核酸抽出中に RNA が DNA よりも分解されやすいのはなぜですか?

RNAの理由 (リボ核酸) DNAよりも分解されやすい (デオキシリボ核酸) その間 抽出 これは主に、化学構造の違いと抽出時の不適切な操作に関係しています。.

私. 化学構造の違い:

1. RNAは一本鎖構造です, DNAの二本鎖構造よりも不安定な構造.

2. 2位の水酸基′ 位置: RNA分子のリボースにはヒドロキシル基が含まれています (-おお) 2で′ 位置, 一方、DNA 内のデオキシリボースはこの位置に水素原子を持っています。. この余分なヒドロキシル基は自発的な加水分解反応を促進する可能性があるため、RNA 分子をより不安定にします。, RNA鎖の切断を引き起こす.

Ⅱ. 抽出系におけるRNAseの影響:

1. 内因性RNAse: 細胞内に存在し、細胞溶解後も RNA を分解し続けることができます。.

2. 外因性RNAse: 環境中に広く存在している, 空気などの, 肌, および実験用品 (手袋, 試験管, 等).

Ⅲ. 不適切な実験操作:

1. 使用される試薬および器具は DEPC で処理されていません。 (ジエチルピロカーボネート) RNA酵素を効果的に不活化することができません.

2. 抑制剤が効かない, または投与量が不十分です, RNA酵素の活性を効果的に阻害することはできません.

3. より多くの実験サンプルまたはより高い均質化温度により、RNA 酵素活性が増加します。.

4. pHと温度の変化, 特にアルカリ性条件下では, RNA 塩基が容易に脱アミノ化される可能性がある, チェーン切れの原因となる; 高温は RNA 分子の部分的または完全な分解を引き起こす可能性もあります.

Ⅳ. RNA の分解を減らすにはどうすればよいですか?

抽出時のRNA分解を軽減するため, 一連の措置を講じる必要がある, RNAseフリーの実験用品の使用を含む, 低温での動作, RNA安定剤を使用する, 完成したキットを使って, 等. これらのメソッドは RNA 分解のリスクを効果的に軽減し、下流分析用に高品質の RNA サンプルを確実に取得します。.

サプライヤー紹介

上海霊軍生物技術有限公司, 株式会社に設立されました 2016 生体磁性材料と核酸抽出試薬の専門メーカーです.

核酸抽出・精製の経験が豊富です。, タンパク質の精製, 細胞分離, 化学発光およびその他の技術分野.

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