चुंबकीय मनका विधि न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण में सामान्य समस्याएं

न्यूक्लिक एसिड का पता लगाने की प्रक्रिया में, इसकी उच्च पहचान संवेदनशीलता के कारण चुंबकीय मनका निष्कर्षण का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है, स्वचालित संचालन, उच्च थ्रूपुट, सुरक्षा, और शीघ्रता. तथापि, न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण की प्रक्रिया में, ध्यान देने योग्य और भी विवरण हैं; एक त्रुटि परिणाम की विफलता का कारण बनेगी; कुछ सामान्य समस्याओं और उत्तरों को व्यवस्थित करने में आपकी सहायता के लिए निम्नलिखित. मुझे आशा है कि आप मददगार होंगे.

क्या चुंबकीय मोतियों की मात्रा बढ़ाकर न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण की दक्षता में सुधार किया जा सकता है?

जब निष्कर्षण परिणाम अच्छा नहीं होता है, कुछ लोग सोच सकते हैं कि चुंबकीय मोतियों की खुराक बढ़ाने से अधिक न्यूक्लिक एसिड अवशोषित हो सकते हैं और न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण की मात्रा में सुधार हो सकता है, लेकिन वास्तव में, इस पद्धति के उद्देश्य को प्राप्त करना आसान नहीं है.

चुंबकीय मोतियों की अत्यधिक खुराक के परिणामस्वरूप प्रत्येक चरण में समाधान प्रणाली में समान रूप से फैलने में असमर्थता होगी, उनके फैलाव को कम करने और अपूर्ण सोखने की ओर ले जाता है, कपड़े धोने, और निक्षालन प्रक्रियाएँ. अत्यधिक मात्रा में चुंबकीय मोती भी अधिक अशुद्धियों को सोख लेंगे, और चुंबकीय मोतियों की सतह पर न्यूक्लिक एसिड बाइंडिंग साइटों की अनुपस्थिति अशुद्धियों के बाइंडिंग के लिए अधिक अवसर प्रदान करेगी. सामान्य तौर पर, चुंबकीय मनका विधि न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण किट में दिए गए चुंबकीय मोतियों की मात्रा सामान्य अनुप्रयोग परिदृश्यों को पूरा करने के लिए पर्याप्त है; यदि आप कम न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण उपज की समस्या का सामना करते हैं, आपको क्लीवेज और बाइंडिंग पर पूरा ध्यान देने की जरूरत है, सफाई और निक्षालन प्रक्रिया.

न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण के दौरान न्यूक्लिक एसिड क्षरण से कैसे बचें?

प्रायोगिक परिणामों को प्रभावित करने वाले एग्लोमेरेट्स के अवशेषों से बचने के लिए प्रत्येक चरण में पर्याप्त मिश्रण एकरूपता पर ध्यान देना चाहिए; निक्षालन में, बहुत लंबा या बहुत अधिक तापमान, न्यूक्लिक एसिड का क्षरण हो सकता है; नमूनों को याद रखें कि बार-बार जमना और पिघलना न हो, निकाले गए नमूनों को सही तापमान पर रखने का ध्यान रखना चाहिए, जहां तक ​​संभव हो दीर्घकालिक संरक्षण -80 ℃.

नमूना विश्लेषण प्रभाव अच्छा नहीं है, क्या हम लाइसिस प्रभाव को बेहतर बनाने और निष्कर्षण प्रभाव को बढ़ाने के लिए उपयोग की जाने वाली लाइसेट की मात्रा बढ़ा सकते हैं?

चुंबकीय मनका विधि के लिए, तरल के आयतन में प्रत्येक वृद्धि से चुंबकीय मोतियों के टकराने की संभावना कम हो जाती है, जबकि चुंबकीय मोतियों के टकराने की संभावना कम होने से सोखने की दर में उल्लेखनीय कमी आएगी. तो बहुत बार, हालाँकि लसीका समाधान और धुलाई समाधान को बढ़ाना वास्तव में लसीका और धुलाई को बढ़ाने में भूमिका निभा सकता है, चुंबकीय मनका निष्कर्षण का मूल न्यूक्लिक एसिड के चुंबकीय मनका सोखने की दक्षता है, चुंबकीय मनका टकराव की दक्षता की गारंटी नहीं दे सकता, न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण की दक्षता की गारंटी नहीं दे सकता, इसलिए निष्कर्षण प्रभाव को बेहतर बनाने के लिए केवल अभिकर्मकों की मात्रा बढ़ाना जरूरी नहीं कि पूरी तरह से प्रभावी हो.

