De vanlige påvisningsmetodene for endotoksin

Følgende metoder brukes ofte for å påvise endotoksininnhold i plasmider:

1, Hesteskokrabbe-reagensfargeutviklingsmetode:

Dette er en deteksjonsmetode basert på hesteskokrabbe-reagenset (Lyofilisert amebocyttlysat, LAL), hesteskokrabbereagens inneholder C-faktoren, B faktor, koagulaseproteiner, koagulaseproteiner, og andre komponenter, under passende forhold, endotoksin aktiverer C-faktoren, utløser en rekke enzymatiske reaksjoner, og til slutt aktivere koagulaseproteinene for å danne koagulaseenzymet, som bryter ned det fargefremkallende middelet og produserer gult p-nitroanilin (pNA, λmax = 405nm). pNA-generering er proporsjonal med konsentrasjonen av endotoksin slik at endotoksinkonsentrasjonen i prøven kan påvises kvantitativt.

2， Endepunktmetode deformert cellelysatdeteksjonssett:

Dette settet kan nøyaktig oppdage endotoksininnhold i protein, peptid, eller antistoffprøver. Endotoksinkonsentrasjonen i prøven måles av fargesignalet generert i nærvær av endotoksin, som kan påvises ved 405nm på en enzymmarkør. En standardkurve lages ved hjelp av E. coli endotoksinstandard inkludert i hvert sett, og endotoksinnivået beregnes innenfor 16-36 minutter (ned til 0.01 EU/ml) avhengig av ønsket følsomhet.

3， Dynamisk fargeutviklingsmetode:

I denne metoden, LPS (lipopolysakkarid) aktiverer proenzymet i hesteskokrabbereagenset, katalyserer fargeutviklingen til det kromogene substratet, og danner et gult produkt. Økningen i gulfarging er positivt korrelert med konsentrasjonen av LPS.

4, fotometrisk metode:

Den fotometriske metoden er delt inn i turbiditets- og kromogene substratmetoder. Den turbidimetriske metoden benytter påvisning av hesteskokrabbereagens og endotoksinreaksjonsprosessen turbiditetsendringer og bestemmelse av endotoksininnhold. Den kromogene substratmetoden bruker påvisning av hesteskokrabbereagens og endotoksinreaksjonsprosess av koagulase for å få det spesifikke substratet til å frigjøre mengden kromoforer og bestemme mengden endotoksin.

5, Gel semi-kvantitativ test:

Kvantifiser mengden endotoksin i testmaterialet ved å bestemme konsentrasjonen ved reaksjonens endepunkt. Denne metoden kvantifiserer endotoksininnholdet i den fortynnede testartikkelen og bestemmer om testartikkelen oppfyller de spesifiserte endotoksingrensene.

Leverandør

Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd.ble etablert i 2016 som er en profesjonell produsent av biomagnetiske materialer og nukleinsyreekstraksjonsreagenser.

Vi har rik erfaring innen utvinning og rensing av nukleinsyre, proteinrensing, celleseparasjon, kjemiluminescens og andre tekniske felt.

Våre produkter er mye brukt på mange felt, som medisinsk testing, genetisk testing, universitetsforskning, genetisk avl, og så videre. Vi leverer ikke bare produkter, men kan også påta oss OEM, ODM, og andre behov. Hvis du har et relatert behov, ta gjerne kontakt med oss ​​påsales01@lingjunbio.com.