Hvordan trekke ut DNA fra bein

I vitenskapelig forskning eller identifiseringsfelt som arkeologi, rettsmedisinsk vitenskap, og paleontologi, forskere trenger ofte å få genetisk informasjon om en organisme fra gamle bein- eller tannprøver. Denne informasjonen er viktig for studier som artsidentifikasjon, identitet, og miljøforandring. Imidlertid, uttak av DNA fra bein er en kompleks og teknisk krevende teknikk på grunn av lagringsforholdene til prøvene. Denne artikkelen vil detaljere prosessen for hvordan du effektivt trekke ut DNA fra bein.

jeg. Preparat

Valg av passende prøver: Ideelle prøver bør være godt bevarte beindeler som ikke har blitt alvorlig forurenset. For eksempel, menneskelige levninger funnet på arkeologiske steder eller dyrebein bevart i bestemte miljøer.

Rengjøring og bearbeiding: Bruk sterile verktøy for å fjerne overflatesmuss og andre forurensninger for å minimere innvirkningen av eksternt DNA på resultatene. Noen ganger kjemiske metoder (f.eks., bløtlegging i alkohol) er nødvendig for videre rengjøring.

2. Knusing og demineralisering

Knusing av bein: For å øke effekten av reagensene, knoklene males vanligvis til fine partikler. Dette trinnet må utføres under streng kontroll for å unngå introduksjon av fremmed DNA.

Demineralisering: Ved å tilsette en chelateringsmiddelløsning som EDTA (etylendiamintetraeddiksyre), kalsiumsaltinnholdet i beinet kan effektivt løses opp, og frigjør dermed de innkapslede cellene. Denne prosessen kan ta timer eller til og med dager.

3. DNA-ekstraksjon

Cellelyse: Proteinase K og lyseringsløsning tilsettes det demineraliserte benmelet for å fremme cellebrudd gjennom oppvarming, tillater frigjøring av internt DNA. Senere, en sentrifuge ble brukt for å separere supernatanten, dvs. væsken som inneholder mål-DNA.

Rense trinn: DNA-rensing utføres ved å bruke den magnetiske perlemetoden for nukleinsyreekstraksjon, silikagelkolonner, eller andre kommersielt tilgjengelige sett. Disse metodene fjerner urenheter som proteiner og polysakkarider mens de konsentrerer og beholder rene DNA-fragmenter.

4. Kvalitetstesting og analyse

Konsentrasjonsmåling: Mål den totale mengden DNA ekstrahert og dens renhet ved hjelp av et UV-spektrofotometer, fluorescens kvantitativ PCR, osv.

Integritetsvurdering: sjekk om DNA-kjeden er komplett gjennom gelelektroforese, eller direkte utføre sekvensering for å først bedømme dens egnethet.

5. Forholdsregler over utvinningsprosessen

Nedbrytningsproblem: Med forlengelse av prøvebevaringstiden, DNA er utsatt for brudd, hydrolyse, og andre fenomener, som resulterer i økte problemer med utvinning. Derfor, spesiell oppmerksomhet bør rettes mot rask ekstraksjon og reduksjon av tap ved håndtering av eldgamle prøver.

Kontamineringskontroll: Aseptiske driftsnormer må følges strengt under hele prosessen for å forhindre blanding av moderne menneskeavledet DNA, som vil påvirke ektheten til de endelige resultatene.

Utvinning av høykvalitets DNA fra bein er ikke bare avhengig av støtte fra avansert vitenskap og teknologi, men tester også den faglige kunnskapen og grundige operasjonsferdighetene til forskere. Ettersom forskningen på dette feltet fortsetter å utvikle seg, vi håper å avdekke flere av livets mysterier i fremtiden.

Leverandør

Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd.ble etablert i 2016 som er en profesjonell produsent av biomagnetiske materialer og nukleinsyreekstraksjonsreagenser.

Vi har rik erfaring innen utvinning og rensing av nukleinsyre, proteinrensing, celleseparasjon, kjemiluminescens og andre tekniske felt.

Våre produkter er mye brukt på mange felt, som medisinsk testing, genetisk testing, universitetsforskning, genetisk avl, og så videre. Vi leverer ikke bare produkter, men kan også påta oss OEM, ODM, og andre behov. Hvis du har et relatert behov, ta gjerne kontakt med oss ​​påsales01@lingjunbio.com.

• Magnetisk perle nukleinsyreekstraksjon: Den usynlige jegeren som fanger “Nipah virus”
• Magnetisk perlebasert nukleinsyreekstraksjonsteknologi: Leder effektivitetsrevolusjonen i den biofarmasøytiske industrien
• Praktisk evaluering av et universelt totalt RNA-ekstraksjonssett basert på magnetiske perler for generell bruk
• Magnetisk perlebasert nukleinsyreekstraksjon for presisjonsmedisin
• Optimalisering av temperatur og tid for silika-baserte magnetiske perler i DNA-fragmentutvalg