Feidhmiú micreasféar polaistiréin i PCR digiteach

Mar an tríú glúin de PCR, Tá na buntáistí a bhaineann le cainníochtú iomlán ag PCR digiteach, riachtanas samplach íseal, íogaireacht ard, agus lamháltas le coscairí, agus úsáidtear go forleathan é chun sóchán géine a bhrath, athrú uimhreacha cóipe, miocrorgánaigh phataigineacha, agus barra géinmhodhnaithe. Is é an PCR digiteach ar an margadh go ginearálta Droplet Digiteach PCR (ddPCR) ionadaíocht ag Bio-Rad agus Chip Digital PCR (cdPCR) ionadaíocht ag Thermo Fisher; i.e., Roinneann Bith-Rad an córas aimplithe ina aonaid nana nó miocrón trí theicneolaíocht mhicrea-shreabhach i bhfoirm uisce-in-ola, agus roinneann Thermo Fisher an córas aimplithe ina aonaid nana nó miocrón trí theicneolaíocht mhicrea-shreabhach, agus roinneann Thermo Fisher an córas aimplithe ina aonaid nana nó miocrón trí theicneolaíocht mhicrea-shreabhach. aonaid mhicriméadar agus Thermo Fisher scarann ​​​​an córas aimplithe ina aonaid nana/micriméadar trí ghearradh fisiciúil. Is iad na bealaí teicneolaíochta seo is mó a úsáidtear le micrea-sreabhachaidic droplet Bith-Rad, a thairgeann buntáistí suntasacha miniaturization, réigiúnú, agus comhthreomhaireacht mar gheall ar a chumas micreasféar a chuimsiú, cealla, agus imoibrithe eile i micri-imoibreora nanoliter nó picoliter.

Is feithiclí membrane fo-mhiocrón iad eiseasóim (30-200 nm) secreted ag cealla agus tá faisnéis thábhachtach cosúil le próitéiní, RNA beag bídeach, agus DNA, a bhaineann go dlúth le bithóipsí leachta cliniciúla le haghaidh diagnóis galair agus tástáil prognóiseacha. Mar sin féin, is dúshlán mór é a mbeagmhéid chun eiseasóim a leithlisiú ó shreabháin choirp casta le tréchur agus íonacht ard. Pinning Zhou et al. molta struchtúr cainéal tonn droim ar ais ag baint úsáide as sreabhán viscoelastic agus polaiméirí bith-chomhoiriúnacha a chur leis [2] chun táimhe leaisteach a dhíriú agus a shórtáil de cháithníní submicron agus eiseasóim. Táirgeann an struchtúr cainéal tonn athchleachtach droim ar ais tréimhsiúil Déan sreabhadh tánaisteach microfluid a chuireann fócas microsphere chun cinn i gcomparáid le cainéal díreach trí mheán. Ag baint úsáide as ceithre mhéideanna éagsúla de sféar fomhicrón fluaraiseacha (1 µm, 500 nm, 300, agus 100 nm) chun staidéar a dhéanamh ar an iompar fócasach faoi choinníollacha éagsúla, bhain siad amach simplí, ard-thréchur, sórtáil saor ó lipéad ar eiseasóim le íonacht níos airde ná 92% agus téarnamh níos airde ná 81%. D’fhéadfadh an teicníc sórtála eiseasóim táimhe leaisteacha forbartha seo ardán a bhfuil gealladh fúthu a sholáthar le haghaidh staidéir bhitheolaíocha agus feidhmeanna cógaisíochta éagsúla a bhaineann le heacsasóim..

In ainneoin acmhainneacht mhór na n-iarratas seo, déantar imchochlú na micrisféar/cealla go hiomlán randamach, agus srianta ag dáileadh Poisson. Go teoiriciúil, níl an dóchúlacht go mbeidh braoinín ag cuimsiú micreasféar amháin níos mó ná 37%, cur amú líon mór micreasféar agus landairí braoiníní a mbíonn tréchur braite íseal mar thoradh air. Chun feabhas a chur ar úsáid microspheres nó cealla annamh, Úsáideann modhanna coitianta meán teoiriciúil (λT) < 0.1 na micrisféar/ceall in aghaidh an bhraoinín chun tiúchan na micrisféar a chuirtear i bhfeidhm a chinneadh, rud a fhágann go mbíonn ráta imchochlaithe an-íseal de mhicrispheres aonair, go hiondúil thíos 10%. Ag baint tairbhe as an líon gan teorainn braoin sa chóras braoiníní, is lú an tionchar atá ag dáileadh Poisson ar thomhaltas na samplaí agus ar an am measúnaithe nuair is beag líon na micrisféar/ceall atá le comhaireamh.

