Sådan udvindes DNA fra knogler

Inden for videnskabelig forskning eller identifikationsområder som arkæologi, retsmedicinsk videnskab, og palæontologi, videnskabsmænd har ofte brug for at få genetisk information om en organisme fra gamle knogle- eller tandprøver. Disse oplysninger er vigtige for undersøgelser såsom artsidentifikation, identitet, og miljøændringer. Imidlertid, udvinding af DNA fra knogler er en kompleks og teknisk krævende teknik på grund af prøvernes opbevaringsbetingelser. Denne artikel vil detaljere processen for, hvordan man effektivt udvinde DNA fra knogler.

jeg. Forberedelse

Udvælgelse af passende prøver: Ideelle prøver bør være velbevarede knogledele, der ikke er blevet alvorligt kontamineret. F.eks, menneskelige rester fundet på arkæologiske steder eller dyreknogler, der er bevaret i specifikke miljøer.

Rengøring og forarbejdning: Brug sterile værktøjer til at fjerne overfladesmud og andre forurenende stoffer for at minimere virkningen af ​​eksternt DNA på resultaterne. Nogle gange kemiske metoder (f.eks., opblødning i alkohol) er nødvendige for yderligere rengøring.

2. Knusning og demineralisering

Knusning af knogler: For at øge effekten af ​​reagenserne, knoglerne males normalt til fine partikler. Dette trin skal udføres under streng kontrol for at undgå introduktion af fremmed DNA.

Demineralisering: Ved at tilsætte en chelateringsmiddelopløsning såsom EDTA (ethylendiamintetraeddikesyre), calciumsaltindholdet i knoglen kan effektivt opløses væk, frigiver således de indkapslede celler. Denne proces kan tage timer eller endda dage.

3. DNA-ekstraktion

Cellelyse: Proteinase K og lyseringsopløsning tilsættes til det demineraliserede knoglemel for at fremme cellesprængning gennem opvarmning, tillader frigivelse af internt DNA. Efterfølgende, en centrifuge blev anvendt til at adskille supernatanten, dvs. væsken, der indeholder mål-DNA'et.

Oprensningstrin: DNA-oprensning udføres ved hjælp af den magnetiske perlemetode til nukleinsyreekstraktion, silicagelsøjler, eller andre kommercielt tilgængelige sæt. Disse metoder fjerner urenheder såsom proteiner og polysaccharider, mens de koncentrerer og bevarer rene DNA-fragmenter.

4. Kvalitetstest og analyse

Koncentrationsmåling: Mål den samlede mængde ekstraheret DNA og dets renhed ved hjælp af et UV-spektrofotometer, fluorescens kvantitativ PCR, osv.

Integritetsvurdering: kontrollere, om DNA-kæden er komplet gennem gelelektroforese, eller direkte udføre sekventering for indledningsvis at vurdere dens egnethed.

5. Forholdsregler over udvindingsprocessen

Nedbrydningsproblem: Med forlængelse af prøvebevaringstiden, DNA er tilbøjeligt til at gå i stykker, hydrolyse, og andre fænomener, resulterer i øget besvær med udvinding. Derfor, Der bør lægges særlig vægt på hurtig ekstraktion og reduktion af tab ved håndtering af ældgamle prøver.

Kontamineringskontrol: Aseptiske driftsnormer skal overholdes nøje under hele processen for at forhindre blanding af moderne menneske-afledt DNA, hvilket vil påvirke ægtheden af ​​de endelige resultater.

Udvindingen af ​​højkvalitets-DNA fra knogler er ikke kun afhængig af støtte fra avanceret videnskab og teknologi, men tester også forskernes faglige viden og omhyggelige operationsevner. Som forskning på dette område fortsætter med at udvikle sig, vi håber at kunne opklare flere af livets mysterier i fremtiden.

Leverandør

Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd.blev etableret i 2016 som er en professionel producent af biomagnetiske materialer og nukleinsyreekstraktionsreagenser.

Vi har stor erfaring med udvinding og oprensning af nukleinsyre, proteinoprensning, celleadskillelse, kemiluminescens og andre tekniske områder.

Vores produkter er meget udbredt inden for mange områder, såsom medicinsk test, genetisk testning, universitetsforskning, genetisk avl, og så videre. Vi leverer ikke kun produkter, men kan også påtage os OEM, ODM, og andre behov.Hvis du har et relateret behov, er du velkommen til at kontakte os påsales01@lingjunbio.com.

• Universal Total RNA Extraction Kit: Nøglen til at forhindre RNA-nedbrydning i rutineeksperimenter
• Magnetisk perle-nukleinsyreekstraktion: Den usynlige jæger, der fanger “Nipah virus”
• Magnetisk perlebaseret nukleinsyreekstraktionsteknologi: Fører effektivitetsrevolutionen i den biofarmaceutiske industri
• Praktisk evaluering af et universelt, magnetisk perle-baseret universelt total-RNA-ekstraktionssæt
• Magnetisk perlebaseret nukleinsyreekstraktion til præcisionsmedicin