বায়োম্যাগনেটিক জপমালার পেশাদার প্রস্তুতকারক
কিভাবে ফলাফল উন্নত করা যায় 260/230 বিকারক নিষ্কাশনের জন্য চুম্বকীয় গুটিকা পদ্ধতি ব্যবহার করে গণনা?
চুম্বকীয় গুটিকা পদ্ধতি ব্যবহার করে নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন করার সময়, একটি নিম্ন 260/230 অনুপাত (সাধারণত < 1.8) জৈব যৌগের উপস্থিতি নির্দেশ করে(যেমন গুয়ানিডিন লবণ, ফেনল, ইথানল, EDTA) or residual salts in the sample, which can affect downstream experiments (যেমন পিসিআর, সিকোয়েন্সিং).
Here is a systematic optimization plan:
- Optimization of Extraction Steps
ক. Complete sample lysis
Problem: Incomplete lysis leads to incomplete release of impurities.
Improvement: Increase the lysis time (যেমন, extend to 30 মিনিট) or temperature (56℃).
Add a grinding step or additional proteinase K digestion for complex samples (such as plants, মল).
খ. Thoroughly wash the magnetic beads
Key step: Incomplete washing is the main cause of 260/230 low.
Improvement: Increase the number of washes: 2 times → 3 বার (especially for samples with high impurities).
Washing solution formula: Ensure to use freshly prepared 80% ইথানল (avoid excessive water content or contamination).
Washing operation: Vortex or shake to mix the magnetic beads each time, avoiding the formation of beads clumps.
Thoroughly aspirate the supernatant (can briefly centrifuge to remove residual liquid).
গ. Complete drying of magnetic beads
Problem: Residual ethanol can significantly reduce 260/230.
Improvement: Open the cap and let it dry for 5-10 মিনিট (at room temperature or 37°C), until there is no ethanol smell. Avoid excessive drying (otherwise, it will reduce the efficiency of nucleic acid elution).
d. Optimize elution conditions
Use preheated elution buffer (such as 65°C TE buffer or sterile water), and let it stand for 5 minutes before collection.
Avoid using too small elution volume (recommend ≥ 50 μL to reduce salt concentration).
Ⅱ.মান নিয়ন্ত্রণ of Reagents and Consumables
ক. Replace with fresh reagents:
Check if ethanol and washing solution have been contaminated (if stored for a long time without sealing).
Avoid using expired magnetic bead reagents (magnetic bead degradation may adsorb impurities).
খ. Consumables selection:
Use centrifuge tubes and pipettes without nuclease or pyrogen (to avoid interference from plastic additives).
Ⅲ.Sample preprocessing
- Complex samples (such as soil and plants):
Increase the CTAB or SDS pretreatment to remove polysaccharides and polyphenols.
- For blood samples:
First remove hemoglobin using erythrocyte lysis solution.
- Inhibitor-enriched samples (such as feces and body fluids):
Dilute the samples or use dedicated lysis buffers (such as those containing Carrier RNA).
Ⅳ.Verification and remedial measures
ক. Electrophoresis or Qubit verification:
Check for degradation (tailing phenomenon) using agarose gel electrophoresis.
Compare the results with those from Nanodrop using a fluorescence meter (Qubit) to eliminate interference from impurity absorbance.
খ. Purification remediation:
If the ratio of 260/230 remains low, purify the nucleic acid using a silica column or by ethanol precipitation again.
ভি. Control Experiment
For each extraction, a known standard sample (such as λDNA or cultured cells) is set up to confirm the stability of the reagents.
If the 260/230 ratio of the control sample is normal, the problem may lie in the sample being tested itself.
Common Problem Troubleshooting Checklist
| Phenomenon | Possible Cause | সমাধান |
| 260/230 is low but 260/280 is normal | Protein or phenol contamination | Strengthen the washing and drying steps |
| Both 260/230 এবং 260/280 are low | Protein or phenol contamination | Optimize the lysis, replace the lysis solution |
| Only the 230 peak is high | Organic solvent contamination | Check the purity of ethanol or buffer |
By following these steps, the ratio of 260/230 can be significantly increased (target > 1.8). If the problem persists, please feel free to contact Shanghai Lingjun Biotechnology at 18103799069.
সরবরাহকারী
সাংহাই লিংজুন বায়োটেকনোলজি কো., লিমিটেডসালে প্রতিষ্ঠিত হয় 2016 যা বায়োম্যাগনেটিক উপকরণ এবং নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন বিকারকগুলির একটি পেশাদার প্রস্তুতকারক.
আমাদের নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন এবং পরিশোধন সমৃদ্ধ অভিজ্ঞতা আছে, প্রোটিন পরিশোধন, কোষ বিচ্ছেদ, কেমিলুমিনেসেন্স, এবং অন্যান্য প্রযুক্তিগত ক্ষেত্র.
আমাদের পণ্য ব্যাপকভাবে অনেক ক্ষেত্রে ব্যবহৃত হয়, যেমন মেডিকেল টেস্টিং, জেনেটিক পরীক্ষা, বিশ্ববিদ্যালয় গবেষণা, জেনেটিক প্রজনন, এবং তাই. আমরা কেবল পণ্য সরবরাহ করি না তবে OEM গ্রহণ করতে পারি, ওডিএম, এবং অন্যান্য প্রয়োজন. আপনি যদি একটি সম্পর্কিত প্রয়োজন আছে, আমাদের সাথে যোগাযোগ বিনা দ্বিধায় দয়া করে .
