রক্তের আরএনএ নিষ্কাশনের চৌম্বকীয় গুটিকা পদ্ধতিতে কী মনোযোগ দেওয়া উচিত?

সতর্কতা ম্যাগনেটিক বিড-ভিত্তিক রক্তের আরএনএ নিষ্কাশনের জন্য

1. নমুনা সংগ্রহ এবং পরিচালনা

1.1 অ্যান্টিকোয়াগুল্যান্ট নির্বাচন

পছন্দের: EDTA，ক্যালসিয়াম-নির্ভর নিউক্লিয়াসকে বাধা দেয়.

গ্রহণযোগ্য: এসিডি

এড়িয়ে চলুন: হেপারিন (ডাউনস্ট্রিম অ্যাপ্লিকেশনগুলিকে বাধা দেয়)

1.2 টাইমলাইন প্রক্রিয়াকরণ

সংগ্রহের পরপরই নমুনা প্রক্রিয়া করুন

দেরি হলে:

≤24 ঘন্টার জন্য 4°C তাপমাত্রায় অ্যান্টিক্যাগুলেটেড পুরো রক্ত ​​সংরক্ষণ করুন

দীর্ঘমেয়াদী স্টোরেজ জন্য: ≤-70 ডিগ্রি সেলসিয়াসে পিবিএমসি বা লাইসেট হিমায়িত করুন

1.3 নমুনা ভলিউম

প্রস্তুতকারকের প্রস্তাবিত ভলিউম কঠোরভাবে অনুসরণ করুন

1.4 মিক্সিং টেকনিক

আরএনএ অবক্ষয় রোধ করতে মৃদু পাইপটিং/ঘূর্ণি ব্যবহার করুন

1.5 এরিথ্রোসাইট অপসারণ

সম্পূর্ণ RBC lysis এবং হিমোগ্লোবিনের অবশিষ্টাংশ অপসারণ নিশ্চিত করুন

2. লাইসিস ফেজ

2.1 সেল লাইসিস

কোন কোষ সমষ্টি না থাকা পর্যন্ত সমজাতীয়করণ

নির্দিষ্ট ইনকিউবেশন সময়/তাপমাত্রা মেনে চলুন

2.2 RNase ইনহিবিশন

তাজা লাইসিস বাফার ব্যবহার করুন যাতে ডিনাচুরেন্ট থাকে (যেমন, গুয়ানিডিনিয়াম লবণ)

প্রক্রিয়াকরণের সময় বরফের নমুনাগুলি বজায় রাখুন

2.3 ক্যারিয়ার RNA

বাহক অণু যোগ করুন (যেমন, গ্লাইকোজেন) কম ফলন নমুনা জন্য যখন নির্দিষ্ট করা হয়

3. চৌম্বক গুটিকা বাঁধাই এবং ওয়াশিং

3.1 গুটিকা-নিউক্লিক অ্যাসিড বাঁধাই

সমালোচনামূলক পদক্ষেপ: জপমালা যোগ করার সাথে সাথেই ঘূর্ণি ≥30 সেকেন্ড

প্রোটোকল প্রতি সঠিক সময়কাল জন্য ইনকিউবেট

3.2 চৌম্বক বিচ্ছেদ

দ্রবণ পরিষ্কার না হওয়া পর্যন্ত ≥2 মিনিটের জন্য চুম্বকীয় স্ট্যান্ডে টিউবগুলি রাখুন

গুটিকা ছরার সাথে যোগাযোগ না করেই অ্যাসপিরেট সুপারনেট্যান্ট

3.3 ধোয়ার পদ্ধতি

সদ্য প্রস্তুত ইথানল-ভিত্তিক ওয়াশ বাফার ব্যবহার করুন

ধোয়া 1: লবণ এবং দূষক অপসারণ

ধোয়া 2 (ঐচ্ছিক): বিশুদ্ধতা বৃদ্ধির জন্য কিট-নির্দিষ্ট বাফার

চূড়ান্ত ধোয়া: সম্পূর্ণ ইথানল অপসারণ নিশ্চিত করুন (বায়ু-শুষ্ক জপমালা 2-5 মিনিট)