Tá raon leathan feidhmchlár ag imchochlú braoin de chealla aonair nó micreasféar polaistiréin i réimsí mar thástálacha digiteacha, seicheamh aonchealla, agus scagthástáil drugaí. Mar sin féin, déantar imchochlú na micrisféar a randamach go hiomlán ag srianta dáileacháin Poisson, agus is gnách nach mbíonn an dóchúlacht go teoiriciúil ann go ndéanfaí imchochlú aonmhicreasféar ach thart 10%. I mbrath digitithe ultra-ard-ilphléacsaithe nó i bhfeidhmchláir eile a éilíonn líon mór micreasféar a thomhas, tá líon na ndeighiltí ar gá iad a chomhaireamh thar a bheith ard, as a dtagann méadú mór ar líon na n-áireamh braoiníní neamhbhailí agus iomarcaíocht sonraí braite. Ar an gcúis seo, Dhear Xiaoyu Yue Droplet Socrú Ordaithe Bead (BOAD) córas mar bhealach chun teorainneacha dáileadh Poisson a bhriseadh [1].

Comhcheanglaíonn córas BOAD sreabhadh truaill go cliste, vortex Déin, agus cainéal sreafa comhbhrú chun an socrú ordaithe den chéad uair riamh de mhicrispheres a bhaint amach agus a chumasaíonn an socrú ordaithe is tapúla de mhicrispheres sa struchtúr is giorra, le héifeachtacht aon-bead iamh suas go dtí thart 86%. Tá sé léirithe go hiomlán ag feidhmchláir bhreise chun micreasféir códaithe agus micreasféir polaistiréin mhaighnéadacha spriocdhírithe IL-10 a chumasú go bhfuil braite digiteach ultra-ard-ilphléacsaithe bunaithe ar mhicrisféir.. Mar thoradh air sin, tá córas BOAD an-dearfach maidir le go leor feidhmchlár a éilíonn rátaí arda imchlúite aon-cháithníní laistigh d’urranna teoranta, amhail bith-thástálacha digiteacha ultra-ard-ilphléacsacha, anailís aonchealla, scagthástáil drugaí, agus braite eisíomach aonair.

I ngach iarratas, imchochlú braoin-bhunaithe na gcáithníní (cealla agus micreasféir) ardán idéalach é chun anailís aonchealla a dhéanamh ar athchlárú ceallach, fionnachtain drugaí, agus braite secretion mar gheall ar a trastomhais imoibreora aonfhoirmeach beag, feiniméin sreabhadh micreascála uathúla, agus líon neamhtheoranta aonad leithlisithe, agus ceadaíonn sé freisin do bhrath digiteach ultrasensitive bunaithe ar coirníní ar phróitéiní íseal-raidhse, eiseasóim, agus bithmhóilíní eile.

Tagairt：

[1] Yue, X., Fang, X., Ghrian, T., Déan, J., Cuang, X., Guo, C., Wang, Y., Gu, H. agus Xu, H. 2022. Briseadh tríd an Dáileadh Poisson: Córas micrea-sreabhach braoiníní ardéifeachtúlachta dlúth le haghaidh inchamhlaithe coirníní singil agus brath imdhíon-mheasúnú digiteach. Bithbhraiteoirí agus Bithleictreonaic. 211, (Meán Fómhair. 2022), 114384. DOI:https://doi.org/10.1016/j.bios.2022.114384.

[2] Zhou, Y., Maith, Z., Tayebi, M. agus Ai, Y. 2019. Díriú ar Cháithníní Fomhicrónacha agus Sórtáil Eisceasóim de réir Struchtúir Thoncha Mhicchainéil laistigh de Sreabhán Viscoelastic. Ceimic Anailíseach. 91, 7 (Aibreán. 2019), 4577–4584. DOI:https://doi.org/10.1021/acs.analchem.8b05749.

Soláthraí

Shanghai Lingjun Biteicneolaíocht Co., Teo.bunaíodh i 2016 atá ina mhonaróir gairmiúil d'ábhair bithmhaighnéadacha agus imoibrithe eastóscadh aigéid núicléacha.

Tá taithí shaibhir againn in eastóscadh agus íonú aigéad núicléasach, íonú próitéine, scaradh cille, ceimileacanacht, agus réimsí teicniúla eile.

Úsáidtear ár gcuid táirgí go forleathan i go leor réimsí, mar thástáil leighis, tástáil ghéiniteach, taighde ollscoile, pórú géiniteach, agus mar sin de. Ní chuirimid ar fáil ach táirgí ach freisin is féidir tabhairt faoi OEM, ODM, agus riachtanais eile. Má tá riachtanas gaolmhar agat, bíodh leisce ort teagmháil a dhéanamh linn agdíolacháin01@lingjunbio.com.