Como garantir a qualidade da extração de RNA de urina e outras amostras？

Urina e secreções vaginais, sêmen, lágrimas e outras amostras tornaram-se escolhas populares em pesquisas devido à sua não invasividade e fácil acesso. Portanto, etapas corretas de pré-tratamento são cruciais para extrair RNA de alta qualidade destas amostras. A seguir estão várias dicas de pré-tratamento que podem ajudar a melhorar a qualidade do RNA da urina e de outras amostras.

Manter volume de amostra suficiente

O conteúdo de RNA nas amostras de urina é relativamente baixo, portanto, é recomendado manter um volume de amostra maior, que pode não só melhorar a taxa de recuperação de RNA, mas também aumenta a qualidade geral da extração de RNA.

Coleta de amostras padronizadas

A qualidade das amostras de urina é afetada por muitos fatores, incluindo horário de coleta, frequência de micção, etc.. Estabelecer um procedimento de coleta padronizado pode ajudar a reduzir o impacto dessas variáveis ​​na qualidade da amostra.

Uso de protetores

Embora seja improvável que as amostras de urina necessitem de protetores adicionais quando criopreservadas, em alguns casos, o uso de protetores como o RNAlater pode ajudar a manter a estabilidade do RNA.

Centrifugação apropriada

A centrifugação pode ajudar a remover precipitados e outras impurezas na urina, garantindo que eles não perturbarão a extração de RNA.

Processamento de outras amostras

Usar solução de lavagem de esperma para purificar o esperma pode remover completamente a contaminação de outras células, estabelecendo uma boa base para a próxima etapa de extração de RNA de esperma de alta qualidade. Para secreções vaginais, 10 mL de fluido de lavagem vaginal geralmente é coletado, e o precipitado é armazenado em 1 mL RNAlater após centrifugação e então armazenado a -70°C para uso posterior. O melhor método de pré-tratamento para amostras de lágrimas é colocá-las em 1.5 mL de tubos de centrífuga sem RNase, congele-os a -70 ℃, e então extrair RNA quando necessário. O congelamento em baixa temperatura pode maximizar a qualidade do RNA.

A estratégia de pré-tratamento acima pode melhorar eficazmente a qualidade do RNA na urina e outras amostras, fornecendo uma base sólida para trabalhos de pesquisa subsequentes.

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