অপ্টিমাইজ করা এইচ. চৌম্বক পুঁতি ডিএনএ নিষ্কাশন সঙ্গে pylori সনাক্তকরণ

ভূমিকা

চুম্বকীয় গুটিকা-ভিত্তিক নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন বর্তমানে হেলিকোব্যাক্টর পাইলোরির আণবিক সনাক্তকরণে একটি গুরুত্বপূর্ণ ভূমিকা পালন করছে মূলধারার এবং সোনার মান প্রযুক্তি (এইচ. পাইলোরি). আজ, আমরা অ্যাপ্লিকেশনটি বিস্তারিতভাবে অন্বেষণ করব, নির্দিষ্ট প্রোটোকল, এবং হেলিকোব্যাক্টর পাইলোরি নিউক্লিক অ্যাসিড পরীক্ষায় চৌম্বকীয় গুটিকা-ভিত্তিক নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন প্রযুক্তির ভবিষ্যত সম্ভাবনা.

1. আবেদন: কেন চৌম্বক গুটিকা পদ্ধতি H এর জন্য বিশেষভাবে উপযুক্ত. পাইলোরি নিউক্লিক অ্যাসিড পরীক্ষা?

এইচ এর জন্য নমুনা. পাইলোরি সনাক্তকরণে সাধারণত গ্যাস্ট্রিক মিউকোসাল টিস্যু অন্তর্ভুক্ত থাকে (বায়োপসি), মল, লালা, বা ডেন্টাল প্লেক. এই নমুনাগুলি রচনায় জটিল, প্রচুর পরিমাণে হোস্ট কোষ রয়েছে, শ্লেষ্মা, খাদ্য ধ্বংসাবশেষ, পিত্ত অ্যাসিড, এবং বিভিন্ন পিসিআর ইনহিবিটার.

অতএব, দক্ষ এবং বিশুদ্ধ নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন পরবর্তী নিউক্লিক অ্যাসিড পরীক্ষার নির্ভুলতা নিশ্চিত করার জন্য গুরুত্বপূর্ণ (যেমন qPCR, ডিজিটাল পিসিআর, এবং সিকোয়েন্সিং).

1.1 চৌম্বক গুটিকা পদ্ধতি এই প্রসঙ্গে উল্লেখযোগ্য সুবিধা প্রদান করে

• উচ্চ বিশুদ্ধতা এবং ফলন: চৌম্বক পুঁতি কার্যকরভাবে নিউক্লিক অ্যাসিড শোষণ করে এবং প্রোটিনের মতো অমেধ্য অপসারণ করে, পলিস্যাকারাইড, এবং একাধিক ওয়াশিং ধাপের মাধ্যমে লিপিড. জটিল গ্যাস্ট্রোইনটেস্টাইনাল নমুনাগুলিতে পিসিআর ইনহিবিটারগুলিকে নির্মূল করতে এগুলি বিশেষভাবে কার্যকর, ব্যাপকভাবে সনাক্তকরণ সংবেদনশীলতা এবং নির্দিষ্টতা বৃদ্ধি.
• অটোমেশন এবং উচ্চ থ্রুপুট: চৌম্বকীয় গুটিকা পদ্ধতি অটোমেশনের জন্য অত্যন্ত উপযুক্ত. অসংখ্য স্বয়ংক্রিয় নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন যন্ত্র পাওয়া যায় যা একযোগে কয়েক ডজন বা এমনকি শত শত নমুনা প্রক্রিয়া করতে পারে, উল্লেখযোগ্যভাবে দক্ষতা উন্নতি, মানুষের ত্রুটি হ্রাস, এবং বড় আকারের ক্লিনিকাল পরীক্ষা এবং মহামারী সংক্রান্ত স্ক্রীনিংয়ের চাহিদা পূরণ করা.
• নিরাপত্তা এবং সরলতা: পুরো প্রক্রিয়াটি সিল করা গভীর-কূপ প্লেটে পরিচালিত হয়, এরোসল দূষণ কমানো এবং অপারেটর হ্রাস করা’ বিপজ্জনক রিএজেন্ট এক্সপোজার, যার ফলে জৈব নিরাপত্তা বৃদ্ধি.
• নমনীয়তা: পদ্ধতি বিভিন্ন নমুনা ধরনের জন্য উপযুক্ত, গ্যাস্ট্রিক টিস্যু সহ, মল, এবং মৌখিক নমুনা, লাইসিস বাফার配方 এবং অপারেটিং প্যারামিটারে ছোটখাটো সমন্বয় সহ.
• প্রমিতকরণ: স্বয়ংক্রিয় প্রক্রিয়া উচ্চ মান নিশ্চিত করে, নির্ভরযোগ্য ফলাফল, এবং আন্তঃ-ল্যাবরেটরি তুলনা এবং মান নিয়ন্ত্রণের সুবিধা দেয়.

