H. Brath pylori le Eastóscadh DNA Bead Maighnéadach

Réamhrá

Eastóscadh aigéid núicléacha atá bunaithe ar choirnín maighnéadach faoi ​​láthair tá ról ríthábhachtach ag an teicneolaíocht phríomhshrutha agus chaighdeán óir i mbrath móilíneach Helicobacter pylori (H. pylori). Inniu, déanfaimid iniúchadh mion ar an iarratas, prótacail ar leith, agus ionchais don todhchaí maidir le teicneolaíocht eastósctha aigéid núicléigh mhaighnéadaigh atá bunaithe ar choirníní i dtástáil aigéid núicléigh Helicobacter pylori.

1. Iarratas: Cén fáth a bhfuil an Modh Coirnín Maighnéadach Oiriúnach go háirithe do H. Tástáil Aigéad Núicléach pylori?

Samplaí do H. folaíonn braite pylori fíochán mucosal gastric de ghnáth (bithóipse), stól, seile, nó plaic fiaclóireachta. Tá na samplaí seo casta i gcomhdhéanamh, ina bhfuil suimeanna móra cealla óstaigh, mucus, smionagar bia, aigéid bhile, agus coscairí PCR éagsúla.

Dá bhrí sin, tá eastóscadh aigéid núicléacha éifeachtach agus íon ríthábhachtach chun cruinneas na dtástálacha aigéid núicléacha ina dhiaidh sin a chinntiú (mar qPCR, PCR digiteach, agus seicheamhú).

1.1 Tugann an modh coirníní maighnéadach buntáistí suntasacha sa chomhthéacs seo

• Ard-íonachta agus Toradh: Coirníní maighnéadacha adsorb go héifeachtach aigéid núicléacha agus a bhaint neamhíonachtaí cosúil le próitéiní, polaisiúicrídí, agus lipidí trí chéimeanna níocháin iolracha. Tá siad thar a bheith éifeachtach maidir le coscairí PCR a dhíchur i samplaí casta gastrointestinal, feabhsaítear íogaireacht agus sainiúlacht braite go mór.
• Uathoibriú agus Tréchur Ard: Tá an modh coirníní maighnéadacha an-oiriúnach d'uathoibriú. Tá go leor ionstraimí eastósctha aigéid núicléacha uathoibrithe ar fáil ar féidir leo mórán samplaí nó fiú na céadta sampla a phróiseáil ag an am céanna, feabhas suntasach ar éifeachtúlacht, earráid dhaonna a laghdú, agus freastal ar na héilimh a bhaineann le tástáil chliniciúil ar mhórscála agus scagadh eipidéimeolaíoch.
• Sábháilteacht agus Simplíocht: Déantar an próiseas iomlán i bplátaí toibreacha domhain séalaithe, éilliú aerasóil a íoslaghdú agus oibreoirí a laghdú’ nochtadh d’imoibrithe guaiseacha, rud a chuireann leis an mbithshábháilteacht.
• Solúbthacht: Tá an modh oiriúnach do chineálacha éagsúla samplaí, lena n-áirítear fíochán gastric, stól, agus samplaí béil, le mionchoigeartuithe ar an maolán lysis agus paraiméadair oibriúcháin.
• Caighdeánú: Cinntíonn próisis uathoibrithe ardchaighdeánú, torthaí iontaofa, agus comparáidí idirshaotharlainne agus rialú cáilíochta a éascú.

2. Prótacal: Sreabhadh Oibre Aistarraingthe agus Braite Aigéad Núicléach Maighnéadach Bhunaithe do H. pylori

Seo a leanas prótacal caighdeánach uathoibrithe coirníní maighnéadach chun H. DNA pylori (úsáid a bhaint as samplaí fíocháin ghaistreacha nó stóil mar shamplaí):

2.1 Réamhchóireáil Samplach

Fíochán Mucosal Gastrach: Cuir fíochán bithóipse i bhfeadán lártheifneora ina bhfuil PBS agus aonchineálaigh go críochnúil ag baint úsáide as grinder fíocháin.

Sampla Stól: Fionraí méid beag (e.g., 100–200 mg) de shampla stól i dtuaslagán caomhnaithe sampla sonrach nó maolán PBS, vortex a mheascadh, agus lártheifneoir chun an supernatant a bhailiú.

2.2 Eastóscadh Aigéad Núicléach (Ag baint úsáide as Córas Astarraingthe Uathoibrithe 96-Well)

Lisis: Tóg 200 μL den shástán sampla próiseáilte agus cuir le maolán cumhachtach lysis é ina bhfuil proteinase K (e.g., córas dínádúraithe salainn atá bunaithe ar ghuainidín HCl). Goir ag 60–70°C ar feadh 10–20 nóiméad chun cealla agus baictéir a líseáil go hiomlán, aigéid núicléacha a scaoileadh, agus díghníomhaigh aon núicléas féideartha.

