Estrazione dell'acido nucleico mediante il metodo delle sfere magnetiche:Rivelare i componenti e le funzioni dei reagenti

I componenti e le funzioni dei vari reagenti per l'estrazione del DNA con il metodo delle biglie magnetiche sono i seguenti.

1. Tampone di lisi

(1) Scheda di sicurezza(Sodio dodecil solfato): Un tensioattivo anionico che distrugge le strutture della membrana cellulare, rilasciando il contenuto cellulare. Può rompere i legami idrogeno tra e all'interno delle molecole, causando lo spiegamento molecolare e distruggendo le strutture secondarie e terziarie delle proteine, portando alla denaturazione delle proteine. In condizioni di temperatura elevata, può interrompere il legame tra proteine ​​e acidi nucleici, favorendo il rilascio di acidi nucleici.

(2) Tritone X-100(Polietilene glicole ottilfenil etere): Un tensioattivo non ionico stabile in acqua e non facilmente dissociato, e non è influenzato in modo significativo dai sali inorganici elettrolitici forti. La sua funzione è quella di formare complessi solubili con lipidi come i fosfolipidi nelle membrane biologiche; la sua estremità idrofobica può anche formare complessi con le regioni idrofobiche delle proteine ​​di membrana, sciogliendosi nella soluzione. Viene utilizzato principalmente in esperimenti biologici come la lisi cellulare e l'estrazione delle proteine.

(3) Proteinasi K: Un potente enzima che dissolve le proteine ​​isolato dalla Candida albicans, ad elevata attività specifica, è un reagente chiave per l'estrazione dell'acido nucleico. La sua funzione primaria è quella di idrolizzare enzimaticamente gli istoni legati agli acidi nucleici, permettendo agli acidi nucleici di essere liberi nella soluzione.

(4) Guanidina tiocianato(GITC): Un potente denaturante proteico in grado di dissolvere rapidamente le proteine, distruggere le strutture cellulari, separare gli acidi nucleici dalle proteine, e inibiscono l'attività delle nucleasi, proteggere gli acidi nucleici dalla degradazione.

(5) EDTA(Acido etilendiamminotetraacetico): Un agente chelante in grado di chelare gli ioni metallici come calcio e magnesio nella soluzione, inibendo l'attività delle nucleasi che dipendono dagli ioni metallici, e impedendo la degradazione degli acidi nucleici.

(6) Tris-HCl: Il tampone mantiene la stabilità relativa del pH del tampone di lisi, fornire un ambiente acido o alcalino adatto durante il processo di estrazione dell'acido nucleico.

2. Buffer vincolante

(1) Sali ad alta concentrazione(come NaCl, MgCl2, ecc.): Promuovere il legame degli acidi nucleici alla superficie delle sfere magnetiche. Gli ioni di sale possono neutralizzare le cariche negative degli acidi nucleici in un ambiente ad alto contenuto di sale, riducendo la repulsione elettrostatica tra acidi nucleici e sfere magnetiche, rendendo gli acidi nucleici più facilmente adsorbiti sulla superficie delle sfere magnetiche.

(2) Perline magnetiche: Modificato in superficie con gruppi attivi specifici, come i gruppi silanolo o carbossilico, che può legarsi specificamente agli acidi nucleici tramite legami idrogeno, interazioni elettrostatiche, ecc., ottenendo l'adsorbimento e l'arricchimento degli acidi nucleici. I tipi comuni includono sfere magnetiche a base di silice superparamagnetiche e sfere magnetiche carbossiliche.

3. Tampone di lavaggio

(1) Sali a bassa concentrazione(come NaCl): Mantenere un certo ambiente ionico, che aiuta a rimuovere le impurità senza influenzare il legame degli acidi nucleici alle sfere magnetiche.

(2) Etanolo: Comunemente utilizzato nella fase di lavaggio, può rimuovere le proteine ​​residue, sali, e altre impurità, rendendo gli acidi nucleici più puri. L'etanolo riduce la polarità della soluzione, rendendo le impurità più facilmente separabili dagli acidi nucleici, e aiuta anche a stabilizzare il legame degli acidi nucleici sulla superficie delle sfere magnetiche.

(3) Tampone di eluizione

(4) Tampone a basso contenuto di sale o senza sale(come il buffer TE, Tampone Tris-HCl, ecc.): Può interrompere la forza legante tra gli acidi nucleici e le sfere magnetiche, consentendo l'eluizione degli acidi nucleici dalla superficie delle sfere magnetiche. Questi tamponi sono generalmente debolmente alcalini, che può neutralizzare le cariche negative sulla superficie delle perle magnetiche, riducendo l'interazione elettrostatica tra acidi nucleici e sfere magnetiche, rilasciando così gli acidi nucleici nella soluzione, e ottenere l'eluizione e la purificazione degli acidi nucleici.

In sintesi, il metodo con sfere magnetiche per l'estrazione degli acidi nucleici consente di ottenere un'estrazione e una purificazione efficienti degli acidi nucleici mediante componenti dei reagenti attentamente progettati e procedure operative ottimizzate. Questa tecnologia non solo migliora l'efficienza sperimentale ma garantisce anche la qualità degli acidi nucleici, fornendo una solida base per la successiva ricerca di biologia molecolare e la diagnosi clinica.

Fornitore

Shanghai Lingjun Biotecnologia Co., Ltd.è stato fondato nel 2016 che è un produttore professionale di materiali biomagnetici e reagenti per l'estrazione degli acidi nucleici.

Abbiamo una ricca esperienza nell'estrazione e purificazione degli acidi nucleici, purificazione delle proteine, separazione cellulare, chemiluminescenza, e altri campi tecnici.

I nostri prodotti sono ampiamente utilizzati in molti campi, come i test medici, test genetici, ricerca universitaria, allevamento genetico, e così via. Non solo forniamo prodotti, ma possiamo anche intraprendere l'OEM, ODM, e altre esigenze. Se hai un'esigenza correlata, non esitate a contattarci asales01@lingjunbio.com.