Pourquoi l'ARN est-il plus facilement dégradé que l'ADN lors de l'extraction d'acide nucléique?

La raison pour laquelle l'ARN (acide ribonucléique) est plus facilement dégradé que l’ADN (acide désoxyribonucléique) pendant extraction est principalement lié à leurs différentes structures chimiques et à un mauvais fonctionnement lors de l’extraction.

je. Différences de structure chimique:

1. L'ARN est une structure simple brin, qui est plus instable que la structure double brin de l'ADN.

2. Hydroxyle au 2′ position: Le ribose dans les molécules d'ARN contient un groupe hydroxyle (-OH) au 2′ position, tandis que le désoxyribose dans l'ADN a un atome d'hydrogène à cette position. Ce groupe hydroxyle supplémentaire rend la molécule d'ARN plus instable car il peut favoriser des réactions d'hydrolyse spontanées., entraînant des ruptures de chaîne d’ARN.

II. L'influence de la RNAse dans le système d'extraction:

1. ARNase endogène: Il existe dans les cellules et peut continuer à dégrader l’ARN même après la lyse cellulaire.

2. ARNase exogène: Il est largement présent dans l'environnement, comme l'air, peau, et fournitures de laboratoire (gants, tubes à essai, etc.).

III. Mauvaise opération expérimentale:

1. Les réactifs et instruments utilisés n'ont pas été traités au DEPC (pyrocarbonate de diéthyle) et ne peut pas inactiver efficacement les enzymes ARN.

2. L'inhibiteur est inefficace, ou le dosage est insuffisant, et l'activité des enzymes ARN ne peut pas être efficacement inhibée.

3. Des échantillons plus expérimentaux ou des températures d'homogénéisation plus élevées conduisent à une activité accrue des enzymes ARN.

4. Changements de pH et de température, surtout dans des conditions alcalines, peut facilement provoquer la désamination des bases d’ARN, entraînant des ruptures de chaîne; des températures élevées peuvent également provoquer une dégradation partielle ou complète des molécules d'ARN.

IV. Que faut-il faire pour réduire la dégradation de l'ARN？

Afin de réduire la dégradation de l’ARN lors de l’extraction, une série de mesures doivent être prises, y compris l'utilisation de fournitures de laboratoire sans RNAse, fonctionnant à basse température, en utilisant des stabilisateurs d'ARN, en utilisant des kits finis, etc.. Ces méthodes réduisent efficacement le risque de dégradation de l'ARN et garantissent l'obtention d'échantillons d'ARN de haute qualité pour une analyse en aval..

Présentation du fournisseur

Société de biotechnologie Shanghai Lingjun., Ltd.a été établi en 2016 qui est un fabricant professionnel de matériaux biomagnétiques et de réactifs d'extraction d'acide nucléique.

Nous avons une riche expérience dans l'extraction et la purification des acides nucléiques, purification des protéines, séparation cellulaire, chimiluminescence et autres domaines techniques.

Nos produits sont largement utilisés dans de nombreux domaines, comme les tests médicaux, tests génétiques, recherche universitaire, sélection génétique, et ainsi de suite. Nous fournissons non seulement des produits, mais pouvons également entreprendre des OEM, ODM, et autres besoins. Si vous avez des besoins connexes, n'hésitez pas à nous contacter au sales01@lingjunbio.com.