Ceangailteach: Cuir maolán ceangailteach agus fionraí coirníní maighnéadach leis an lysate agus meascán. Faoi neart ianach ard an salann dínádúraithe, Déanann DNA adsorb go sonrach ar dhromchla na coirníní maighnéadacha. Tar éis goir ar feadh roinnt nóiméad, gabháil leis na coimpléisc coirníní-DNA ag baint úsáide as seastán maighnéadach agus caith an comhshnámhán.

Níochán:

Maolán Nigh I: Go hiondúil bíonn tiúchain arda salainn agus eatánóil ann chun próitéiní a bhaint, lipidí, agus neamhíonachtaí eile.

Maolán Nigh II: De ghnáth bíonn tiúchan íseal salainn agus eatánóil ann chun salainn agus coscairí iarmharacha a bhaint.

Tar éis gach céim nigh, na coirníní a athshuí, iad a ghabháil, agus caith an leacht. Déan 2-3 huaire.

Triomú: Tar éis an maolán níocháin a bhaint go hiomlán, fág an feadán ar oscailt ag teocht an tseomra ar feadh cúpla nóiméad nó cuir teas éadrom chun ligean d’eatánól iarmharach galú go hiomlán, cur isteach ar imoibrithe PCR ina dhiaidh sin a sheachaint.

Elution: Cuir maolán íseal-salann nó saor ó shalann leis (e.g., Maolán Tris-EDTA nó uisce steiriúil), na coirníní a athshuí, agus gor ag 55–65°C ar feadh 5–10 nóiméad chun an DNA a dhícheangal ó na coirníní. Ar deireadh, gabháil leis na coirníní ag baint úsáide as seastán maighnéadach, agus tá an H íonaithe san fheitheoir mar thoradh air. teimpléad DNA pylori.

2.3 Brath Aigéad Núicléach

Cuir an teimpléad DNA asbhainte le PCR cainníochtúil fíor-ama (qPCR) córas imoibrithe.

Géinte Sprioc: Géinte caomhnaithe an-sonrach H. pylori san áireamh:

• Úiréáis A géine (úire): Is coitianta a úsáidtear, le sainiúlacht thar a bheith ard.
• 16S rRNA géine: An-chaomhnaithe, oiriúnach le haghaidh aitheantais ghéineas-leibhéal.
• cagA géine: Géine borrtha a úsáidtear chun tréithchineálacha ard-virulence a idirdhealú.

Imoibriú: Aimpliú a dhéanamh in ionstraim qPCR agus monatóireacht a dhéanamh ar an comhartha fluaraiseachta chun torthaí a chinneadh. Léireoidh samplaí dearfacha cuar aimpliúcháin sainiúil i gcruth S.

Rialú Cáilíochta

Rialú Inmheánach (IC): Curtha leis ag tús an eastósctha chun monatóireacht a dhéanamh ar rath an phróisis iomláin agus claonchlónna bréagacha a sheachaint.

Rialuithe Dearfach agus Diúltach: San áireamh i ngach turgnamh chun éifeachtacht eastóscadh agus imoibrithe PCR a chinntiú.

3. Ionchais agus Treonna Amach Anseo

Na hionchais do theicneolaíocht eastóscadh aigéid núicléigh mhaighnéadach atá bunaithe ar choirníní in H. Tá braite pylori ollmhór agus forbróidh siad sna treoracha seo a leanas:

• Comhtháite go hiomlán “Sampla-isteach, Toradh amach” Córais: Is éard atá i gceist le treochtaí sa todhchaí ná eastóscadh aigéid núicléacha a chomhtháthú, aimpliú, agus a bhrath isteach i sliseanna nó i gcartán micreashreabhach amháin. Ní gá d'úsáideoirí ach an sampla a chur leis, agus críochnaíonn an ionstraim an próiseas iomlán go huathoibríoch agus gineann sé tuarascáil. Déanfaidh sé seo oibríochtaí a shimpliú go mór, am braite a ghiorrú (d'fhéadfadh a bheith laistigh 1 uair an chloig), agus é a dhéanamh thar a bheith oiriúnach do chlinicí othar seachtrach, ospidéil chúraim phríomhúil, agus fiú úsáid sa bhaile.
• Brath Ilphléacs agus Anailís Géine Frithsheasmhachta i nDrugaí: Tacaíonn aigéid núicléacha ardchaighdeáin a bhaintear tríd an modh coirníní maighnéadacha le tástáil ilphléacs qPCR. Ní féidir le imoibriú amháin H amháin a chinneadh. ionfhabhtú pylori ach freisin géinte friotaíochta drugaí iolracha a bhrath (e.g., frithsheasmhacht in aghaidh clarithromycin sóchán 23S rRNA, gyrA sóchán friotaíochta levofloxacin), diagnóis mhóilíneach agus tástáil leochaileachta drugaí a chomhtháthú chun treoir dhíreach a sholáthar maidir le cóireáil chliniciúil bheacht.
• Metagenomics agus Clóscríobh Strain: Tá eastóscadh DNA ardcháilíochta ina réamhriachtanas le haghaidh seicheamhú meitigenómach (mNGS). Is féidir leis an modh coirníní maighnéadacha teimpléid ardcháilíochta a sholáthar do mNGS, taighde a chumasú ar H. éagsúlacht microbiota pylori, caidrimh éabhlóideacha, agus idirghníomhaíochtaí le miocrorgánaigh eile i micri-thimpeallacht an ionfhabhtaithe, ar an gcaoi sin staidéir mheicníochta níos doimhne a chur chun cinn.
• Tástálacha Neamh-Ionracha a Dhéanamh Móréilimh: Stól-bhunaithe H. tástáil DNA pylori (tástáil antigen stól, SAT) Is modh neamh-ionrach den scoth é. Mar gheall ar aibiú eastóscadh coirníní maighnéadacha uathoibrithe beidh scagadh stól ar scála mór indéanta, oiriúnach do leanaí, daoine aonair éadulaingt ar ionscópacht, agus monatóireacht ar éifeachtúlacht iarchóireála.
• Optimization Teicneolaíochta Leanúnach: Coirníní maighnéadacha, foirmlithe maolánacha, agus leanfar de bharrfheabhsú a dhéanamh ar dhearaí ionstraimí chun iad a bhaint amach níos tapúla (giorrú go dtí laistigh 20 nóiméad), níos cost-éifeachtaí (costais in aghaidh na tástála a laghdú), agus níos glaise (ag baint úsáide as imoibrithe atá neamhdhíobhálach don chomhshaol) eastóscadh aigéid núicléacha ard-íonachta.

