Qual é o princípio do imunoensaio fluorescente

O conceito de imunoensaio fluorescente é uma tecnologia analítica baseada no reconhecimento específico de anticorpo-antígeno, que detecta moléculas alvo móveis através de sinais fluorescentes. Esta tecnologia combina múltiplas disciplinas, como imunologia, fluorescência e bioquímica, e tem as vantagens de alta especificidade, rapidez, simplicidade e ampla aplicação. No entanto, a detecção cromatográfica tem um certo atraso, e o alvo no objeto de teste só pode ser detectado quando atinge uma certa concentração. Comparado com PCR, a sensibilidade não é alta. A seguir está uma breve introdução à cromatografia de imunofluorescência.

EU. Princípio do Imunoensaio Fluorescente

A tecnologia de imunoensaio fluorescente utiliza um material de cromatografia em tira de fibra com uma linha de detecção fixa (antígeno revestido, Linha T) e linha de controle de qualidade (anticorpo, Linha C) como fase estacionária e o líquido de teste como fase móvel. O anticorpo ou antígeno marcado com fluorescência é fixado na almofada de conexão, e o analito se move na tira cromatográfica através de ação capilar.

Para antígenos macromoleculares (proteínas, vírus, etc.) com múltiplos determinantes antigênicos, o “sanduíche” o método de imunocromatografia em sanduíche de anticorpo duplo é geralmente usado. Aquilo é, o analito primeiro se liga ao anticorpo marcado com fluorescência sob a ação da fase móvel, e então se liga ao anticorpo revestido quando atinge a linha de detecção para formar um tipo sanduíche de anticorpo duplo.

Durante o teste, a solução da amostra será cromatografada para cima sob o efeito capilar, e dois resultados de exibição aparecerão: se for negativo, a amostra não se liga ao anticorpo fluorescente, o anticorpo fluorescente se liga ao agente de acoplamento de amostra específico, e o resultado do teste do instrumento correspondente é negativo; se for positivo, a amostra reage primeiro com o anticorpo fluorescente, e quando o conteúdo do antígeno da amostra atinge uma certa quantidade, o anticorpo fluorescente não se liga mais ao agente de acoplamento de amostra específico na área de teste, e o resultado do teste do instrumento correspondente é positivo.

II. Aplicações do Imunoensaio de Fluorescência

1. Campo biomédico: Detecção de várias moléculas biológicas no corpo humano, como marcadores tumorais, vírus, bactérias, drogas, etc., para diagnóstico clínico, monitoramento do tratamento, etc..

2. Campo de ciências da vida: Detecção de proteínas, ácidos nucleicos, células e moléculas celulares, etc., para análise de expressão gênica, pesquisa de interação de proteínas, análise celular, etc..

III. Desvantagens do imunoensaio de fluorescência

Devido à temperatura instável do laboratório, umidade, luz e outras condições, armazenamento inadequado do kit de teste, fraca estabilidade do substrato de fluoresceína, etc., os resultados do teste podem ser instáveis.

4. Tendência de desenvolvimento de imunoensaio fluorescente

A tecnologia de imunoensaio fluorescente é mais amplamente utilizada no campo do diagnóstico clínico, especialmente na triagem rápida de doenças infecciosas, detecção de marcadores tumorais e diagnóstico precoce de doenças cardiovasculares.

Além do diagnóstico clínico, a análise de imunoensaio fluorescente é gradualmente aplicada a testes de segurança alimentar, monitoramento ambiental e outros campos, fornecendo forte suporte para detecção rápida nesses campos.

O mercado de imunoensaios fluorescentes continuará a manter uma tendência de crescimento constante nos próximos anos. Com o duplo impulso do progresso tecnológico e da procura do mercado, temos motivos para acreditar que a indústria dará início a uma perspectiva de desenvolvimento mais ampla.

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