Les méthodes courantes de détection des endotoxines

Les méthodes suivantes sont couramment utilisées pour détecter la teneur en endotoxines dans les plasmides:

1, Méthode de développement de la couleur du réactif limule:

Il s'agit d'une méthode de détection basée sur le réactif du limule. (Lysat d'amibocytes lyophilisé, LAL), le réactif du limule contient le facteur C, Facteur B, protéines coagulases, protéines coagulases, et d'autres composants, dans les conditions appropriées, l'endotoxine active le facteur C, déclencher une série de réactions enzymatiques, et finalement activer les protéines coagulase pour former l'enzyme coagulase, qui décompose l'agent révélateur de couleur et produit de la p-nitroaniline jaune (pNA, λmax = 405 nm). La génération de pNA est proportionnelle à la concentration d'endotoxine afin que la concentration d'endotoxine dans l'échantillon puisse être détectée quantitativement..

2， Kit de détection de lysat de cellules déformées par méthode de point final:

Ce kit peut détecter avec précision la teneur en endotoxines des protéines, peptide, ou des échantillons d'anticorps. La concentration d'endotoxine dans l'échantillon est mesurée par le signal de coloration généré en présence d'endotoxine, qui peut être détecté à 405 nm sur un marqueur enzymatique. Une courbe standard est créée à l'aide du E. étalon d'endotoxine coli inclus dans chaque kit, et le niveau d'endotoxine est calculé dans 16-36 minutes (jusqu'à 0.01 UE/mL) en fonction de la sensibilité souhaitée.

3， Méthode de développement dynamique des couleurs:

Dans cette méthode, LPS (lipopolysaccharide) active la proenzyme dans le réactif du limule, catalyser le développement de la couleur du substrat chromogène, et former un produit jaune. L’augmentation de la coloration jaune est positivement corrélée à la concentration de LPS.

4, méthode photométrique:

La méthode photométrique est divisée en méthodes de turbidité et de substrat chromogénique.. La méthode turbidimétrique utilise la détection des changements de turbidité du réactif du limule et du processus de réaction des endotoxines et la détermination de la teneur en endotoxines.. La méthode du substrat chromogénique utilise la détection du réactif de limule et le processus de réaction de l'endotoxine de la coagulase pour que le substrat spécifique libère la quantité de chromophores et détermine la quantité d'endotoxine..

5, Gel semi-quantitative test:

Quantifier la quantité d’endotoxine dans le matériau d’essai en déterminant la concentration au point final de la réaction. Cette méthode quantifie la teneur en endotoxines dans l'article de test dilué et détermine si l'article de test répond aux limites d'endotoxines spécifiées..

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Société de biotechnologie Shanghai Lingjun., Ltd.a été établi en 2016 qui est un fabricant professionnel de matériaux biomagnétiques et de réactifs d'extraction d'acide nucléique.

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