Как магнитные шарики улучшают тестирование RSV: Автоматизация & Чувствительность

Введение

Экстракция нуклеиновых кислот с помощью магнитных шариков используется для очистки высококачественной вирусной РНК из сложных респираторных образцов посредством эффективных и специфичных процессов связывания и промывки во время экстракции респираторно-синцитиального вируса. (РСВ) нуклеиновая кислота. Этот метод отвечает строгим требованиям высокочувствительных технологий молекулярного обнаружения.. Благодаря своим характеристикам автоматизации, высокая пропускная способность, и высокая безопасность, Экстракция нуклеиновых кислот с помощью магнитных шариков стала незаменимым и мощным инструментом для обнаружения возбудителей RSV в современных клинических лабораториях и областях общественного здравоохранения..

1. Приложение: Специфический рабочий процесс метода на основе магнитных шариков при экстракции нуклеиновых кислот RSV

Основной принцип экстракции нуклеиновых кислот RSV на основе магнитных шариков заключается в использовании суперпарамагнитных микро-наномагнитных шариков с модифицированной поверхностью.. В особых буферных условиях, эти шарики избирательно адсорбируют нуклеиновые кислоты (РНК) за счет электростатических взаимодействий, гидрофобные взаимодействия, или водородная связь, отделение их от белков, клеточный мусор, и другие примеси. Окончательно, очищенные нуклеиновые кислоты элюируются.

Специальный рабочий процесс для извлечения RSV из клинических образцов (например, мазки из носоглотки или жидкость бронхоальвеолярного лаважа) заключается в следующем:

1.1 Образец лизиса:

Собранный образец смешивается с буфером для лизиса, содержащим высокие концентрации хаотропных солей. (например, гуанидин изотиоцианат) и денатуранты (например, Паспорт безопасности). Основными целями этого шага являются:

Для инактивации вируса и денатурации белков вирусного капсида., высвобождение вирусной РНК (РСВ – это РНК-вирус.).

Разрушение РНКаз в образце, предотвращение деградации РНК.

Денатурировать и инактивировать другие биологические макромолекулы. (например, белки, полисахариды, липиды) в образце.

1.2 Адсорбция нуклеиновых кислот

Магнитные шарики добавляются в лизат.. При подходящих условиях pH и концентрации ионов соли., отрицательно заряженные молекулы нуклеиновой кислоты специфически адсорбируются на поверхности магнитных шариков (обычно с кварцевым покрытием) за счет водородных связей и гидрофобных взаимодействий, формирование “нуклеиновая кислота-магнитный шарик” сложный.

1.3 Стирка

Во внешнем магнитном поле, комплекс магнитных шариков и нуклеиновой кислоты адсорбируется на стенке трубки, и отработанная жидкость, содержащая белки, клеточный мусор, и другие примеси выбрасываются. Затем, гранулы промывают 2–3 раза 70–80% промывным раствором этанола для удаления остаточных солей., ингибиторы, и органические примеси.

1.4 Сушка

Образец кратковременно центрифугируют или оставляют стоять, чтобы остаточный этанол полностью испарился., избежание каких-либо побочных эффектов на последующую ПЦР или другие реакции амплификации..

1.5 Элюирование

Магнитное поле удалено., и вода, не содержащая РНКазы, или буфер с низким содержанием соли. (например, ТЕ-буфер) добавлен. В условиях низкой ионной силы, сила связи между нуклеиновыми кислотами и магнитными шариками нарушается, и РНК высвобождается из гранул в буфер для элюирования., получение высокочистой РНК RSV.

2. Преимущества метода на основе магнитных шариков при экстракции нуклеиновых кислот RSV

По сравнению с традиционной фенол-хлороформной экстракцией и колоночными методами, метод на основе магнитных шариков предлагает значительные преимущества для экстракции нуклеиновых кислот RSV:

• Высокая автоматизация и пропускная способность: Высокая совместимость с автоматическими экстракционными инструментами., возможность параллельной обработки в 96-луночных планшетах или даже более высокая производительность. Это значительно повышает эффективность, отвечающее требованиям крупномасштабных клинических испытаний, особенно в пиковые сезоны RSV.
• Простое управление, Время- и трудосбережение: Даже ручные операции относительно просты., избежание многократного центрифугирования и смены пробирок, необходимых в методах на основе колонок. Это снижает человеческий фактор и трудоемкость.. Весь процесс можно завершить за 30–60 минут..
• Высокая чистота и выход: Специально модифицированная поверхность магнитных шариков эффективно адсорбирует РНК и эффективно удаляет ингибиторы ПЦР. (например, гемоглобин, иммуноглобулины, гепарин, мочевина). Экстрагированная РНК имеет высокую чистоту., что делает его очень подходящим для чувствительного последующего обнаружения RT-qPCR, тем самым улучшая точность и чувствительность обнаружения.
• Высокая безопасность: Устраняет использование токсичных реагентов, таких как фенол и хлороформ., защита операторов’ здоровье и снижение лабораторного загрязнения.
• Высокая гибкость: Один и тот же набор магнитных шариков часто можно адаптировать для разных типов образцов. (мазки, сыворотка, ткани, среды для культивирования клеток, и т. д.) с незначительными корректировками условий лизиса и связывания.
• Нет остатка: Избегает риска образования остатков мембранных волокон, который может возникнуть при использовании колоночных методов..