2. প্রোটোকল: চৌম্বকীয় গুটিকা-ভিত্তিক নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন এবং সনাক্তকরণ কর্মপ্রবাহ H এর জন্য. পাইলোরি

নিম্নে এইচ এক্সট্র্যাক্ট করার জন্য একটি প্রমিত স্বয়ংক্রিয় চৌম্বকীয় গুটিকা-ভিত্তিক প্রোটোকল. পাইলোরি ডিএনএ (উদাহরণ হিসেবে গ্যাস্ট্রিক টিস্যু বা মলের নমুনা ব্যবহার করা):

2.1 নমুনা প্রাক চিকিত্সা

গ্যাস্ট্রিক মিউকোসাল টিস্যু: একটি পিবিএস-যুক্ত সেন্ট্রিফিউজ টিউবে বায়োপসি টিস্যু রাখুন এবং একটি টিস্যু গ্রাইন্ডার ব্যবহার করে পুঙ্খানুপুঙ্খভাবে একজাত করুন.

মলের নমুনা: একটি ছোট পরিমাণ স্থগিত (যেমন, 100- 200 মিলিগ্রাম) একটি নির্দিষ্ট নমুনা সংরক্ষণ সমাধান বা পিবিএস বাফারে মল নমুনার, ঘূর্ণি মিশ্রিত, এবং সুপারনাট্যান্ট সংগ্রহের জন্য সেন্ট্রিফিউজ.

2.2 নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন (একটি 96-ওয়েল স্বয়ংক্রিয় নিষ্কাশন সিস্টেম ব্যবহার করে)

লাইসিস: নিন 200 প্রক্রিয়াকৃত নমুনা সুপারন্যাট্যান্টের μL এবং প্রোটিনেস কে ধারণকারী একটি শক্তিশালী লাইসিস বাফারে যোগ করুন (যেমন, একটি গুয়ানিডিন এইচসিএল-ভিত্তিক ডিনাচারিং সল্ট সিস্টেম). কোষ এবং ব্যাকটেরিয়া সম্পূর্ণরূপে লাইজ করার জন্য 60-70 ডিগ্রি সেলসিয়াসে 10-20 মিনিটের জন্য সেদ্ধ করুন, নিউক্লিক অ্যাসিড ছেড়ে দেয়, এবং কোন সম্ভাব্য নিউক্লিয়াস নিষ্ক্রিয় করুন.

বাঁধাই: লাইসেটে বাইন্ডিং বাফার এবং ম্যাগনেটিক বিড সাসপেনশন যোগ করুন এবং মিশ্রিত করুন. বিকৃত লবণের উচ্চ আয়নিক শক্তির অধীনে, ডিএনএ বিশেষভাবে চৌম্বক পুঁতির পৃষ্ঠে শোষণ করে. কয়েক মিনিটের জন্য incubating পরে, একটি চৌম্বক স্ট্যান্ড ব্যবহার করে পুঁতি-ডিএনএ কমপ্লেক্সগুলি ক্যাপচার করুন এবং সুপারন্যাট্যান্টকে বাতিল করুন.

ধোয়া:

ওয়াশ বাফার আই: সাধারণত প্রোটিন অপসারণের জন্য লবণ এবং ইথানলের উচ্চ ঘনত্ব থাকে, লিপিড, এবং অন্যান্য অমেধ্য.

ধোয়া বাফার II: সাধারণত লবণ এবং অবশিষ্ট বাধা অপসারণের জন্য লবণ এবং ইথানলের কম ঘনত্ব থাকে.

প্রতিটি ধোয়ার পর ধাপ, পুঁতি পুনরায় সাসপেন্ড, তাদের ধরা, এবং তরল ফেলে দিন. 2-3 বার পুনরাবৃত্তি করুন.

