¿Por qué el ARN se degrada más fácilmente que el ADN durante la extracción de ácidos nucleicos??

La razón por la que el ARN (ácido ribonucleico) Se degrada más fácilmente que el ADN. (ácido desoxirribonucleico) durante extracción está relacionado principalmente con sus diferentes estructuras químicas y su funcionamiento inadecuado durante la extracción..

I. Diferencias en la estructura química.:

1. El ARN es una estructura monocatenaria., que es más inestable que la estructura bicatenaria del ADN.

2. Hidroxilo en el 2′ posición: La ribosa en las moléculas de ARN contiene un grupo hidroxilo. (-OH) a las 2′ posición, mientras que la desoxirribosa en el ADN tiene un átomo de hidrógeno en esta posición. Este grupo hidroxilo adicional hace que la molécula de ARN sea más inestable porque puede promover reacciones de hidrólisis espontáneas., lo que resulta en roturas de la cadena de ARN.

II. La influencia de la ARNasa en el sistema de extracción.:

1. ARNasa endógena: Existe en las células y puede continuar degradando el ARN incluso después de la lisis celular..

2. ARNasa exógena: Está ampliamente presente en el medio ambiente., como el aire, piel, y suministros de laboratorio (guantes, tubos de ensayo, etc.).

III. Operación experimental incorrecta:

1. Los reactivos e instrumentos utilizados no han sido tratados con DEPC. (dietilpirocarbonato) y no puede inactivar eficazmente las enzimas de ARN..

2. El inhibidor es ineficaz., o la dosis es insuficiente, y la actividad de las enzimas de ARN no se puede inhibir eficazmente.

3. Más muestras experimentales o temperaturas de homogeneización más altas conducen a una mayor actividad de la enzima ARN.

4. Cambios de pH y temperatura., especialmente en condiciones alcalinas, puede causar fácilmente que las bases de ARN se desaminen, resultando en roturas de cadena; Las altas temperaturas también pueden causar la degradación parcial o completa de las moléculas de ARN..

IV. ¿Qué se debe hacer para reducir la degradación del ARN?

Para reducir la degradación del ARN durante la extracción., es necesario tomar una serie de medidas, incluido el uso de suministros de laboratorio libres de ARNasa, operando a bajas temperaturas, usando estabilizadores de ARN, usando kits terminados, etc.. Estos métodos reducen eficazmente el riesgo de degradación del ARN y garantizan la obtención de muestras de ARN de alta calidad para análisis posteriores..

Introducción del proveedor

Shanghai Lingjun Biotecnología Co., Limitado.se estableció en 2016 que es un fabricante profesional de materiales biomagnéticos y reactivos de extracción de ácidos nucleicos..

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