4. ইলিউশন ফেজ

4.1 ইলুশন শর্তাবলী

নিউক্লিয়াস-মুক্ত জল বা TE বাফার ব্যবহার করুন (পিএইচ 8.0)

55-65 ডিগ্রি সেলসিয়াস তাপমাত্রায় ইনকিউবেট করুন 5 পর্যায়ক্রমিক মিশ্রণ সঙ্গে মিনিট

4.2 আরএনএ পুনরুদ্ধার

চূড়ান্ত চৌম্বক বিচ্ছেদ সঞ্চালন

নতুন RNase-মুক্ত টিউবে সুপারনাট্যান্ট স্থানান্তর করুন

5. মান নিয়ন্ত্রণ এবং স্টোরেজ

5.1 বিশুদ্ধতা মূল্যায়ন

ক<উপ>260/280</উপ>: 1.8-2.1

ক<উপ>260/230</উপ>: >2.0

5.2 অখণ্ডতা যাচাইকরণ

ইলেক্ট্রোফোরেসিস: স্বতন্ত্র 28S/18S rRNA ব্যান্ড (2:1 অনুপাত)

RIN (আরএনএ ইন্টিগ্রিটি নম্বর): বেশিরভাগ অ্যাপ্লিকেশনের জন্য ≥7

5.3 জিডিএনএ দূষণ পরীক্ষা

ডাউনস্ট্রিম অ্যাসেসের জন্য প্রয়োজন হলে DNase হজম পদক্ষেপ অন্তর্ভুক্ত করুন

5.4 স্টোরেজ

অ্যালিকোট আরএনএ

-80 ডিগ্রি সেলসিয়াসে স্টোর করুন; এড়ানো >3 হিমায়িত-গলে যাওয়া চক্র

সমালোচনামূলক অনুস্মারক

EDTA টিউবগুলি নিউক্লিয়াস প্রতিরোধের জন্য অপরিহার্য

অবিলম্বে প্রক্রিয়াকরণ RNA অবক্ষয় প্রতিরোধ করে

ইলিশনের আগে সম্পূর্ণ ইথানল অপসারণ বাধ্যতামূলক

RNase-মুক্ত পরিবেশ: গ্লাভস, বাধা টিপস, এবং দূষিত পৃষ্ঠতল

নমুনা প্রকারের সাথে কিট সামঞ্জস্যতা যাচাই করুন (যেমন, হেপারিনাইজড রক্তের জন্য বিশেষ কিট প্রয়োজন)

সরবরাহকারী

সাংহাই লিংজুন বায়োটেকনোলজি কো., লিমিটেডসালে প্রতিষ্ঠিত হয় 2016 যা বায়োম্যাগনেটিক উপকরণ এবং নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন বিকারকগুলির একটি পেশাদার প্রস্তুতকারক.

আমাদের নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন এবং পরিশোধন সমৃদ্ধ অভিজ্ঞতা আছে, প্রোটিন পরিশোধন, কোষ বিচ্ছেদ, কেমিলুমিনেসেন্স, এবং অন্যান্য প্রযুক্তিগত ক্ষেত্র.

আমাদের পণ্য ব্যাপকভাবে অনেক ক্ষেত্রে ব্যবহৃত হয়, যেমন মেডিকেল টেস্টিং, জেনেটিক পরীক্ষা, বিশ্ববিদ্যালয় গবেষণা, জেনেটিক প্রজনন, এবং তাই. আমরা কেবল পণ্য সরবরাহ করি না তবে OEM গ্রহণ করতে পারি, ওডিএম, এবং অন্যান্য প্রয়োজন. আপনি যদি একটি সম্পর্কিত প্রয়োজন আছে, আমাদের সাথে যোগাযোগ বিনা দ্বিধায় দয়া করে .