எச். காந்த மணி டிஎன்ஏ பிரித்தெடுத்தல் மூலம் பைலோரி கண்டறிதல்

அறிமுகம்

காந்த மணி அடிப்படையிலான நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் தற்போது ஹெலிகோபாக்டர் பைலோரியின் மூலக்கூறு கண்டறிதலில் முக்கிய பங்கு வகிக்கும் முக்கிய மற்றும் தங்க தர தொழில்நுட்பம் (எச். பைலோரி). இன்று, விண்ணப்பத்தை விரிவாக ஆராய்வோம், குறிப்பிட்ட நெறிமுறைகள், ஹெலிகோபாக்டர் பைலோரி நியூக்ளிக் அமில சோதனையில் காந்த மணிகள் அடிப்படையிலான நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுக்கும் தொழில்நுட்பத்தின் எதிர்கால வாய்ப்புகள்.

1. விண்ணப்பம்: ஏன் காந்த மணி முறை குறிப்பாக H க்கு ஏற்றது. பைலோரி நியூக்ளிக் அமில சோதனை?

எச் க்கான மாதிரிகள். பைலோரி கண்டறிதல் பொதுவாக இரைப்பை மியூகோசல் திசுவை உள்ளடக்கியது (பயாப்ஸி), மலம், உமிழ்நீர், அல்லது பல் தகடு. இந்த மாதிரிகள் கலவையில் சிக்கலானவை, பெரிய அளவிலான ஹோஸ்ட் செல்களைக் கொண்டுள்ளது, சளி, உணவு குப்பைகள், பித்த அமிலங்கள், மற்றும் பல்வேறு PCR தடுப்பான்கள்.

எனவே, திறமையான மற்றும் தூய்மையான நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல், அடுத்தடுத்த நியூக்ளிக் அமில சோதனைகளின் துல்லியத்தை உறுதி செய்வதற்கு முக்கியமானது (qPCR போன்றவை, டிஜிட்டல் PCR, மற்றும் வரிசைப்படுத்துதல்).

1.1 காந்த மணி முறை இந்த சூழலில் குறிப்பிடத்தக்க நன்மைகளை வழங்குகிறது

• அதிக தூய்மை மற்றும் மகசூல்: காந்த மணிகள் நியூக்ளிக் அமிலங்களை திறம்பட உறிஞ்சி, புரதங்கள் போன்ற அசுத்தங்களை நீக்குகின்றன, பாலிசாக்கரைடுகள், மற்றும் பல சலவை படிகள் மூலம் லிப்பிடுகள். சிக்கலான இரைப்பை குடல் மாதிரிகளில் PCR தடுப்பான்களை அகற்றுவதில் அவை குறிப்பாக பயனுள்ளதாக இருக்கும், கண்டறிதல் உணர்திறன் மற்றும் தனித்துவத்தை பெரிதும் மேம்படுத்துகிறது.
• ஆட்டோமேஷன் மற்றும் உயர் செயல்திறன்: காந்த மணி முறை ஆட்டோமேஷனுக்கு மிகவும் ஏற்றது. பல தானியங்கு நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுக்கும் கருவிகள் கிடைக்கின்றன, அவை ஒரே நேரத்தில் டஜன் கணக்கான அல்லது நூற்றுக்கணக்கான மாதிரிகளை செயலாக்க முடியும்., செயல்திறனை கணிசமாக மேம்படுத்துகிறது, மனித தவறுகளை குறைக்கிறது, மற்றும் பெரிய அளவிலான மருத்துவ பரிசோதனை மற்றும் தொற்றுநோயியல் திரையிடல் ஆகியவற்றின் கோரிக்கைகளை பூர்த்தி செய்தல்.
• பாதுகாப்பு மற்றும் எளிமை: முழு செயல்முறையும் சீல் செய்யப்பட்ட ஆழமான கிணறு தட்டுகளில் நடத்தப்படுகிறது, ஏரோசல் மாசுபாட்டைக் குறைத்தல் மற்றும் ஆபரேட்டர்களைக் குறைத்தல்’ அபாயகரமான உலைகளின் வெளிப்பாடு, அதன் மூலம் உயிர் பாதுகாப்பை மேம்படுத்துகிறது.
• நெகிழ்வுத்தன்மை: இந்த முறை பல்வேறு மாதிரி வகைகளுக்கு ஏற்றது, இரைப்பை திசு உட்பட, மலம், மற்றும் வாய்வழி மாதிரிகள், லிசிஸ் பஃபர் மற்றும் இயக்க அளவுருக்களில் சிறிய மாற்றங்களுடன்.
• தரப்படுத்தல்: தானியங்கு செயல்முறைகள் உயர் தரநிலையை உறுதி செய்கின்றன, நம்பகமான முடிவுகள், மற்றும் ஆய்வகங்களுக்கு இடையேயான ஒப்பீடுகள் மற்றும் தரக் கட்டுப்பாட்டை எளிதாக்குகிறது.

