Cara mengekstrak DNA dari tulang

Dalam penelitian ilmiah atau bidang identifikasi seperti arkeologi, ilmu forensik, dan paleontologi, para ilmuwan sering kali perlu memperoleh informasi genetik tentang suatu organisme dari sampel tulang atau gigi purba. Informasi ini penting untuk penelitian seperti identifikasi spesies, identitas, dan perubahan lingkungan. Namun, mengekstraksi DNA dari tulang adalah teknik yang rumit dan menuntut secara teknis karena kondisi penyimpanan sampel. Artikel ini akan merinci proses cara efektif mengekstrak DNA dari tulang.

SAYA. Persiapan

Pemilihan sampel yang sesuai: Sampel yang ideal haruslah bagian tulang yang terpelihara dengan baik dan belum terkontaminasi secara serius. Misalnya, sisa-sisa manusia yang ditemukan di situs arkeologi atau tulang hewan yang diawetkan di lingkungan tertentu.

Pembersihan dan pemrosesan: Gunakan alat steril untuk menghilangkan permukaan tanah dan kontaminan lainnya untuk meminimalkan dampak DNA eksternal pada hasil. Terkadang metode kimia (misalnya, direndam dalam alkohol) diperlukan untuk pembersihan lebih lanjut.

2. Penghancuran dan Demineralisasi

Penghancuran tulang: Untuk meningkatkan efek reagen, tulang biasanya digiling menjadi partikel halus. Langkah ini perlu dilakukan di bawah pengawasan ketat untuk menghindari masuknya DNA asing.

Demineralisasi: Dengan menambahkan larutan chelating agent seperti EDTA (asam etilendiamintetraasetat), kandungan garam kalsium pada tulang dapat dilarutkan secara efektif, sehingga melepaskan sel-sel yang dienkapsulasi. Proses ini mungkin memakan waktu berjam-jam atau bahkan berhari-hari.

3. Ekstraksi DNA

Lisis sel: Proteinase K dan larutan lisis ditambahkan ke tepung tulang demineralisasi untuk mendorong pecahnya sel melalui pemanasan, memungkinkan pelepasan DNA internal. Kemudian, centrifuge digunakan untuk memisahkan supernatan, yaitu. cairan yang mengandung DNA target.

Langkah pemurnian: Pemurnian DNA dilakukan dengan menggunakan metode manik magnetik ekstraksi asam nukleat, kolom silika gel, atau kit lain yang tersedia secara komersial. Metode ini menghilangkan kotoran seperti protein dan polisakarida sambil memusatkan dan mempertahankan fragmen DNA murni.

4. Pengujian dan analisis kualitas

Pengukuran konsentrasi: Ukur jumlah total DNA yang diekstraksi dan kemurniannya menggunakan spektrofotometer UV, PCR kuantitatif fluoresensi, dll..

Penilaian integritas: periksa apakah rantai DNA sudah lengkap melalui elektroforesis gel, atau langsung melakukan pengurutan untuk menilai kesesuaiannya terlebih dahulu.

5. Tindakan pencegahan selama proses ekstraksi

Masalah degradasi: Dengan perpanjangan waktu pelestarian sampel, DNA rentan terhadap kerusakan, hidrolisis, dan fenomena lainnya, mengakibatkan peningkatan kesulitan dalam ekstraksi. Karena itu, perhatian khusus harus diberikan pada ekstraksi cepat dan pengurangan kehilangan ketika menangani sampel yang sudah tua.

Pengendalian kontaminasi: Norma operasi aseptik harus dipatuhi secara ketat selama seluruh proses untuk mencegah pencampuran DNA modern yang diturunkan dari manusia, yang akan mempengaruhi keaslian hasil akhir.

Ekstraksi DNA berkualitas tinggi dari tulang tidak hanya mengandalkan dukungan ilmu pengetahuan dan teknologi canggih tetapi juga menguji pengetahuan profesional dan keterampilan operasi yang cermat dari para peneliti.. Seiring penelitian di bidang ini terus berkembang, kami berharap dapat mengungkap lebih banyak misteri kehidupan di masa depan.

Pemasok

Shanghai Lingjun Bioteknologi Co., Ltd.didirikan pada 2016 yang merupakan produsen profesional bahan biomagnetik dan reagen ekstraksi asam nukleat.

Kami memiliki pengalaman yang kaya dalam ekstraksi dan pemurnian asam nukleat, pemurnian protein, pemisahan sel, chemiluminescence dan bidang teknis lainnya.

Produk kami banyak digunakan di berbagai bidang, misalnya tes kesehatan, pengujian genetik, penelitian universitas, pemuliaan genetik, dan sebagainya. Kami tidak hanya menyediakan produk tetapi juga dapat melakukan OEM, ODM, dan kebutuhan lainnya. Jika Anda memiliki kebutuhan terkait, jangan ragu untuk menghubungi kami dipenjualan01@lingjunbio.com.

• Ekstraksi Asam Nukleat Manik Magnetik: Pemburu Tak Terlihat Menangkap “Virus Nipah”
• Teknologi ekstraksi asam nukleat berbasis manik magnetik: Memimpin revolusi efisiensi dalam industri biofarmasi
• Evaluasi Praktis Kit Ekstraksi RNA Total Universal Berbasis Manik Magnetik Tujuan Umum
• Ekstraksi Asam Nukleat Berbasis Manik Magnetik untuk Pengobatan Presisi
• Mengoptimalkan Suhu dan Waktu Manik Magnetik Berbasis Silika dalam Seleksi Fragmen DNA