3. Будущие перспективы

Перспективы методов обнаружения RSV на основе магнитных шариков и более широкой области молекулярной диагностики обширны.:

• Интеграция с POCT (Тестирование на месте оказания медицинской помощи): Разработка микрофлюидных чипов или картриджей, интегрирующих лизис., добыча, усиление, и обнаружение, с магнитными шариками в качестве среды для экстракции ядра. Это может обеспечить быструю прикроватную диагностику РСВ., подходит для первичных больниц, клиники, и даже домохозяйства.
• Мультиплексное обнаружение патогенов: Симптомы инфекции RSV часто напоминают симптомы вируса гриппа., SARS-CoV-2, аденовирус, и т. д.. Высокая производительность методов на основе магнитных шариков делает их идеальными для одновременного извлечения нуклеиновых кислот из нескольких вирусов в одном образце., возможность мультиплексной ПЦР или секвенирования для дифференциальной диагностики патогенов.
• Прямое применение в цифровой ПЦР и секвенировании нового поколения (НГС): Для технологий, требующих чрезвычайно высокой чистоты и целостности нуклеиновых кислот. (например, точное количественное определение вирусной нагрузки, секвенирование вирусного генома, и вариантный мониторинг), Методы на основе магнитных шариков позволяют получить высококачественные шаблоны., продвижение исследований в области точной медицины и вирусологии.
• Оптимизация и интеграция комплектов: В будущем комплектов станет больше “все-в-одном” и “предварительно упакованный,” сокращение количества шагов, требующих открытия крышек, минимизация рисков аэрозольного загрязнения, и обеспечение полностью автоматизированного “загружай и иди” рабочие процессы.
• Снижение затрат и более широкое внедрение: По мере развития процессов производства магнитных шариков и роста рыночной конкуренции, затраты еще больше снизятся, сделать эту технологию более доступной в учреждениях первичной медико-санитарной помощи.

4. Рекомендации по магнитным шарикам

При выборе магнитных бусин, такие факторы, как размер частиц, концентрация, модификация поверхности, дисперсность, и магнитную чувствительность следует учитывать. Вот несколько рекомендаций:

• Основные критерии отбора:
• Специфика: Высокая эффективность адсорбции РНК (особенно более короткие фрагменты вирусной РНК).
• Чувствительность: Подходит для образцов с низкой вирусной нагрузкой и высоким выходом..
• Чистота: Эффективно удаляет различные ингибиторы ПЦР..
• Стабильность: Минимальные различия от партии к партии, стабильная производительность, и длительный срок хранения.
• Совместимость: Совместимость с вашим автоматическим экстракционным инструментом или ручным рабочим процессом..

5. Рекомендация бренда

Шанхайская биотехнологическая компания Линцзюнь., ООО. предлагает различные модели магнитных шариков на основе диоксида кремния, широко используемых в диагностике возбудителей заболеваний.. Конкретно, их 160024 магнитные шарики подходят для респираторно-синцитиального вируса (РСВ) добыча. Эти шарики обеспечивают чрезвычайно высокую чувствительность обнаружения., обеспечение раннего скрининга во время заражения и предоставление драгоценного времени для контроля и профилактики заболеваний.

【Характеристики продукта】

Код продукта: 160024

Солидный контент: 100 мг/мл

Упаковка: 2 мл / 10 мл / 50 мл / 500 мл / 1000 мл

【Параметры продукта】

Активная группа: Si-OH

Магнитная матрица из шариков: Кремнезем

Средний размер частиц: 1.4 мкм

Сила магнитного насыщения: 75 ± 5 emu/g

【Преимущества продукта】

Высокая скорость адсорбции: Максимальная скорость восстановления превышает 95%, с высокой эффективностью адсорбции как для больших, так и для мелких фрагментов.

Сильные магнитные свойства: Сила магнитного насыщения 75 ± 5 emu/g.

Особенно подходит для экстракции вирусных нуклеиновых кислот и экстракции фрагментов ДНК без сыворотки/плазмы..

Высокая чистота и чувствительность при экстракции нуклеиновых кислот.

Отлаженный производственный процесс и превосходная стабильность от партии к партии.

В итоге, благодаря своей эффективности, безопасность, и автоматизация, метод на основе магнитных шариков стал основным подходом к экстракции нуклеиновых кислот RSV и будет играть все более важную роль в будущей диагностике и исследовании патогенов.. Выбор подходящих магнитных шариков является важным шагом в обеспечении точных и надежных результатов обнаружения..

Поставщик

Шанхайская биотехнологическая компания Линцзюнь., ОООбыл создан в 2016 который является профессиональным производителем биомагнитных материалов и реагентов для экстракции нуклеиновых кислот..

Мы имеем богатый опыт в экстракции и очистке нуклеиновых кислот., очистка белка, разделение клеток, хемилюминесценция, и другие технические области.

Наша продукция широко используется во многих областях., например, медицинское тестирование, генетическое тестирование, университетские исследования, генетическое разведение, и так далее. Мы не только поставляем продукцию, но и можем взять на себя OEM, ОДМ, и другие потребности. Если у вас есть соответствующая потребность, пожалуйста, не стесняйтесь обращаться к нам .