2. நெறிமுறை: காந்த மணி அடிப்படையிலான நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் H க்கான கண்டறிதல் பணிப்பாய்வு. பைலோரி

H ஐ பிரித்தெடுப்பதற்கான நிலையான தானியங்கு காந்த மணி அடிப்படையிலான நெறிமுறை பின்வருமாறு. பைலோரி டிஎன்ஏ (உதாரணமாக இரைப்பை திசு அல்லது மல மாதிரிகளைப் பயன்படுத்துதல்):

2.1 மாதிரி முன் சிகிச்சை

இரைப்பை மியூகோசல் திசு: பிபிஎஸ்-கொண்ட மையவிலக்குக் குழாயில் பயாப்ஸி திசுவை வைக்கவும் மற்றும் திசு கிரைண்டரைப் பயன்படுத்தி முழுமையாக ஒருமைப்படுத்தவும்.

மல மாதிரி: ஒரு சிறிய தொகையை நிறுத்தவும் (எ.கா., 100-200 மி.கி) ஒரு குறிப்பிட்ட மாதிரி பாதுகாப்பு தீர்வு அல்லது பிபிஎஸ் தாங்கலில் உள்ள மல மாதிரி, கலக்க சுழல், மற்றும் அதிவேகத்தை சேகரிக்க மையவிலக்கு.

2.2 நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் (96-கிணறு தானியங்கி பிரித்தெடுத்தல் அமைப்பைப் பயன்படுத்துதல்)

லிசிஸ்: எடுத்துக்கொள் 200 பதப்படுத்தப்பட்ட மாதிரி சூப்பர்நேட்டன்ட்டின் μL மற்றும் அதை புரோட்டினேஸ் கே கொண்ட சக்திவாய்ந்த லிசிஸ் பஃப்பரில் சேர்க்கவும் (எ.கா., குவானிடைன் HCl-அடிப்படையிலான denaturing உப்பு அமைப்பு). செல்கள் மற்றும் பாக்டீரியாக்களை முழுமையாக லைஸ் செய்ய 10-20 நிமிடங்களுக்கு 60-70°C வெப்பநிலையில் அடைகாக்கவும்., நியூக்ளிக் அமிலங்களை வெளியிடுகிறது, மற்றும் சாத்தியமான அணுக்களை செயலிழக்கச் செய்யவும்.

பிணைத்தல்: பைண்டிங் பஃபர் மற்றும் மேக்னடிக் பீட் சஸ்பென்ஷனை லைசேட்டில் சேர்த்து கலக்கவும். டினாட்டரிங் உப்பின் உயர் அயனி வலிமையின் கீழ், டிஎன்ஏ குறிப்பாக காந்த மணிகளின் மேற்பரப்பில் உறிஞ்சுகிறது. பல நிமிடங்கள் அடைகாத்த பிறகு, ஒரு காந்த நிலைப்பாட்டைப் பயன்படுத்தி மணி-டிஎன்ஏ வளாகங்களைப் பிடிக்கவும் மற்றும் சூப்பர்நேட்டன்ட்டை நிராகரிக்கவும்.

கழுவுதல்:

வாஷ் பஃபர் I: பொதுவாக புரதங்களை அகற்ற உப்பு மற்றும் எத்தனால் அதிக செறிவுகளைக் கொண்டுள்ளது, லிப்பிடுகள், மற்றும் பிற அசுத்தங்கள்.

வாஷ் பஃபர் II: உப்புகள் மற்றும் எஞ்சிய தடுப்பான்களை அகற்ற பொதுவாக உப்பு மற்றும் எத்தனால் குறைந்த செறிவுகளைக் கொண்டுள்ளது..

ஒவ்வொரு கழுவும் படிக்குப் பிறகு, மணிகளை மீண்டும் இணைக்கவும், அவர்களை பிடிக்க, மற்றும் திரவத்தை நிராகரிக்கவும். 2-3 முறை செய்யவும்.

