresión de ARN.:

Si el experimento lo permite, elegir tejidos o células que sean ricos en citoplasma y metabólicamente activos, ya que naturalmente contienen niveles más altos de ARN.

1.3 Interrumpir eficientemente la muestra:

• Tejido: Muela bien en nitrógeno líquido hasta que se convierta en un polvo fino antes de agregar el tampón de lisis.. Alternativamente, Utilice un homogeneizador de tejidos para una homogeneización completa.. La disrupción ineficiente es una de las principales razones del bajo rendimiento.
• Células: Asegúrese de que el tampón de lisis haga contacto total y rápido con las células.. Para células adherentes, agregue directamente el tampón de lisis a la placa de cultivo y pipetee para lisar.

2. Optimización del proceso de extracción

Extracción de ARN basada en perlas magnéticas: Cómo obtener fácilmente ARN de alta concentración y concentrarlo aún más

La clave para lograr una alta concentración de ARN con la extracción basada en perlas magnéticas es maximizar la unión y minimizar el volumen de elución..

Pasos para aumentar la concentración durante la extracción:

• Aumente la entrada de muestra sin diluir: Fundamentalmente, utilizar más tejido o células dentro de la capacidad del tampón de lisis.
• Optimizar enlace: Asegúrese de mezclar bien el tampón de lisis con la muestra para una lisis completa.. Después de agregar cuentas magnéticas, permitir suficiente tiempo de incubación (p.ej., 10 minutos a temperatura ambiente) para que el ARN se una completamente a las perlas.
• Paso crítico: Reducir el volumen de elución! Este es el método más directo y eficaz.. En lugar de utilizar el volumen de elución máximo recomendado (p.ej., 50 µL), intente eluir con 20 µL o incluso 15 μL de agua libre de RNasa. Precalentar el tampón de elución a una temperatura de 55 a 65 °C y dejarlo incubar durante 2 a 5 minutos puede mejorar significativamente la eficiencia de la elución..

3.Conclusión

Para resultados óptimos, Considere el uso de reactivos de extracción basados ​​en perlas magnéticas de Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Limitado. La empresa tiene más de una década de experiencia dedicada a la tecnología de extracción basada en perlas magnéticas y se especializa en la investigación de perlas magnéticas..

Proveedor

Shanghai Lingjun Biotecnología Co., Limitado.se estableció en 2016 que es un fabricante profesional de materiales biomagnéticos y reactivos de extracción de ácidos nucleicos..

Tenemos una rica experiencia en extracción y purificación de ácidos nucleicos., purificación de proteínas, separación celular, quimioluminiscencia, y otros campos técnicos.

Nuestros productos son ampliamente utilizados en muchos campos., como pruebas médicas, pruebas genéticas, investigación universitaria, mejoramiento genético, etcétera. No solo proporcionamos productos sino que también podemos realizar OEM, ODM, y otras necesidades. Si tienes una necesidad relacionada, no dude en contactarnos .