Treoir maidir le heastóscadh RNA éifeachtach: Ó phrionsabail go cleachtas, leithlisiú RNA ardchaighdeáin a chinntiú

Réamhrá na Eastóscadh RNA

Is céim bhunúsach é eastóscadh RNA i mbitheolaíocht mhóilíneach agus i dtaighde léiriú géine. Is é a chuspóir aonrú slán, RNA neamh-dhíghrádaithe (aigéad ribonucleic) ó shamplaí cille nó fíocháin. Glacann RNA páirt i bpróisis bhitheolaíocha éagsúla, amhail tras-scríobh faisnéise géiniteach agus sintéis próitéine i gcealla. Dá bhrí sin, tá sé ríthábhachtach RNA ardchaighdeáin a fháil chun anailís bhitheolaíoch mhóilíneach a dhéanamh ina dhiaidh sin, mar RT-PCR, Blot Thuaidh, Seicheamhú RNA, srl.

Prionsabal Eastóscadh RNA

Briseann dínádúraithe cealla nó fíocháin, agus ansin baintear RNA le tuaslagóirí orgánacha amhail Clóraform agus ansin deasctar é, nite, triomaithe, agus ar deireadh tuaslagtha.

Mar sin féin, ós rud é go bhfuil einsímí RNA i ngach áit agus féadfaidh siad RNA a dhíghrádú tráth ar bith, tá go leor áiteanna chun aird a thabhairt orthu sa turgnamh. Teipfidh ar aon fhaillí.

Seachain malairt slí in eastóscadh RNA

Conas an t-imoibrí eastósctha RNA is oiriúnaí a roghnú d'ábhair éagsúla.

D'fhéadfadh go mbeadh sé deacair a roghnú mar gheall ar na modhanna iomadúla leithlisithe RNA atá ann cheana féin. Faoi láthair, is é an modh is simplí agus is sábháilte ná scaradh colún, mar RNApure, a bhfuil tóir orthu mar gheall ar a oibriú simplí, am gearr agus íonachta ard. Ní éilíonn RNApure DNase chun DNA a dhíleá, rud a shábhálann am agus a sheachnaíonn díghrádú RNA, rud a mhéadaíonn an toradh; i gcomparáid le scaradh neamhcholún (mar TRIzol), baineann sé próitéiní agus neamhíonachtaí eile go glan, feabhsaíonn íonacht, agus tá sé an-oiriúnach do chealla, fíocháin, agus plandaí ginearálta. Tá sé níos deacra eastóscadh RNA plandaí a roghnú. Tá tionchar ag eastóscadh RNA plandaí ar ábhar feanóil, polaisiúicrídí, neamhíonachtaí próitéine, agus meitibilítí tánaisteacha. Go ginearálta, níl íonacht eastóscadh TRIzol ard, agus ní féidir go leor plandaí a bhaint as TRIzol.

Ag an am seo, is féidir leat trealamh eastósctha RNA iomlán plandaí polaisiúicríde agus polyphenol a roghnú (lus an chromchinn, piobair, cairéid, arbhar, lilies, cruithneacht, trátaí, cóilis, síol ráibe, srl.) agus trealamh uilíoch eastósctha RNA plandaí (oiriúnach don chuid is mó d'eastóscadh plandaí, lena n-áirítear leigheasanna luibhe Síneacha éagsúla, síolta plandaí, úlla, fíonchaora, sútha talún, bananaí, fadú, litchi, plandaí faiche, crainn giúise, do chrainn, crainn beithe, cóin péine corcra, coleus, poinsettia, oleander, fig, violet, ardaigh, dahlia, glóir na maidne, srl.); Is fiú a lua go bhfuil an eastóscadh RNA ó fola (lena n-áirítear serum, plasma, sreabhach cerebrospinal, táithíní éagsúla nó samplaí eile a bhfuil cion ard leachtach acu) níl úsáid modhanna TRIzol agus lysis cille fola dearga éifeachtach toisc nach bhfuil coscairí RNase ag maolán lysis cille fola dearga, agus tá RNA díghrádaithe go héasca sa phróiseas seo. Moltar TRIpure LS a úsáid (RP1101) nó trealamh eastósctha RNA iomlán fola (RP4001). Tá an modh seo oiriúnach le haghaidh eastóscadh RNA i dturgnaimh sliseanna próifíl slonn agus tá sé anois ina mhodh molta go náisiúnta.

Conas RNA bhaintear a stóráil?

Mura bhfuil sé ach le haghaidh stórála gearrthéarmach, ba chóir an RNA athshuiteáilte a chur ag -20°C; má tá sé le haghaidh stórála fadtéarmach, ba chóir é a chur ag -80 ° C. Nuair a stóráil RNA, méid beag de inhibitor RNase (RP5601) a chur leis chun díghrádú RNA a sheachaint, agus is féidir RNA a úsáid go díreach le haghaidh turgnaimh iartheachtacha. Má tá RNA le stóráil ar feadh i bhfad, Is féidir RNAlong a chur leis. Molaimid an réiteach RNA a roinnt i roinnt feadáin. Seachnóidh sé seo reo agus leá arís agus arís eile chun damáiste a dhéanamh don RNA agus chun éilliú RNase de thaisme a chosc.

Soláthraí

Shanghai Lingjun Biteicneolaíocht Co., Teo. bunaíodh i 2016 atá ina mhonaróir gairmiúil d'ábhair bithmhaighnéadacha agus imoibrithe eastóscadh aigéid núicléacha.

Tá taithí shaibhir againn in eastóscadh agus íonú aigéad núicléasach, íonú próitéine, scaradh cille, chemiluminescence agus réimsí teicniúla eile.

Úsáidtear ár gcuid táirgí go forleathan i go leor réimsí, mar thástáil leighis, tástáil ghéiniteach, taighde ollscoile, pórú géiniteach, agus mar sin de. Ní chuirimid ar fáil ach táirgí ach freisin is féidir tabhairt faoi OEM, ODM, agus riachtanais eile.Má tá riachtanas gaolmhar agat, bíodh leisce ort teagmháil a dhéanamh linn ag díolacháin01@lingjunbio.com.