உலர்த்துதல்: கழுவும் இடையகத்தை முழுவதுமாக அகற்றிய பிறகு, அறை வெப்பநிலையில் சில நிமிடங்களுக்கு குழாயைத் திறந்து விடவும் அல்லது எஞ்சியிருக்கும் எத்தனால் முழுவதுமாக ஆவியாகும் வகையில் மிதமான வெப்பத்தைப் பயன்படுத்தவும், அடுத்தடுத்த PCR எதிர்வினைகளில் குறுக்கிடுவதைத் தவிர்க்கிறது.

நீக்குதல்: குறைந்த உப்பு அல்லது உப்பு இல்லாத எலுஷன் பஃப்பரைச் சேர்க்கவும் (எ.கா., Tris-EDTA தாங்கல் அல்லது மலட்டு நீர்), மணிகளை மீண்டும் இணைக்கவும், மணிகளில் இருந்து டிஎன்ஏவை பிரிக்க 55-65 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையில் 5-10 நிமிடங்கள் அடைகாக்கவும்.. இறுதியாக, காந்த நிலைப்பாட்டைப் பயன்படுத்தி மணிகளைப் பிடிக்கவும், இதன் விளைவாக வரும் சூப்பர்நேட்டண்ட் சுத்திகரிக்கப்பட்ட H ஐக் கொண்டுள்ளது. பைலோரி டிஎன்ஏ டெம்ப்ளேட்.

2.3 நியூக்ளிக் அமிலம் கண்டறிதல்

பிரித்தெடுக்கப்பட்ட டிஎன்ஏ டெம்ப்ளேட்டை நிகழ்நேர அளவு PCR இல் சேர்க்கவும் (qPCR) எதிர்வினை அமைப்பு.

இலக்கு மரபணுக்கள்: H இன் பொதுவாக தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட மிகவும் குறிப்பிட்ட பாதுகாக்கப்பட்ட மரபணுக்கள். பைலோரி அடங்கும்:

• யூரேஸ் ஒரு மரபணு (யூரியா): மிகவும் பொதுவாக பயன்படுத்தப்படுகிறது, மிக உயர்ந்த தனித்தன்மையுடன்.
• 16எஸ் ஆர்ஆர்என்ஏ மரபணு: மிகவும் பாதுகாக்கப்பட்டவை, இன-நிலை அடையாளத்திற்கு ஏற்றது.
• cagA மரபணு: உயர் வைரஸ் விகாரங்களை வேறுபடுத்துவதற்குப் பயன்படுத்தப்படும் ஒரு வைரஸ் மரபணு.

எதிர்வினை: qPCR கருவியில் பெருக்கத்தைச் செய்து, முடிவுகளைத் தீர்மானிக்க ஃப்ளோரசன் சிக்னலைக் கண்காணிக்கவும். நேர்மறை மாதிரிகள் ஒரு சிறப்பியல்பு S- வடிவ பெருக்க வளைவைக் காண்பிக்கும்.

தரக் கட்டுப்பாடு

உள் கட்டுப்பாடு (ஐசி): முழு செயல்முறையின் வெற்றியைக் கண்காணிக்கவும் தவறான எதிர்மறைகளைத் தவிர்க்கவும் பிரித்தெடுக்கும் தொடக்கத்தில் சேர்க்கப்பட்டது.

நேர்மறை மற்றும் எதிர்மறை கட்டுப்பாடுகள்: பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் PCR வினைகளின் செயல்திறனை உறுதிப்படுத்த ஒவ்வொரு பரிசோதனையிலும் சேர்க்கப்பட்டுள்ளது.

3. வாய்ப்புகள் மற்றும் எதிர்கால திசைகள்

H இல் காந்த மணி அடிப்படையிலான நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுக்கும் தொழில்நுட்பத்திற்கான வாய்ப்புகள். பைலோரி கண்டறிதல் விரிவானது மற்றும் பின்வரும் திசைகளில் வளரும்:

