Cén fáth a dteastaíonn teimpléid DNA ardcháilíochta le haithint PCR?

An modh coirníní maighnéadach a fháil teimpléid DNA ar ardchaighdeán Tá sé ríthábhachtach ó fhíocháin phlandaí chun PCR a aithint ina dhiaidh sin agus is féidir é a mheas mar chloch choirnéil aitheantais mhóilíneach rathúil. Léirítear a thábhacht go príomha sna gnéithe seo a leanas:

1.Baint éifeachtach coscairí PCR. 

Tá fíocháin plandaí saibhir i polaisiúicrídí, polyphenols, líocha, aigéad tannic, agus meitibilítí tánaisteacha, arb eol gur coscairí PCR cumhachtacha iad. Déanann an modh coirníní maighnéadacha na neamhíonachtaí seo a bhaint go héifeachtach trí na meicníochtaí seo a leanas: ceangailteach roghnach: faoi ​​choinníollacha maoláin ar leith, ceanglaíonn coirníní maighnéadacha go sonrach le DNA, fad is a fhanann coscairí san ollnóva agus cuirtear i leataobh iad.

Níochán éifeachtach: Trí nite il, is féidir na hiarmhair inhibitor atá adsorbed ar na coirníní maighnéadacha a bhaint go hiomlán.

Suntas: Cuirfidh baint neamhiomlán an t-inhibitor deireadh go mór le gníomhaíocht Taq DNA polymerase, as a dtagann teip PCR (diúltach bréagach), táirgeacht íseal táirge, bannaí lag nó nonspecific, agus torthaí go hiomlán neamhiontaofa.

2.DNA ard-íonachta agus slán a fháil Ard-íonachta:

 Is gnách go mbíonn an cóimheas A260/A280 de DNA a fhaightear tríd an modh coirníní maighnéadach gar do 1.8, agus tá an cóimheas A260/A230 níos airde ná 2.0, rud a léiríonn iarmhair íosta próitéiní, hiain salainn, agus tuaslagóirí orgánacha. Is réamhriachtanas é DNA ardíonachta chun imoibrithe einsímeacha a dhéanamh (e.g., PCR).

Sláine measartha: Le haghaidh aitheantais PCR (blúirí aimpliúcháin de ghnáth <3 kb), fad blúirí DNA (go hiondúil> 20 kb) a sholáthraíonn an modh bead maighnéadach go hiomlán na ceanglais, agus ag seachaint éagsúlachtaí baisc de bharr lomadh meicniúil slabhraí fada DNA.

3.Cobhsaíocht agus in-atáirgtheacht feabhsaithe imoibrithe PCR:

Taispeánann an modh bead maighnéadach uathoibriú ard, earráidí oibríochta daonna íosta, agus cáilíocht DNA chomhsheasmhach thar bhaisceanna éagsúla.

Cruinneas cainníochtúil: Is féidir DNA ard-íonachta a chainníochtú go beacht trí úsáid a bhaint as speictreafótaiméadair nó fluaraiméadar. Cumasaíonn sé seo cainníochtaí teimpléid cruinn agus comhsheasmhacha DNA a chur leis le linn imoibrithe PCR a shocrú, atá ríthábhachtach chun torthaí PCR in-atáirgthe agus iontaofa a fháil. Má tá neamhíonachtaí sa DNA, beidh a luachanna ionsúite míchruinn, as a dtagann cur leis an teimpléad míchuí.

4.Oiriúnach do tréchur ard agus uathoibrithe

Le haghaidh tascanna aitheantais a éilíonn méideanna móra samplaí a phróiseáil (e.g., scagadh germplasm, bhrath transgenic), is féidir leis an modh coirníní maighnéadach eastóscadh ard-thréchur a bhaint amach go héifeachtach i bplátaí 96-tobar agus tá sé ag luí le stáisiúin oibre láimhseála leachta uathoibrithe.

Léirítear an tábhacht sa mhéid is go gcuirtear feabhas mór ar éifeachtúlacht agus ar leibhéal caighdeánaithe na hoibre breithmheasa ar an mbonn go gcinntítear ardchaighdeán..

5.Feabhas a chur ar íogaireacht agus sainiúlacht PCR Ard-íogaireacht:

Ceadaíonn teimpléid DNA ardchaighdeáin fachtóirí caolaithe níos airde, laghdaítear ar an gcaoi sin tiúchan na n- choscairí iarmharacha agus a chumasaíonn lorg méideanna rianta de DNA sprice i gcásanna áirithe.

