Eastóscadh aigéad núicléach trí mhodh coirníní maighnéadacha: cruinn agus éifeachtach “glacadóir géine”

I réimse na bitheolaíochta mhóilíneach agus diagnóis leighis, Is é eastóscadh aigéid núicléacha an chéad chéim chun an cód géiniteach a dhíghlasáil. Ó bhrath aigéid núicléacha den choróinvíreas go hanailís géine ailse, bíonn tionchar díreach ag íonacht agus táirgeacht aigéid núicléigh ar chruinneas na dtorthaí. Le blianta beaga anuas, an teicneolaíocht eastóscadh aigéid núicléacha coirníní maighnéadacha, lena éifeachtach, saintréithe solúbtha agus uathoibríoch, tar éis an modh clóirín feanól traidisiúnta agus modh colún lártheifeacha a chur in ionad de réir a chéile, agus a bheith ar an “uirlis réalta” den tsaotharlann.

1. Prionsabail agus nós imeachta eastóscadh aigéid núicléigh trí mhodh coirníní maighnéadacha

Is é croílár an mhodhanna coirníní maighnéadacha ná nanacháithníní maighnéadacha modhnaithe dromchla a úsáid (faoi 50-500 nm in trastomhas) chun ceangal le haigéid núicléacha trí asú leictreastatach, idirghníomhú hidreafóbach, nó ligands sonracha (mar shampla grúpaí hiodrocsaile sileacain agus carbocsail). Áirítear ar a phróiseas oibríochta na céimeanna seo a leanas:

lysis samplach: Scriosann an lysate an membrane cille / capsid víreasach agus scaoileann sé an t-aigéad núicléach;

Ceangailteach coirníní maighnéadach: nascann coirníní maighnéadacha go sonrach le haigéid núicléacha chun a “aigéad núicléach-coimpléasc coirníní maighnéadach”;

Scaradh maighnéadach: réimse maighnéadach seachtrach chun coirníní maighnéadacha a asú, caith an leacht eisíontais;

Níochán: maolán chun próitéiní a bhaint, polaisiúicrídí agus ábhar salaithe eile;

Elution: Scarann ​​an tuaslagán salainn íseal an t-aigéad núicléach ó na coirníní maighnéadacha chun aigéad núicléach ard-íonachta a fháil.

Ní éilíonn an próiseas seo colún lártheifeacha nó tuaslagóir orgánach, fráma maighnéadach amháin, na céimeanna oibríochta a shimpliú go mór.

2. Comparáid idir an modh coirnín maighnéadach leis an modh traidisiúnta

A. Modh traidisiúnta feanól-clóirín: tedious agus contúirteach

Prionsabal: Baintear aigéad núicléach le tuaslagóirí orgánacha amhail feanól agus clóraform, agus scartha le lártheifneoiriú;

Míbhuntáistí: céimeanna casta (gá lártheifneoiriú iolrach), úsáid imoibrithe tocsaineacha (dochar don tsláinte), ráta aisghabhála íseal (éasca a chur faoi deara briste nó caillteanas aigéid núicléacha), agus deacair uathoibriú.

b. Modh colún lártheifeacha: rogha comhréitigh

Prionsabal: Aigéad núicléach in éineacht le colún lártheifneoir membrane glóthach shilice, íonaithe le fórsa lártheifeacha;

Buntáistí: íonachta ard, oiriúnach le haghaidh samplaí traidisiúnta;

Míbhuntáistí: ag brath ar lártheifneoir, céimeanna cumbersome (aistriú il-leacht), tá an éifeacht éagobhsaí, agus tá costas earraí inchaite colún lártheifeacha ard.

c. Modh coirníní maighnéadach: teicneolaíocht uasghrádaithe cuimsitheach

Éifeachtúlacht: leibhéal ard uathoibrithe, is féidir leis na céadta samplaí a phróiseáil ag an am céanna, am-íditheach giorraithe ag níos mó ná 30%;

Íogaireacht: rian samplaí a aisghabháil (cosúil le DNA saor ó phlasma) tá 20% -30% níos airde ná an modh colún lártheifeacha;

Inoiriúnaitheacht: is féidir samplaí casta a láimhseáil (mar feces, ithir, fíochán FFPE), le cumas láidir frith-chur isteach;

Cosaint agus sábháilteacht an chomhshaoil: úsáid tuaslagóirí orgánacha a laghdú agus an baol truaillithe a laghdú.

3. Buntáistí lárnacha an mhodhanna bead maighnéadach

Tréchur ard agus uathoibriú: ionstraim oiriúnaitheach uathoibríoch eastósctha aigéid núicléacha, oiriúnach le haghaidh scagadh ar scála mór (mar bhrath COVID-19);

Ard-íonacht agus toradh ard: an grúpa feidhme dromchla coirníní maighnéadach asaithe roghnach d'aigéad núicléach, tá an ráta iarmhar eisíontais níos ísle ná an modh traidisiúnta;

Saincheapadh solúbtha: is féidir le coirníní maighnéadacha grúpaí feidhmiúla éagsúla a mhodhnú, oiriúnú do DNA, RNA nó ceanglais shonracha eastósctha blúire;

Freagra tapa: amháin 30 nóiméad ón sampla go dtí an toradh, cabhrú le cásanna éigeandála mar an eipidéim.

4. Cásanna iarratais agus ionchais don todhchaí

Diagnóis leighis: na céimeanna lárnacha de COVID-19, HPV agus marcóir siadaí a bhrath;

Réimsí taighde eolaíochta: seicheamh aonchealla, anailís ar mhicribhithóim comhshaoil;

Sábháilteacht bia: chun baictéir phataigineacha nó comhábhair ghéinmhodhnaithe i mbia a bhrath.

Sa todhchaí, forbróidh an modh bead maighnéadach tuilleadh i dtreo miniaturization (cosúil le comhtháthú sliseanna microfluidic) agus faisnéis (Próiseas rialaithe AI), agus tóiriú na míochaine beachtais agus braite pointe-in-am a chur chun cinn(POCT).

5. Nótaí agus míthuiscintí coitianta

Miotas 1: Na coirníní maighnéadacha níos mó, is amhlaidh is fearr? Déanfaidh coirníní maighnéadacha iomarcacha neamhíonachtaí a ionsú, ach an íonacht a laghdú;

Miotas 2: An níocháin níos mó, is amhlaidh is fearr? D’fhéadfadh caillteanas aigéid núicléacha a bheith mar thoradh ar níocháin iomarcach;

Eochairphointe: ba cheart an córas bead maighnéadach agus imoibrí cuí a roghnú de réir an chineáil sampla chun athsholáthar dall a sheachaint.

Soláthraí

Shanghai Lingjun Biteicneolaíocht Co., Teo.bunaíodh i 2016 atá ina mhonaróir gairmiúil d'ábhair bithmhaighnéadacha agus imoibrithe eastóscadh aigéid núicléacha.

Tá taithí shaibhir againn in eastóscadh agus íonú aigéad núicléasach, íonú próitéine, scaradh cille, ceimileacanacht, agus réimsí teicniúla eile.

Úsáidtear ár gcuid táirgí go forleathan i go leor réimsí, mar thástáil leighis, tástáil ghéiniteach, taighde ollscoile, pórú géiniteach, agus mar sin de. Ní chuirimid ar fáil ach táirgí ach freisin is féidir tabhairt faoi OEM, ODM, agus riachtanais eile. Má tá riachtanas gaolmhar agat, bíodh leisce ort teagmháil a dhéanamh linn .