রক্তের আরএনএ নিষ্কাশনের চৌম্বকীয় গুটিকা পদ্ধতিতে কী মনোযোগ দেওয়া উচিত?

Precautions for Magnetic Bead-Based Blood RNA Extraction

1. নমুনা সংগ্রহ এবং পরিচালনা

1.1 Anticoagulant Selection

Preferred: EDTA，ক্যালসিয়াম-নির্ভর নিউক্লিয়াসকে বাধা দেয়.

গ্রহণযোগ্য: ACD

Avoid: হেপারিন (ডাউনস্ট্রিম অ্যাপ্লিকেশনগুলিকে বাধা দেয়)

1.2 Processing Timeline

Process samples immediately after collection

If delayed:

Store anticoagulated whole blood at 4°C for ≤24 h

For long-term storage: Freeze PBMCs or lysate at ≤-70°C

1.3 Sample Volume

Strictly follow manufacturer-recommended volumes

1.4 Mixing Technique

Use gentle pipetting/vortexing to prevent RNA degradation

1.5 Erythrocyte Removal

Ensure complete RBC lysis and removal of hemoglobin residues

2. Lysis Phase

2.1 Cell Lysis

Homogenize until no cell aggregates remain

Adhere to specified incubation time/temperature

2.2 RNase Inhibition

Use fresh lysis buffer containing denaturants (যেমন, guanidinium salts)

Maintain samples on ice during processing

2.3 Carrier RNA

Add carrier molecules (যেমন, glycogen) for low-yield samples when specified

3. Magnetic Bead Binding and Washing

3.1 Bead-Nucleic Acid Binding

Critical step: Vortex ≥30 sec immediately after adding beads

Incubate for exact duration per protocol

3.2 Magnetic Separation

Place tubes in magnetic stand for ≥2 min until solution clears

Aspirate supernatant without contacting bead pellet

3.3 Washing Procedure

Use freshly prepared ethanol-based wash buffers

ধোয়া 1: Remove salts and contaminants

ধোয়া 2 (optional): Kit-specific buffer for purity enhancement

Final wash: Ensure complete ethanol removal (air-dry beads 2-5 মিনিট)

4. Elution Phase

4.1 Elution Conditions

Use nuclease-free water or TE buffer (পিএইচ 8.0)

Incubate at 55–65°C for 5 min with periodic mixing

4.2 RNA Recovery

Perform final magnetic separation

Transfer supernatant to new RNase-free tube

5. Quality Control and Storage

5.1 Purity Assessment

ক_260/280: 1.8–2.1

ক_260/230: >2.0

5.2 Integrity Verification

Electrophoresis: Distinct 28S/18S rRNA bands (2:1 অনুপাত)

RIN (RNA Integrity Number): ≥7 for most applications

5.3 gDNA Contamination Check

Include DNase digestion step if required for downstream assays

5.4 স্টোরেজ

Aliquot RNA

Store at –80°C; avoid >3 freeze-thaw cycles

Critical Reminders

EDTA tubes are essential for nuclease inhibition

Immediate processing prevents RNA degradation

Complete ethanol removal is mandatory before elution

RNase-free environment: Gloves, barrier tips, and decontaminated surfaces

Validate kit compatibility with sample type (যেমন, heparinized blood requires specialized kits)

সরবরাহকারী

সাংহাই লিংজুন বায়োটেকনোলজি কো., লিমিটেডসালে প্রতিষ্ঠিত হয় 2016 যা বায়োম্যাগনেটিক উপকরণ এবং নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন বিকারকগুলির একটি পেশাদার প্রস্তুতকারক.

আমাদের নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন এবং পরিশোধন সমৃদ্ধ অভিজ্ঞতা আছে, প্রোটিন পরিশোধন, কোষ বিচ্ছেদ, কেমিলুমিনেসেন্স, এবং অন্যান্য প্রযুক্তিগত ক্ষেত্র.

আমাদের পণ্য ব্যাপকভাবে অনেক ক্ষেত্রে ব্যবহৃত হয়, যেমন মেডিকেল টেস্টিং, জেনেটিক পরীক্ষা, বিশ্ববিদ্যালয় গবেষণা, জেনেটিক প্রজনন, এবং তাই. আমরা কেবল পণ্য সরবরাহ করি না তবে OEM গ্রহণ করতে পারি, ওডিএম, এবং অন্যান্য প্রয়োজন. আপনি যদি একটি সম্পর্কিত প্রয়োজন আছে, আমাদের সাথে যোগাযোগ বিনা দ্বিধায় দয়া করে .