• முழுமையாக ஒருங்கிணைக்கப்பட்டது “மாதிரி-இன், முடிவு-வெளியீடு” அமைப்புகள்: எதிர்கால போக்குகள் நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுப்பதை ஒருங்கிணைப்பதை உள்ளடக்கியது, பெருக்கம், மற்றும் ஒற்றை மைக்ரோஃப்ளூய்டிக் சிப் அல்லது கார்ட்ரிட்ஜில் கண்டறிதல். பயனர்கள் மாதிரியை மட்டும் சேர்க்க வேண்டும், மற்றும் கருவி தானாகவே முழு செயல்முறையையும் முடித்து அறிக்கையை உருவாக்குகிறது. இது செயல்பாடுகளை பெரிதும் எளிதாக்கும், கண்டறியும் நேரத்தை குறைக்கவும் (சாத்தியமான உள்ளே 1 மணி), மற்றும் வெளிநோயாளர் கிளினிக்குகளுக்கு மிகவும் பொருத்தமானதாக ஆக்க வேண்டும், முதன்மை பராமரிப்பு மருத்துவமனைகள், மற்றும் வீட்டு உபயோகம் கூட.
• மல்டிபிளக்ஸ் கண்டறிதல் மற்றும் மருந்து எதிர்ப்பு மரபணு பகுப்பாய்வு: காந்த மணி முறை மூலம் பிரித்தெடுக்கப்பட்ட உயர்தர நியூக்ளிக் அமிலங்கள் மல்டிபிளக்ஸ் qPCR சோதனையை ஆதரிக்கின்றன. ஒற்றை எதிர்வினை H ஐ மட்டும் தீர்மானிக்க முடியாது. பைலோரி தொற்று ஆனால் பல மருந்து எதிர்ப்பு மரபணுக்களைக் கண்டறியவும் (எ.கா., கிளாரித்ரோமைசின் எதிர்ப்பு பிறழ்வு 23S rRNA, லெவோஃப்ளோக்சசின் எதிர்ப்பு பிறழ்வு gyrA), துல்லியமான மருத்துவ சிகிச்சைக்கான நேரடி வழிகாட்டுதலை வழங்க மூலக்கூறு நோயறிதல் மற்றும் மருந்து உணர்திறன் சோதனையை ஒருங்கிணைத்தல்.
• மெட்டாஜெனோமிக்ஸ் மற்றும் ஸ்ட்ரெய்ன் டைப்பிங்: உயர்தர டிஎன்ஏ பிரித்தெடுத்தல் மெட்டாஜெனோமிக் வரிசைமுறைக்கு ஒரு முன்நிபந்தனையாகும் (mNGS). காந்த மணி முறையானது mNGSக்கான உயர்தர டெம்ப்ளேட்களை வழங்க முடியும், எச் பற்றிய ஆராய்ச்சியை செயல்படுத்துகிறது. பைலோரி மைக்ரோபயோட்டா பன்முகத்தன்மை, பரிணாம உறவுகள், மற்றும் தொற்று நுண்ணுயிரிகளில் மற்ற நுண்ணுயிரிகளுடன் தொடர்பு, அதன் மூலம் ஆழமான இயந்திரவியல் ஆய்வுகள் முன்னேறும்.
• ஆக்கிரமிப்பு அல்லாத சோதனையின் பிரபலப்படுத்தல்: மலம் சார்ந்த எச். பைலோரி டிஎன்ஏ சோதனை (மலம் ஆன்டிஜென் சோதனை, SAT) ஒரு சிறந்த ஆக்கிரமிப்பு அல்லாத முறையாகும். தானியங்கு காந்த மணி அடிப்படையிலான பிரித்தெடுத்தலின் முதிர்ச்சியானது பெரிய அளவிலான மலத் திரையிடலைச் சாத்தியமாக்கும், குழந்தைகளுக்கு ஏற்றது, எண்டோஸ்கோபிக்கு சகிப்புத்தன்மையற்ற நபர்கள், மற்றும் சிகிச்சைக்குப் பிந்தைய செயல்திறன் கண்காணிப்பு.
• தொடர்ச்சியான தொழில்நுட்ப மேம்படுத்தல்: காந்த மணிகள், தாங்கல் சூத்திரங்கள், மற்றும் கருவி வடிவமைப்புகள் விரைவாக அடைய உகந்ததாக இருக்கும் (உள்ளே சுருக்குகிறது 20 நிமிடங்கள்), அதிக செலவு குறைந்த (ஒரு சோதனை செலவுகளை குறைத்தல்), மற்றும் பசுமையானது (அதிக சுற்றுச்சூழலுக்கு உகந்த உலைகளைப் பயன்படுத்துதல்) அதிக தூய்மையான நியூக்ளிக் அமிலங்களை பிரித்தெடுத்தல்.