Sainiúlacht ard: Éascaíonn an teimpléad íon agus an tiúchan beacht leas iomlán a bhaint as coinníollacha PCR, chumasú primers chun ceangal go sonrach leis an teimpléad, ar an gcaoi sin laghdaítear aimpliú neamhshonrach agus foirmiú dimer primer, bandaí aimpliúcháin soiléire agus aonair dá bharr.

6.Comparáid idir buntáistí le modhanna traidisiúnta:

I gcomparáid le modhanna traidisiúnta CTAB agus SDS, léiríonn an modh bead maighnéadach buntáistí suntasacha i dtéarmaí luas, sábháilteacht (imoibrithe orgánacha díobhálacha a sheachaint), simplíocht oibriúcháin, comhoiriúnacht uathoibrithe, agus éifeachtacht a bhaint coscairí. Tá sé oiriúnach go háirithe le haghaidh samplaí plandaí dúshlánach le hábhar ard polaisiúicríd agus polyphenol (e.g., duilleoga tae, snáthaidí péine, sútha talún, tiúbair, srl.).

Achoimre: Tá an tábhacht lárnach a bhaineann le DNA géanóm plandaí ardcháilíochta a fháil tríd an modh coirníní maighnéadacha chun PCR a shainaithint sa slabhra seo a leanas.: DNA ar ardchaighdeán (modh coirníní maighnéadach) → ardíonacht/saor ó bhac → cainníochtú cruinn teimpléid + timpeallacht gníomhaíochta einsíme is fearr → éifeachtach, cobhsaí, agus imoibrithe PCR in-atáirgthe → cruinn, iontaofa, agus torthaí aitheantais inchreidte.

7.Cásanna Turgnamhacha

Rinneadh eastóscadh DNA genomic ag baint úsáide as imoibrí eastósctha DNA genomic fíocháin plandaí ár gcuideachta (modh coirníní maighnéadach) ar shamplaí iomadúla fíocháin óga úra. Is iad seo a leanas na torthaí:

Níl.	Sampla	Iontógáil	A260/A280	A260/A230	Conc.(ng/μL)
1	Bok Choy	5mg	1.956	2.035	359.9
2	Oinniún		1.922	2.108	305.9
3	Spionáiste		1.95	1.894	495.85
4	Shanghai Glas		1.979	2.069	658.7
5	Brassica rapa		1.924	1.973	318.8
6	Caraway		1.975	2.152	756.3
7	Leitís		1.896	1.84	122.55

Seo a leanas an léaráid leictreafóiréis:

Dá bhrí sin, sula ndéantar sainaithint mhóilíneach plandaí (e.g., géinitíopáil, sainaithint speiceas, bhrath transgenic, braite pataigin), is infheistíocht ríthábhachtach é barrfheabhsú agus úsáid modhanna iontaofa amhail teicneolaíocht coirníní maighnéadacha chun DNA géanóm ardcháilíochta a fháil a thugann dhá oiread an toraidh le leath na hiarrachta, lena gcinntear go díreach rath nó teip an tionscadail aitheantais iomláin. Go praiticiúil, le haghaidh samplaí le teipeanna PCR arís agus arís eile, ba cheart cáilíocht an teimpléid DNA a athmheasúnú agus a íonú ar dtús.

Soláthraí

Shanghai Lingjun Biteicneolaíocht Co., Teo.bunaíodh i 2016 atá ina mhonaróir gairmiúil d'ábhair bithmhaighnéadacha agus imoibrithe eastóscadh aigéid núicléacha.

Tá taithí shaibhir againn in eastóscadh agus íonú aigéad núicléasach, íonú próitéine, scaradh cille, ceimileacanacht, agus réimsí teicniúla eile.

Úsáidtear ár gcuid táirgí go forleathan i go leor réimsí, mar thástáil leighis, tástáil ghéiniteach, taighde ollscoile, pórú géiniteach, agus mar sin de. Ní chuirimid ar fáil ach táirgí ach freisin is féidir tabhairt faoi OEM, ODM, agus riachtanais eile. Má tá riachtanas gaolmhar agat, bíodh leisce ort teagmháil a dhéanamh linn .