இரத்த ஆர்.என்.ஏ பிரித்தெடுக்கும் காந்த மணி முறையில் என்ன கவனம் செலுத்த வேண்டும்?

Precautions for Magnetic Bead-Based Blood RNA Extraction

1. மாதிரி சேகரிப்பு மற்றும் கையாளுதல்

1.1 Anticoagulant Selection

Preferred: EDTA，கால்சியம் சார்ந்த கருக்களை தடுக்கிறது.

ஏற்கத்தக்கது: ACD

Avoid: ஹெப்பரின் (கீழ்நிலை பயன்பாடுகளைத் தடுக்கிறது)

1.2 Processing Timeline

Process samples immediately after collection

If delayed:

Store anticoagulated whole blood at 4°C for ≤24 h

For long-term storage: Freeze PBMCs or lysate at ≤-70°C

1.3 மாதிரி தொகுதி

Strictly follow manufacturer-recommended volumes

1.4 Mixing Technique

Use gentle pipetting/vortexing to prevent RNA degradation

1.5 Erythrocyte Removal

Ensure complete RBC lysis and removal of hemoglobin residues

2. Lysis Phase

2.1 Cell Lysis

Homogenize until no cell aggregates remain

Adhere to specified incubation time/temperature

2.2 RNase Inhibition

Use fresh lysis buffer containing denaturants (எ.கா., guanidinium salts)

Maintain samples on ice during processing

2.3 Carrier RNA

Add carrier molecules (எ.கா., glycogen) for low-yield samples when specified

3. Magnetic Bead Binding and Washing

3.1 Bead-Nucleic Acid Binding

முக்கியமான படி: Vortex ≥30 sec immediately after adding beads

Incubate for exact duration per protocol

3.2 காந்தப் பிரிப்பு

Place tubes in magnetic stand for ≥2 min until solution clears

Aspirate supernatant without contacting bead pellet

3.3 Washing Procedure

Use freshly prepared ethanol-based wash buffers

Wash 1: Remove salts and contaminants

Wash 2 (optional): Kit-specific buffer for purity enhancement

Final wash: Ensure complete ethanol removal (air-dry beads 2-5 நிமிடம்)

4. Elution Phase

4.1 நீக்குதல் நிபந்தனைகள்

Use nuclease-free water or TE buffer (pH 8.0)

Incubate at 55–65°C for 5 min with periodic mixing

4.2 RNA Recovery

Perform final magnetic separation

Transfer supernatant to new RNase-free tube

5. Quality Control and Storage

5.1 Purity Assessment

ஏ_260/280: 1.8–2.1

ஏ_260/230: >2.0

5.2 Integrity Verification

Electrophoresis: Distinct 28S/18S rRNA bands (2:1 விகிதம்)

RIN (ஆர்என்ஏ ஒருமைப்பாடு எண்): ≥7 for most applications

5.3 gDNA Contamination Check

Include DNase digestion step if required for downstream assays

5.4 சேமிப்பு

Aliquot RNA

Store at –80°C; avoid >3 freeze-thaw cycles

Critical Reminders

EDTA tubes are essential for nuclease inhibition

Immediate processing prevents RNA degradation

Complete ethanol removal is mandatory before elution

RNase-free environment: Gloves, barrier tips, and decontaminated surfaces

Validate kit compatibility with sample type (எ.கா., heparinized blood requires specialized kits)

சப்ளையர்

ஷாங்காய் லிங்ஜுன் பயோடெக்னாலஜி கோ., லிமிடெட்இல் நிறுவப்பட்டது 2016 உயிர் காந்த பொருட்கள் மற்றும் நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுக்கும் உலைகளின் தொழில்முறை உற்பத்தியாளர்.

நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் சுத்திகரிப்பு ஆகியவற்றில் எங்களுக்கு சிறந்த அனுபவம் உள்ளது, புரத சுத்திகரிப்பு, செல் பிரிப்பு, இரசாயன ஒளிர்வு, மற்றும் பிற தொழில்நுட்ப துறைகள்.

எங்கள் தயாரிப்புகள் பல துறைகளில் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, மருத்துவ பரிசோதனை போன்றவை, மரபணு சோதனை, பல்கலைக்கழக ஆராய்ச்சி, மரபணு இனப்பெருக்கம், மற்றும் பல. நாங்கள் தயாரிப்புகளை வழங்குவது மட்டுமல்லாமல் OEM ஐயும் மேற்கொள்ள முடியும், ODM, மற்றும் பிற தேவைகள். உங்களுக்கு தொடர்புடைய தேவை இருந்தால், தயவு செய்து எங்களை தொடர்பு கொள்ளவும் .