4. தயாரிப்பு பரிந்துரை

ஷாங்காய் லிங்ஜுன் பயோடெக்னாலஜி கோ., லிமிடெட். நோய்க்கிருமி நோய் கண்டறிதலில் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படும் சிலிக்கா அடிப்படையிலான காந்த மணிகளின் பல்வேறு மாதிரிகளை வழங்குகிறது, குறிப்பாக 160013 காந்த மணிகள், ஹெலிகோபாக்டர் பைலோரி நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுக்க ஏற்றது. தி 160013 காந்த மணிகள் மிக உயர்ந்த கண்டறிதல் உணர்திறனை வழங்குகின்றன, நோய்த்தொற்றின் போது ஆரம்ப பரிசோதனை மற்றும் நோய் கட்டுப்பாடு மற்றும் தடுப்புக்கான மதிப்புமிக்க நேரத்தை செயல்படுத்துகிறது.

【தயாரிப்பு விவரக்குறிப்புகள்】

தயாரிப்பு குறியீடு: 160013

திடமான உள்ளடக்கம்: 50 mg/mL

பேக்கேஜிங்: 2 எம்.எல் / 10 எம்.எல் / 50 எம்.எல் / 500 எம்.எல் / 1000 எம்.எல்

【தயாரிப்பு அளவுருக்கள்】

செயலில் குழு: Si-OH

காந்த மணி அணி: சிலிக்கான் டை ஆக்சைடு

சராசரி துகள் அளவு: 1.2 µm

காந்த செறிவு வலிமை: 65 ± 5 ஈமு/கிராம்

【தயாரிப்பு நன்மைகள்】

அதிக உறிஞ்சுதல் விகிதம்: அதிகபட்ச மீட்பு விகிதம் அதிகமாக உள்ளது 95%.

எளிதான செயல்பாட்டிற்கான சிறந்த இடைநீக்கம் மற்றும் வலுவான காந்த பண்புகள்.

நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுப்பதில் அதிக தூய்மை மற்றும் உணர்திறன்.

முதிர்ந்த உற்பத்தி செயல்முறை சிறந்த தொகுதி-க்கு-தொகுதி நிலைத்தன்மையுடன்.

முடிவுரை

காந்த மணி அடிப்படையிலான நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் தொழில்நுட்பம், ஆட்டோமேஷனின் நன்மைகளுடன், உயர் செயல்திறன், உயர் தூய்மை, மற்றும் உயர் பாதுகாப்பு, ஹெலிகோபாக்டர் பைலோரி மூலக்கூறு கண்டறிதலில் நியூக்ளிக் அமிலம் தயாரிப்பதற்கான தங்கத் தரமான முறையாக மாறியுள்ளது.. இது தற்போதைய qPCR சோதனையின் நம்பகத்தன்மையை உறுதி செய்வதோடு மட்டுமல்லாமல், விரைவான முன்னேற்றத்திற்கான முக்கிய தொழில்நுட்ப அடித்தளமாகவும் செயல்படுகிறது., துல்லியமான, மற்றும் எச் இன் ஆக்கிரமிப்பு அல்லாத நோயறிதல். பைலோரி தொற்று. மூலக்கூறு தொழில்நுட்பங்கள் தொடர்ந்து உருவாகி ஒருங்கிணைக்கும்போது, இந்த துறையில் காந்த மணி அடிப்படையிலான முறைகளின் பயன்பாடு மிகவும் ஆழமாகவும் பரவலாகவும் மாறும்.

சப்ளையர்

ஷாங்காய் லிங்ஜுன் பயோடெக்னாலஜி கோ., லிமிடெட்இல் நிறுவப்பட்டது 2016 உயிர் காந்த பொருட்கள் மற்றும் நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுக்கும் உலைகளின் தொழில்முறை உற்பத்தியாளர்.

நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுத்தல் மற்றும் சுத்திகரிப்பு ஆகியவற்றில் எங்களுக்கு சிறந்த அனுபவம் உள்ளது, புரத சுத்திகரிப்பு, செல் பிரிப்பு, இரசாயன ஒளிர்வு, மற்றும் பிற தொழில்நுட்ப துறைகள்.

எங்கள் தயாரிப்புகள் பல துறைகளில் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, மருத்துவ பரிசோதனை போன்றவை, மரபணு சோதனை, பல்கலைக்கழக ஆராய்ச்சி, மரபணு இனப்பெருக்கம், மற்றும் பல. நாங்கள் தயாரிப்புகளை வழங்குவது மட்டுமல்லாமல் OEM ஐயும் மேற்கொள்ள முடியும், ODM, மற்றும் பிற தேவைகள். உங்களுக்கு தொடர்புடைய தேவை இருந்தால், தயவு செய்து எங்களை தொடர்பு கொள்ளவும் .