4. Moladh Táirge

Shanghai Lingjun Biteicneolaíocht Co., Teo. cuireann múnlaí éagsúla coirníní maighnéadacha shilice-bhunaithe a úsáidtear go forleathan i diagnóisic galar pataigin, go háirithe an 160013 coirníní maighnéadacha, atá oiriúnach le haghaidh eastóscadh aigéad núicléach Helicobacter pylori. Tá an 160013 Soláthraíonn coirníní maighnéadacha íogaireacht bhrath thar a bheith ard, scagthástáil luath a éascú le linn ionfhabhtaithe agus am luachmhar chun galair a rialú agus a chosc.

【Sonraíochtaí Táirge】

Cód Táirge: 160013

Ábhar Soladach: 50 mg/mL

Pacáistiú: 2 mL / 10 mL / 50 mL / 500 mL / 1000 mL

【Paraiméadair Táirge】

Grúpa Gníomhach: Si-OH

Maitrís Bead Maighnéadach: Dé-ocsaíd Sileacain

Meánmhéid na gCáithníní: 1.2 µm

Neart Sáithiú Maighnéadach: 65 ± 5 ae/g

【Buntáistí Táirge】

Ráta asaithe ard: Sáraíonn an t-uasráta aisghabhála 95%.

Fionraí den scoth agus airíonna maighnéadacha láidre le haghaidh oibriú éasca.

Ard-íonacht agus íogaireacht in eastóscadh aigéid núicléacha.

Próiseas táirgthe aibí le comhsheasmhacht bhaisc-go-baisc den scoth.

Conclúid

Teicneolaíocht eastóscadh aigéid núicléacha atá bunaithe ar choirníní maighnéadacha, lena buntáistí uathoibrithe, tréchur ard, íonachta ard, agus sábháilteacht ard, tar éis éirí mar an modh caighdeánach óir le haghaidh ullmhú aigéid núicléacha i diagnóisic mhóilíneach Helicobacter pylori. Ní hamháin go gcinntíonn sé iontaofacht na tástála reatha qPCR ach feidhmíonn sé freisin mar phríomhbhonn teicneolaíochta chun dul chun cinn tapa a dhéanamh., beacht, agus diagnóis neamh-ionrach de H. ionfhabhtú pylori. De réir mar a leanann teicneolaíochtaí móilíneacha ag forbairt agus ag comhtháthú, ní bheidh cur i bhfeidhm modhanna maighnéadacha coirníní-bhunaithe sa réimse seo ach níos doimhne agus níos forleithne.

Soláthraí

Shanghai Lingjun Biteicneolaíocht Co., Teo.bunaíodh i 2016 atá ina mhonaróir gairmiúil d'ábhair bithmhaighnéadacha agus imoibrithe eastóscadh aigéid núicléacha.

Tá taithí shaibhir againn in eastóscadh agus íonú aigéad núicléasach, íonú próitéine, scaradh cille, ceimileacanacht, agus réimsí teicniúla eile.

Úsáidtear ár gcuid táirgí go forleathan i go leor réimsí, mar thástáil leighis, tástáil ghéiniteach, taighde ollscoile, pórú géiniteach, agus mar sin de. Ní chuirimid ar fáil ach táirgí ach freisin is féidir tabhairt faoi OEM, ODM, agus riachtanais eile. Má tá riachtanas gaolmhar agat, bíodh leisce ort teagmháil a dhéanamh linn .