Pengekstrakan Asid Nukleik dengan Kaedah Manik Magnet:Mendedahkan Komponen dan Fungsi Reagen

Komponen dan fungsi pelbagai reagen untuk mengekstrak DNA dengan kaedah manik magnet adalah seperti berikut.

1. Penampan Lysis

(1) SDS(Natrium Dodecyl Sulfate): Surfaktan anionik yang mengganggu struktur membran sel, melepaskan kandungan selular. Ia boleh memecahkan ikatan hidrogen antara dan dalam molekul, menyebabkan pembongkaran molekul dan memusnahkan struktur sekunder dan tertier protein, membawa kepada denaturasi protein. Di bawah keadaan suhu tinggi, ia boleh mengganggu pengikatan antara protein dan asid nukleik, menggalakkan pembebasan asid nukleik.

(2) Triton X-100(Polietilena Glikol Octylphenyl Ether): Surfaktan bukan ionik yang stabil dalam air dan tidak mudah tercerai, dan tidak terjejas dengan ketara oleh garam tak organik elektrolit yang kuat. Fungsinya adalah untuk membentuk kompleks larut dengan lipid seperti fosfolipid dalam membran biologi; hujung hidrofobiknya juga boleh membentuk kompleks dengan kawasan hidrofobik protein membran, larut dalam larutan. Ia digunakan terutamanya dalam eksperimen biologi seperti lisis sel dan pengekstrakan protein.

(3) Proteinase K: Enzim pelarut protein yang kuat diasingkan daripada Candida albicans, dengan aktiviti spesifik yang tinggi, ia adalah reagen utama untuk pengekstrakan asid nukleik. Fungsi utamanya ialah menghidrolisis histon secara enzimatik yang terikat kepada asid nukleik, membenarkan asid nukleik bebas dalam larutan.

(4) Guanidine Tiosianat(GITC): Denaturan protein yang kuat yang boleh melarutkan protein dengan cepat, mengganggu struktur sel, memisahkan asid nukleik daripada protein, dan menghalang aktiviti nuklease, melindungi asid nukleik daripada degradasi.

(5) EDTA(Asid Ethylenediaminetetraacetic): Agen pengkelat yang boleh mengkelat ion logam seperti kalsium dan magnesium dalam larutan, menghalang aktiviti nuklease yang bergantung kepada ion logam, dan menghalang asid nukleik daripada terdegradasi.

(6) Tris-HCl: Penampan mengekalkan kestabilan relatif pH penimbal lisis, menyediakan persekitaran berasid atau beralkali yang sesuai semasa proses pengekstrakan asid nukleik.

2. Penampan Mengikat

(1) Garam Kepekatan Tinggi(seperti NaCl, MgCl2, dll.): Menggalakkan pengikatan asid nukleik pada permukaan manik magnet. Ion garam boleh meneutralkan cas negatif asid nukleik dalam persekitaran garam tinggi, mengurangkan tolakan elektrostatik antara asid nukleik dan manik magnet, menjadikan asid nukleik lebih mudah diserap ke permukaan manik magnet.

(2) Manik Magnet: Diubah suai permukaan dengan kumpulan aktif tertentu, seperti kumpulan silanol atau karboksil, yang secara khusus boleh mengikat asid nukleik melalui ikatan hidrogen, interaksi elektrostatik, dll., mencapai penjerapan dan pengayaan asid nukleik. Jenis biasa termasuk manik magnet berasaskan silika superparamagnetik dan manik magnet karboksil.

3. Penimbal Basuh

(1) Garam Kepekatan Rendah(seperti NaCl): Mengekalkan persekitaran ionik tertentu, yang membantu menghilangkan kekotoran tanpa menjejaskan pengikatan asid nukleik pada manik magnet.

(2) Etanol: Biasa digunakan dalam langkah mencuci, ia boleh mengeluarkan sisa protein, garam, dan kekotoran lain, menjadikan asid nukleik lebih tulen. Etanol mengurangkan kekutuban larutan, menjadikan bendasing lebih mudah dipisahkan daripada asid nukleik, dan juga membantu menstabilkan pengikatan asid nukleik pada permukaan manik magnet.

(3) Penampan Elusi

(4) Rendah Garam atau Penampan Tanpa Garam(seperti TE Buffer, Penampan Tris-HCl, dll.): Boleh mengganggu daya ikatan antara asid nukleik dan manik magnet, membenarkan asid nukleik dicairkan daripada permukaan manik magnet. Penampan ini biasanya beralkali lemah, yang boleh meneutralkan cas negatif pada permukaan manik magnet, mengurangkan interaksi elektrostatik antara asid nukleik dan manik magnet, dengan itu membebaskan asid nukleik ke dalam larutan, dan mencapai elusi dan penulenan asid nukleik.

Secara ringkasnya, kaedah manik magnet untuk pengekstrakan asid nukleik mencapai pengekstrakan dan penulenan asid nukleik yang cekap dengan komponen reagen yang direka dengan teliti dan prosedur operasi yang dioptimumkan. Teknologi ini bukan sahaja meningkatkan kecekapan eksperimen tetapi juga memastikan kualiti asid nukleik, menyediakan asas yang kukuh untuk penyelidikan biologi molekul seterusnya dan diagnosis klinikal.

Pembekal

Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd.ditubuhkan pada 2016 yang merupakan pengilang profesional bahan biomagnet dan reagen pengekstrakan asid nukleik.

Kami mempunyai pengalaman yang kaya dalam pengekstrakan dan penulenan asid nukleik, penulenan protein, pemisahan sel, chemiluminescence, dan bidang teknikal yang lain.

Produk kami digunakan secara meluas dalam pelbagai bidang, seperti ujian perubatan, ujian genetik, penyelidikan universiti, pembiakan genetik, dan seterusnya. Kami bukan sahaja menyediakan produk tetapi juga boleh menjalankan OEM, ODM, dan keperluan lain. Jika anda mempunyai keperluan yang berkaitan, sila hubungi kami disales01@lingjunbio.com.