শুকানো: সম্পূর্ণরূপে ধোয়া বাফার অপসারণ পরে, টিউবটিকে ঘরের তাপমাত্রায় কয়েক মিনিটের জন্য খোলা রেখে দিন বা অবশিষ্ট ইথানলকে সম্পূর্ণরূপে বাষ্পীভূত করতে মৃদু তাপ প্রয়োগ করুন, পরবর্তী পিসিআর প্রতিক্রিয়াগুলির সাথে হস্তক্ষেপ এড়ানো.

ইলুশন: একটি কম লবণ বা লবণ-মুক্ত ইলুশন বাফার যোগ করুন (যেমন, Tris-EDTA বাফার বা জীবাণুমুক্ত জল), পুঁতি পুনরায় সাসপেন্ড, এবং পুঁতি থেকে DNA বিচ্ছিন্ন করার জন্য 55-65°C তাপমাত্রায় 5-10 মিনিটের জন্য সেঁকুন. অবশেষে, একটি চৌম্বক স্ট্যান্ড ব্যবহার করে জপমালা ক্যাপচার, এবং ফলস্বরূপ সুপারনাট্যান্টে বিশুদ্ধ এইচ থাকে. পাইলোরি ডিএনএ টেমপ্লেট.

2.3 নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণ

নিষ্কাশিত ডিএনএ টেমপ্লেটটি একটি রিয়েল-টাইম পরিমাণগত পিসিআর-এ যোগ করুন (qPCR) প্রতিক্রিয়া সিস্টেম.

টার্গেট জিন: H এর সাধারণভাবে নির্বাচিত অত্যন্ত নির্দিষ্ট সংরক্ষিত জিন. পাইলোরি অন্তর্ভুক্ত:

• ইউরেস একটি জিন (ureA): সবচেয়ে বেশি ব্যবহৃত হয়, অত্যন্ত উচ্চ নির্দিষ্টতা সঙ্গে.
• 16এস আরআরএনএ জিন: অত্যন্ত সংরক্ষিত, জেনাস-স্তরের সনাক্তকরণের জন্য উপযুক্ত.
• cagA জিন: একটি ভাইরুলেন্স জিন উচ্চ-ভাইরুলেন্স স্ট্রেনগুলিকে আলাদা করতে ব্যবহৃত হয়.

প্রতিক্রিয়া: একটি qPCR যন্ত্রে পরিবর্ধন সম্পাদন করুন এবং ফলাফল নির্ধারণ করতে ফ্লুরোসেন্স সংকেত নিরীক্ষণ করুন. ইতিবাচক নমুনাগুলি একটি চরিত্রগত S- আকৃতির পরিবর্ধন বক্ররেখা দেখাবে.

মান নিয়ন্ত্রণ

অভ্যন্তরীণ নিয়ন্ত্রণ (আইসি): সম্পূর্ণ প্রক্রিয়ার সাফল্য নিরীক্ষণ এবং মিথ্যা নেতিবাচক এড়াতে নিষ্কাশনের শুরুতে যোগ করা হয়েছে.

ইতিবাচক এবং নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ: নিষ্কাশন এবং পিসিআর রিএজেন্টের কার্যকারিতা নিশ্চিত করতে প্রতিটি পরীক্ষায় অন্তর্ভুক্ত.

3. সম্ভাবনা এবং ভবিষ্যতের দিকনির্দেশ

চৌম্বকীয় গুটিকা-ভিত্তিক নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন প্রযুক্তির সম্ভাবনা এইচ. পাইলোরি সনাক্তকরণ বিশাল এবং নিম্নলিখিত দিকগুলিতে বিকাশ করবে:

