エンドトキシンの一般的な検出方法

プラスミド内のエンドトキシン含有量を検出するには、次の方法が一般的に使用されます。:

1, カブトガニ試薬発色法:

カブトガニ試薬を用いた検出法です (凍結乾燥されたアメーバ細胞ライセート, LAL), カブトガニ試薬にはC因子が含まれています, Bファクター, コアグラーゼタンパク質, コアグラーゼタンパク質, およびその他のコンポーネント, 適切な条件下で, エンドトキシンはC因子を活性化します, 一連の酵素反応を引き起こす, そして最終的にはコアグラーゼタンパク質を活性化してコアグラーゼ酵素を形成します, 発色剤を分解し、黄色のp-ニトロアニリンを生成します。 (pNA, λmax = 405nm). pNAの生成はエンドトキシン濃度に比例するため、サンプル中のエンドトキシン濃度を定量的に検出できます。.

2， エンドポイント法変形細胞ライセート検出キット:

タンパク質中のエンドトキシン含有量を正確に検出できるキットです。, ペプチド, または抗体サンプル. エンドトキシンの存在下で発生する呈色信号により、サンプル中のエンドトキシン濃度を測定します。, 酵素マーカー上で405nmで検出可能. 標準曲線は、E を使用して作成されます。. 各キットに含まれる大腸菌エンドトキシン標準品, エンドトキシンレベルは以下の範囲内で計算されます。 16-36 分 (まで 0.01 EU/mL) 希望の感度に応じて.

3， ダイナミック発色方式:

この方法では, LPS (リポ多糖類) カブトガニ試薬中のプロ酵素を活性化します, 発色基質の発色を触媒する, 黄色の生成物が形成されます. 黄色の増加は、LPS の濃度と正の相関があります。.

4, 測光法:

測光法は濁度法と発色基質法に分かれます。. 比濁法は、カブトガニ試薬とエンドトキシンの反応過程の濁度変化を検出し、エンドトキシン含有量を測定する方法です。. 発色基質法は、カブトガニ試薬の検出とコアグラーゼのエンドトキシン反応過程を利用して、特定の基質から発色団の量を放出させ、エンドトキシンの量を測定します。.

5, ゲル半定量検査:

反応の終点での濃度を測定することにより、試験材料中のエンドトキシンの量を定量します。. この方法では、希釈した試験品中のエンドトキシン含有量を定量化し、試験品が指定されたエンドトキシン制限値を満たしているかどうかを判定します。.

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