Aplicação da tecnologia de marcadores moleculares de DNA na identificação de medicamentos fitoterápicos chineses

Quais são os métodos de identificação dos medicamentos fitoterápicos chineses?

Os principais métodos de identificação da fitoterapia tradicional chinesa incluem a identificação da origem, identificação microscópica, identificação física e química, identificação biológica, etc.. No entanto, essas características de identificação são quase todas fenótipos genéticos de organismos, que não são apenas afetados por fatores genéticos, mas também intimamente relacionados ao estágio de crescimento e desenvolvimento dos organismos, condições ambientais, e atividades humanas, como introdução e domesticação, processamento, etc.. Eles têm grande variabilidade e aleatoriedade e inevitavelmente apresentam deficiências como forte subjetividade, fraca repetibilidade, e estabilidade, que têm um certo impacto na confiabilidade dos resultados de identificação.

Quais são as aplicações da tecnologia de marcadores moleculares de DNA no campo da identificação de plantas?

Nos últimos anos, com o desenvolvimento da tecnologia de biologia molecular, A tecnologia de marcadores moleculares de DNA tem sido amplamente utilizada no estudo da diversidade genética, sistemática, e taxonomia de plantas medicinais e penetrou gradualmente no campo de identificação de medicamentos fitoterápicos chineses, promover o desenvolvimento de pesquisas sobre a identificação de medicamentos fitoterápicos chineses. Como portador de informação genética, As moléculas de DNA possuem um grande conteúdo de informação e um alto grau de estabilidade genética dentro da mesma espécie.. Eles não são afetados por fatores ambientais externos e diferenças nos estágios de desenvolvimento biológico e tecidos de órgãos. Portanto, usar características moleculares de DNA como marcadores genéticos para a identificação de medicamentos fitoterápicos chineses é mais preciso e confiável e é muito adequado para identificação de plantas de espécies intimamente relacionadas, variedades facilmente confundidas, variedades raras, etc..

1. Amplificação direta do polimorfismo de comprimento de fragmento

Esta tecnologia é uma nova tecnologia de marcador molecular. Baseia-se na tecnologia PCR para amplificar fragmentos de restrição de DNA genômico. O DNA genômico é primeiro cortado com endonucleases de restrição, e então adaptadores de fita dupla são conectados às extremidades dos fragmentos de DNA. A sequência adaptadora e a sequência do sítio de restrição adjacente são usadas como sítios de ligação do primer. É um novo método para detectar polimorfismos genéticos e sequenciar diretamente produtos amplificados.

2. Amplificação aleatória de DNA polimórfico

Esta tecnologia é uma tecnologia de PCR que utiliza oligonucleotídeos de 10 pb como primers. Porque esta tecnologia é rápida e sensível, não requer que a sequência do genoma seja testada, e não requer alta qualidade de modelo, tem vantagens únicas no estudo da sistemática de plantas medicinais. Pode fornecer informações polimórficas de todo o genoma através de diferentes primers, evitando a influência de diferentes ambientes de crescimento e períodos de desenvolvimento, comparar e analisar táxons no nível do DNA, determinar a relação entre espécies e variedades de plantas medicinais, e desenhe uma árvore filogenética.

3. Polimorfismo entre sequências de repetição simples

Esta tecnologia é uma tecnologia de marcador molecular semelhante à amplificação aleatória de DNA polimórfico. Seus primers são projetados com base em uma determinada sequência repetitiva do genoma para formar uma série de primers específicos., incluindo dinucleotídeos, trinucleotídeos, e tetranucleotídeos, que são complementares às sequências de microssatélites no genoma, e têm sequências de âncora de oligonucleotídeos que se ligam ao 5′ ou 3′ final da sequência de repetição genômica, cerca de 17-22bp de comprimento. Além das vantagens da amplificação aleatória do DNA polimórfico, esta tecnologia é mais direcionada. Ele usa primers âncora de repetição para amplificar fragmentos entre sequências de repetição simples e tem as vantagens de boa repetibilidade, alta estabilidade, e polimorfismo rico.

4. Método de sequenciamento de DNA

O método de sequenciamento de DNA consiste em determinar a sequência de nucleotídeos do fragmento do gene alvo e comparar as diferenças entre as sequências para determinar os locais específicos com significado de identificação entre várias populações., de modo a atingir o objectivo de identificação. Para resolver o problema das diferenças entre as famílias, espécies, ou populações dentro de uma espécie de fitoterapia chinesa, fragmentos de genes apropriados são selecionados para determinação e análise de sequência.

Shanghai Lingjun fornece reagentes de extração de DNA genômico de fitoterapia chinesa eficientes e de alta qualidade (método de conta magnética). O processo de uso é seguro e não requer moagem com nitrogênio líquido. O produto não contém reagentes nocivos como fenol e clorofórmio. O produto extraído tem boa pureza e alto rendimento. Também pode obter bons efeitos de extração para amostras com alto teor de polissacarídeos e polifenóis.

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