• সম্পূর্ণরূপে সমন্বিত “নমুনা-ইন, ফলাফল-আউট” সিস্টেম: ভবিষ্যতের প্রবণতাগুলি নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশনকে একীভূত করা জড়িত, পরিবর্ধন, এবং একটি একক মাইক্রোফ্লুইডিক চিপ বা কার্টিজে সনাক্তকরণ. ব্যবহারকারীদের শুধুমাত্র নমুনা যোগ করতে হবে, এবং যন্ত্রটি স্বয়ংক্রিয়ভাবে সম্পূর্ণ প্রক্রিয়াটি সম্পূর্ণ করে এবং একটি প্রতিবেদন তৈরি করে. এটি অপারেশনগুলিকে ব্যাপকভাবে সহজ করবে, সনাক্তকরণ সময় ছোট করুন (সম্ভাব্য ভিতরে 1 ঘন্টা), এবং এটি বহিরাগত রোগীদের ক্লিনিকের জন্য অত্যন্ত উপযুক্ত করে তোলে, প্রাথমিক যত্ন হাসপাতাল, এবং এমনকি বাড়িতে ব্যবহার.
• মাল্টিপ্লেক্স সনাক্তকরণ এবং ড্রাগ প্রতিরোধের জিন বিশ্লেষণ: চৌম্বকীয় গুটিকা পদ্ধতির মাধ্যমে নিষ্কাশিত উচ্চ-মানের নিউক্লিক অ্যাসিড মাল্টিপ্লেক্স কিউপিসিআর পরীক্ষা সমর্থন করে. একটি একক প্রতিক্রিয়া শুধুমাত্র H নির্ধারণ করতে পারে না. পাইলোরি সংক্রমণ কিন্তু একাধিক ড্রাগ প্রতিরোধের জিন সনাক্ত করে (যেমন, ক্ল্যারিথ্রোমাইসিন রেজিস্ট্যান্স মিউটেশন 23S rRNA, লেভোফ্লক্সাসিন প্রতিরোধের মিউটেশন জিআরএ), সুনির্দিষ্ট ক্লিনিকাল চিকিত্সার জন্য সরাসরি নির্দেশনা প্রদানের জন্য আণবিক রোগ নির্ণয় এবং ড্রাগ সংবেদনশীলতা পরীক্ষাকে একীভূত করা.
• মেটাজেনমিক্স এবং স্ট্রেন টাইপিং: মেটাজেনমিক সিকোয়েন্সিংয়ের জন্য উচ্চ-মানের ডিএনএ নিষ্কাশন একটি পূর্বশর্ত (mNGS). চুম্বকীয় গুটিকা পদ্ধতি mNGS-এর জন্য উচ্চ-মানের টেমপ্লেট প্রদান করতে পারে, H এর উপর গবেষণা সক্ষম করা. পাইলোরি মাইক্রোবায়োটা বৈচিত্র্য, বিবর্তনীয় সম্পর্ক, এবং সংক্রমণ মাইক্রোএনভায়রনমেন্টে অন্যান্য অণুজীবের সাথে মিথস্ক্রিয়া, যার ফলে গভীর যান্ত্রিক গবেষণার অগ্রগতি.
• নন-ইনভেসিভ টেস্টিং এর জনপ্রিয়করণ: মল-ভিত্তিক এইচ. পাইলোরি ডিএনএ পরীক্ষা (স্টুল অ্যান্টিজেন পরীক্ষা, SAT) একটি চমৎকার অ আক্রমণাত্মক পদ্ধতি. স্বয়ংক্রিয় চৌম্বকীয় গুটিকা-ভিত্তিক নিষ্কাশনের পরিপক্কতা বড় আকারের মল স্ক্রীনিংকে সম্ভবপর করে তুলবে, শিশুদের জন্য উপযুক্ত, এন্ডোস্কোপির প্রতি অসহিষ্ণু ব্যক্তি, এবং পোস্ট-ট্রিটমেন্ট কার্যকারিতা নিরীক্ষণ.
• ক্রমাগত প্রযুক্তিগত অপ্টিমাইজেশান: চৌম্বক জপমালা, বাফার ফর্মুলেশন, এবং ইন্সট্রুমেন্ট ডিজাইন দ্রুত অর্জনের জন্য অপ্টিমাইজ করা অব্যাহত থাকবে (ভিতরে সংক্ষিপ্ত করা 20 মিনিট), আরো খরচ কার্যকর (প্রতি-পরীক্ষা খরচ কমানো), এবং সবুজ (আরো পরিবেশগতভাবে বন্ধুত্বপূর্ণ reagents ব্যবহার করে) উচ্চ বিশুদ্ধতা নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন.

