O reagente de extração de ácido nucleico baseado no método de esfera magnética expirado ainda pode ser usado?

Os seguintes fatores precisam ser considerados de forma abrangente e os riscos precisam ser cuidadosamente avaliados:

1. O impacto dos reagentes expirados

Degradação do desempenho do cordão magnético: As esferas magnéticas podem agregar, degradar ou perder seus grupos de modificação de superfície, resultando em eficiência de ligação reduzida e afetando o rendimento ou pureza de ácidos nucleicos.

Inativação de buffer: Proteinase K, tampão de lise ou tampão de lavagem pode se tornar ineficaz (como mudanças de pH, precipitação e sedimentação), levando à lise incompleta ou resíduo de impurezas.

Resultados não confiáveis: Os ácidos nucleicos extraídos podem ser degradados, contaminados ou com concentração insuficiente, afetando experimentos downstream (como PCR, sequenciamento).

2. Etapas para avaliar a usabilidade

Inspeção visual: Verifique se o reagente apresenta alguma precipitação, turbidez, mudança de cor ou estratificação (como quando as esferas magnéticas não podem ser ressuspensas após a precipitação).

Teste de desempenho: Extrair com uma amostra padrão de concentração conhecida (como células cultivadas ou DNA padrão), e compare o rendimento, pureza (A260/A280) e efeito de aplicação downstream (como eficiência de amplificação) do reagente fresco.

Configure controles positivos e negativos para verificar a especificidade do reagente.

Principais requisitos experimentais: Se a qualidade do ácido nucleico for extremamente exigente (como sequenciamento unicelular, amostras de baixa abundância), recomenda-se substituir diretamente por um novo reagente.

3. Riscos Potenciais

Resultados falsos negativos/falso positivos: Especialmente para amostras diagnósticas ou clínicas, eles podem levar a conclusões incorretas.

Custo de experimentos repetidos: Se os dados se tornarem não confiáveis ​​devido à falha dos reagentes, pode perder mais tempo e amostras.

Perda de amostra: Amostras valiosas ou limitadas (como biópsias clínicas, microorganismos raros) não deve ser processado de forma arriscada com reagentes vencidos.

• Sugestões para experimentos não críticos:

Se os resultados do teste forem aceitáveis, eles podem ser usados ​​temporariamente para experimentos preliminares ou para fins de ensino.

Experimentos críticos: É essencial substituir os reagentes vencidos para garantir a confiabilidade dos resultados.

Armazenamento em alíquotas: Se os reagentes forem propensos a deterioração, compre-os e depois aliquote-os e congele-os (para evitar congelamentos e descongelamentos repetidos), que pode estender sua estabilidade. Resumo

Os reagentes expirados ainda podem ser eficazes, mas eles precisam ser rigorosamente verificados. Depois de pesar os riscos, recomenda-se priorizar o uso de reagentes que estejam dentro do prazo de validade, especialmente quando estão envolvidos em publicações de pesquisas científicas, diagnósticos clínicos, ou amostras preciosas.

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Xangai Lingjun Biotecnologia Co., Ltda.foi estabelecido em 2016 que é um fabricante profissional de materiais biomagnéticos e reagentes de extração de ácido nucleico.

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