உயிர் காந்த மணிகளின் தொழில்முறை உற்பத்தியாளர்
முடிவுகளை எவ்வாறு மேம்படுத்துவது 260/230 எதிர்வினைகளை பிரித்தெடுக்க காந்த மணி முறையைப் பயன்படுத்தி கணக்கீடு?
காந்த மணி முறையைப் பயன்படுத்தி நியூக்ளிக் அமிலங்களைப் பிரித்தெடுக்கும் போது, ஒரு குறைந்த 260/230 விகிதம் (பொதுவாக < 1.8) கரிம சேர்மங்கள் இருப்பதைக் குறிக்கிறது(குவானிடின் உப்புகள் போன்றவை, பீனால், எத்தனால், EDTA) அல்லது மாதிரியில் எஞ்சியிருக்கும் உப்புகள், இது கீழ்நிலை சோதனைகளை பாதிக்கும் (பிசிஆர் போன்றவை, வரிசைப்படுத்துதல்).
இங்கே ஒரு முறையான தேர்வுமுறை திட்டம் உள்ளது:
- பிரித்தெடுத்தல் படிகளின் உகப்பாக்கம்
அ. முழுமையான மாதிரி சிதைவு
பிரச்சனை: முழுமையற்ற சிதைவு அசுத்தங்களின் முழுமையற்ற வெளியீட்டிற்கு வழிவகுக்கிறது.
முன்னேற்றம்: சிதைவு நேரத்தை அதிகரிக்கவும் (எ.கா., வரை நீட்டிக்கப்படுகிறது 30 நிமிடங்கள்) அல்லது வெப்பநிலை (56℃).
சிக்கலான மாதிரிகளுக்கு அரைக்கும் படி அல்லது கூடுதல் புரோட்டினேஸ் கே செரிமானத்தைச் சேர்க்கவும் (தாவரங்கள் போன்றவை, மலம்).
பி. காந்த மணிகளை நன்கு கழுவவும்
முக்கிய படி: முழுமையடையாத கழுவுதல் முக்கிய காரணம் 260/230 குறைந்த.
முன்னேற்றம்: கழுவுதல் எண்ணிக்கையை அதிகரிக்கவும்: 2 முறை → 3 முறை (குறிப்பாக அதிக அசுத்தங்கள் கொண்ட மாதிரிகளுக்கு).
சலவை தீர்வு சூத்திரம்: புதிதாக தயாரிக்கப்பட்டதைப் பயன்படுத்துவதை உறுதிப்படுத்திக் கொள்ளுங்கள் 80% எத்தனால் (அதிகப்படியான நீர் உள்ளடக்கம் அல்லது மாசுபடுவதைத் தவிர்க்கவும்).
சலவை செயல்பாடு: ஒவ்வொரு முறையும் காந்த மணிகளை கலக்க சுழல் அல்லது குலுக்கல், மணிகள் கொத்துகள் உருவாவதை தவிர்க்கும்.
மேலோட்டத்தை முழுமையாக உறிஞ்சவும் (மீதமுள்ள திரவத்தை அகற்ற சுருக்கமாக மையவிலக்கு செய்யலாம்).
c. காந்த மணிகளை முழுமையாக உலர்த்துதல்
பிரச்சனை: எஞ்சியிருக்கும் எத்தனால் கணிசமாகக் குறைக்கலாம் 260/230.
முன்னேற்றம்: தொப்பியைத் திறந்து உலர விடவும் 5-10 நிமிடங்கள் (அறை வெப்பநிலையில் அல்லது 37 டிகிரி செல்சியஸ்), எத்தனால் வாசனை இல்லாத வரை. அதிகப்படியான உலர்த்தலைத் தவிர்க்கவும் (இல்லையெனில், இது நியூக்ளிக் அமிலம் வெளியேற்றத்தின் செயல்திறனைக் குறைக்கும்).
ஈ. நீக்குதல் நிலைமைகளை மேம்படுத்தவும்
முன்கூட்டியே சூடாக்கப்பட்ட எலுஷன் பஃப்பரைப் பயன்படுத்தவும் (65°C TE தாங்கல் அல்லது மலட்டு நீர் போன்றவை), மற்றும் அது நிற்கட்டும் 5 சேகரிப்புக்கு நிமிடங்களுக்கு முன்.
மிக சிறிய எலுஷன் அளவைப் பயன்படுத்துவதைத் தவிர்க்கவும் (பரிந்துரைக்கவும் ≥ 50 உப்பு செறிவைக் குறைக்க μL).
Ⅱ.தரக் கட்டுப்பாடு உலைகள் மற்றும் நுகர்பொருட்கள்
அ. புதிய உலைகளுடன் மாற்றவும்:
எத்தனால் மற்றும் வாஷிங் கரைசல் மாசுபட்டுள்ளதா என சரிபார்க்கவும் (சீல் இல்லாமல் நீண்ட நேரம் சேமித்து வைத்தால்).
காலாவதியான காந்த மணி வினைகளைப் பயன்படுத்துவதைத் தவிர்க்கவும் (காந்த மணி சிதைவு அசுத்தங்களை உறிஞ்சும்).
பி. நுகர்பொருட்கள் தேர்வு:
நியூக்லீஸ் அல்லது பைரோஜன் இல்லாமல் மையவிலக்கு குழாய்கள் மற்றும் குழாய்களைப் பயன்படுத்தவும் (பிளாஸ்டிக் சேர்க்கைகள் இருந்து குறுக்கீடு தவிர்க்க).