4. পণ্য সুপারিশ

সাংহাই লিংজুন বায়োটেকনোলজি কো., লিমিটেড. প্যাথোজেন ডিজিজ ডায়াগনস্টিকসে ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত সিলিকা-ভিত্তিক চৌম্বক পুঁতির বিভিন্ন মডেল অফার করে, বিশেষ করে 160013 চৌম্বক জপমালা, যা হেলিকোব্যাক্টর পাইলোরি নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশনের জন্য উপযুক্ত. দ 160013 চৌম্বক জপমালা অত্যন্ত উচ্চ সনাক্তকরণ সংবেদনশীলতা প্রদান, সংক্রমণের সময় প্রাথমিক স্ক্রীনিং সক্ষম করা এবং রোগ নিয়ন্ত্রণ ও প্রতিরোধের জন্য মূল্যবান সময়.

【পণ্যের স্পেসিফিকেশন】

পণ্য কোড: 160013

কঠিন বিষয়বস্তু: 50 mg/mL

প্যাকেজিং: 2 mL / 10 mL / 50 mL / 500 mL / 1000 mL

【পণ্যের পরামিতি】

সক্রিয় গ্রুপ: সি-ওহ

ম্যাগনেটিক বিড ম্যাট্রিক্স: সিলিকন ডাই অক্সাইড

গড় কণা আকার: 1.2 µm

চৌম্বকীয় স্যাচুরেশন শক্তি: 65 ± 5 ইমু/জি

【পণ্যের সুবিধা】

উচ্চ শোষণ হার: সর্বোচ্চ পুনরুদ্ধারের হার ছাড়িয়ে গেছে 95%.

সহজ অপারেশনের জন্য চমৎকার সাসপেনশন এবং শক্তিশালী চৌম্বকীয় বৈশিষ্ট্য.

নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশনে উচ্চ বিশুদ্ধতা এবং সংবেদনশীলতা.

চমৎকার ব্যাচ-টু-ব্যাচ সামঞ্জস্য সহ পরিপক্ক উত্পাদন প্রক্রিয়া.

উপসংহার

চৌম্বক গুটিকা-ভিত্তিক নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন প্রযুক্তি, অটোমেশন এর সুবিধা সহ, উচ্চ থ্রুপুট, উচ্চ বিশুদ্ধতা, এবং উচ্চ নিরাপত্তা, হেলিকোব্যাক্টর পাইলোরি আণবিক ডায়গনিস্টিকসে নিউক্লিক অ্যাসিড প্রস্তুতির জন্য সোনার মানক পদ্ধতি হয়ে উঠেছে. এটি শুধুমাত্র বর্তমান qPCR পরীক্ষার নির্ভরযোগ্যতা নিশ্চিত করে না বরং দ্রুত অগ্রসর হওয়ার জন্য একটি মূল প্রযুক্তিগত ভিত্তি হিসেবে কাজ করে।, সুনির্দিষ্ট, এবং এইচ এর অ আক্রমণাত্মক রোগ নির্ণয়. পাইলোরি সংক্রমণ. যেহেতু আণবিক প্রযুক্তিগুলি বিকশিত এবং সংহত হতে থাকে, এই ক্ষেত্রে চৌম্বকীয় গুটিকা-ভিত্তিক পদ্ধতির প্রয়োগ কেবল আরও গভীর এবং ব্যাপক হয়ে উঠবে.

সরবরাহকারী

সাংহাই লিংজুন বায়োটেকনোলজি কো., লিমিটেডসালে প্রতিষ্ঠিত হয় 2016 যা বায়োম্যাগনেটিক উপকরণ এবং নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন বিকারকগুলির একটি পেশাদার প্রস্তুতকারক.

আমাদের নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন এবং পরিশোধন সমৃদ্ধ অভিজ্ঞতা আছে, প্রোটিন পরিশোধন, কোষ বিচ্ছেদ, কেমিলুমিনেসেন্স, এবং অন্যান্য প্রযুক্তিগত ক্ষেত্র.

আমাদের পণ্য ব্যাপকভাবে অনেক ক্ষেত্রে ব্যবহৃত হয়, যেমন মেডিকেল টেস্টিং, জেনেটিক পরীক্ষা, বিশ্ববিদ্যালয় গবেষণা, জেনেটিক প্রজনন, এবং তাই. আমরা কেবল পণ্য সরবরাহ করি না তবে OEM গ্রহণ করতে পারি, ওডিএম, এবং অন্যান্য প্রয়োজন. আপনি যদি একটি সম্পর্কিত প্রয়োজন আছে, আমাদের সাথে যোগাযোগ বিনা দ্বিধায় দয়া করে .