Ⅲ.மாதிரி முன் செயலாக்கம்
- சிக்கலான மாதிரிகள் (மண் மற்றும் தாவரங்கள் போன்றவை):
பாலிசாக்கரைடுகள் மற்றும் பாலிபினால்களை அகற்ற CTAB அல்லது SDS முன் சிகிச்சையை அதிகரிக்கவும்.
- இரத்த மாதிரிகளுக்கு:
முதலில் எரித்ரோசைட் லிசிஸ் கரைசலைப் பயன்படுத்தி ஹீமோகுளோபினை அகற்றவும்.
- தடுப்பான்-செறிவூட்டப்பட்ட மாதிரிகள் (மலம் மற்றும் உடல் திரவங்கள் போன்றவை):
மாதிரிகளை நீர்த்துப்போகச் செய்யவும் அல்லது பிரத்யேக லிசிஸ் பஃபர்களைப் பயன்படுத்தவும் (கேரியர் ஆர்என்ஏ கொண்டவை போன்றவை).
Ⅳ.சரிபார்ப்பு மற்றும் சரிசெய்தல் நடவடிக்கைகள்
அ. எலக்ட்ரோபோரேசிஸ் அல்லது க்யூபிட் சரிபார்ப்பு:
சிதைவை சரிபார்க்கவும் (வால் நிகழ்வு) அகரோஸ் ஜெல் எலக்ட்ரோபோரேசிஸைப் பயன்படுத்துதல்.
ஃப்ளோரசன்ஸ் மீட்டரைப் பயன்படுத்தி நானோட்ராப்பின் முடிவுகளை ஒப்பிடுக (குபிட்) தூய்மையற்ற உறிஞ்சுதலில் இருந்து குறுக்கீடுகளை அகற்ற.
பி. சுத்திகரிப்பு தீர்வு:
என்ற விகிதம் என்றால் 260/230 குறைவாக உள்ளது, நியூக்ளிக் அமிலத்தை சிலிக்கா நிரலைப் பயன்படுத்தி அல்லது மீண்டும் எத்தனால் மழைப்பொழிவு மூலம் சுத்திகரிக்கவும்.
வி. கட்டுப்பாட்டு சோதனை
ஒவ்வொரு பிரித்தெடுத்தலுக்கும், அறியப்பட்ட நிலையான மாதிரி (λDNA அல்லது வளர்ப்பு செல்கள் போன்றவை) உலைகளின் நிலைத்தன்மையை உறுதிப்படுத்த அமைக்கப்பட்டுள்ளது.
என்றால் 260/230 கட்டுப்பாட்டு மாதிரியின் விகிதம் சாதாரணமானது, சோதனை மாதிரியில் சிக்கல் இருக்கலாம்.
பொதுவான சிக்கல் சரிசெய்தல் சரிபார்ப்பு பட்டியல்
| நிகழ்வு | சாத்தியமான காரணம் | தீர்வு |
| 260/230 குறைவாக உள்ளது ஆனால் 260/280 சாதாரணமானது | புரதம் அல்லது பீனால் மாசுபாடு | கழுவுதல் மற்றும் உலர்த்தும் படிகளை வலுப்படுத்தவும் |
| இரண்டும் 260/230 மற்றும் 260/280 குறைவாக உள்ளன | புரதம் அல்லது பீனால் மாசுபாடு | சிதைவை மேம்படுத்தவும், லிசிஸ் கரைசலை மாற்றவும் |
| மட்டுமே 230 உச்சம் அதிகமாக உள்ளது | கரிம கரைப்பான் மாசுபாடு | எத்தனால் அல்லது இடையகத்தின் தூய்மையை சரிபார்க்கவும் |
இந்த வழிமுறைகளைப் பின்பற்றுவதன் மூலம், விகிதம் 260/230 கணிசமாக அதிகரிக்க முடியும் (இலக்கு > 1.8). பிரச்சனை தொடர்ந்தால், தயவு செய்து ஷாங்காய் லிங்ஜுன் பயோடெக்னாலஜியை தொடர்பு கொள்ளலாம் 18103799069.
சப்ளையர்
ஷாங்காய் லிங்ஜுன் பயோடெக்னாலஜி கோ., லிமிடெட்இல் நிறுவப்பட்டது 2016 உயிர் காந்த பொருட்கள் மற்றும் நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுக்கும் உலைகளின் தொழில்முறை உற்பத்தியாளர்.
நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் சுத்திகரிப்பு ஆகியவற்றில் எங்களுக்கு சிறந்த அனுபவம் உள்ளது, புரத சுத்திகரிப்பு, செல் பிரிப்பு, இரசாயன ஒளிர்வு, மற்றும் பிற தொழில்நுட்ப துறைகள்.
எங்கள் தயாரிப்புகள் பல துறைகளில் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, மருத்துவ பரிசோதனை போன்றவை, மரபணு சோதனை, பல்கலைக்கழக ஆராய்ச்சி, மரபணு இனப்பெருக்கம், மற்றும் பல. நாங்கள் தயாரிப்புகளை வழங்குவது மட்டுமல்லாமல் OEM ஐயும் மேற்கொள்ள முடியும், ODM, மற்றும் பிற தேவைகள். உங்களுக்கு தொடர்புடைய தேவை இருந்தால், தயவு செய்து எங்களை தொடர்பு கொள்ளவும் .