न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण की शुद्धता अधिक नहीं है, प्रोटीन या नमक के अवशेष हैं, क्या अधिक बार सफाई करना बेहतर है??

न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण की शुद्धता अधिक नहीं है, एक या दो बार सफाई की संख्या बढ़ाना उचित हो सकता है. यदि सफाई की संख्या बहुत अधिक है, इससे सफाई प्रक्रिया में न्यूक्लिक एसिड हानि की मात्रा बढ़ जाएगी. सामान्य तौर पर, सफ़ाई के समय की संख्या 2-4 समय उपयुक्त है.

क्या निकाले गए नमूने की मात्रा बढ़ाकर निष्कर्षण प्रभाव को बढ़ाना संभव है??

इस सीमा के भीतर कि नमूने में न्यूक्लिक एसिड की मात्रा अधिक है और इसे लाइसेट द्वारा पूरी तरह से साफ किया जा सकता है, नमूना मात्रा बढ़ाने से निष्कर्षण प्रभाव बढ़ सकता है, इसके विपरीत, यदि लाइसेट अपर्याप्त है और नमूना मात्रा बहुत अधिक है, यह दरार प्रभाव को प्रभावित कर सकता है, जिससे निष्कर्षण की गुणवत्ता में कमी आ सकती है. तथापि, कम न्यूक्लिक एसिड सामग्री वाले नमूनों के लिए, नमूना मात्रा बढ़ाने से इसके बजाय अधिक अशुद्धियाँ आएंगी और अंतिम न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण की गुणवत्ता कम हो जाएगी. ऐसे नमूनों के लिए, निष्कर्षण शुरू करने से पहले पूर्व-उपचार में संवर्धन या एकाग्रता चरण से गुजरने की सिफारिश की जाती है.

चुंबकीय मोतियों का प्रभाव क्यों होता है?, जो मूलतः बहुत अच्छा था, किट बदलने के बाद कम हो गया?

चुंबकीय मोती कई प्रकार के होते हैं, विभिन्न कण आकार, अलग-अलग फैलाव, विभिन्न चुंबकीय प्रतिक्रिया समय, विभिन्न एनकैप्सुलेशन बेस मैट्रिक्स, विभिन्न बाहरी परत संशोधन कार्यात्मक समूह, विभिन्न एनकैप्सुलेशन घनत्व, विभिन्न कार्यात्मक समूह भुजा की लंबाई, जिससे चुंबकीय मोतियों की विशेषताओं में बड़ा अंतर आएगा.

इसलिए अलग-अलग चुंबकीय मोतियों के लिए अनुकूलित प्रयोग और प्रणालियाँ भी अलग-अलग हैं. मूल प्रणाली में अच्छा प्रदर्शन करने वाले चुंबकीय मोती स्क्रीनिंग और विधि मानचित्रण की एक श्रृंखला के बाद सबसे अच्छा संयोजन हैं. यदि चुंबकीय मोतियों को एक नई प्रणाली में बदल दिया जाए, निष्कर्षण प्रभाव में कमी देखना सामान्य है. ज्यादातर मामलों में, चुंबकीय मोतियों और अभिकर्मक प्रणालियों को समायोजन के साथ एक निश्चित समय लगाना पड़ता है.

निष्कर्षण प्रभाव एक निश्चित किट जितना अच्छा नहीं है; क्या चुंबकीय मोती खराब हैं??

कई उपयोगकर्ता पहले से ही परिपक्व अभिकर्मक प्रणाली में चुंबकीय मोतियों की स्क्रीनिंग की प्रक्रिया में हैं, चुंबकीय मोतियों के प्रतिस्थापन की बस समान मात्रा, चुंबकीय मोतियों के प्रभाव की तुलना करने के लिए उपयोग किया जाता है. यह निष्कर्ष निकालना आसान है कि अमुक मनके का प्रभाव अच्छा नहीं है, लेकिन वास्तव में, क्योंकि अलग-अलग मोती अलग-अलग प्रणालियों और खुराकों के लिए उपयुक्त होते हैं, बेहतर निष्कर्षण परिणाम प्राप्त करने के लिए अक्सर समायोजन की आवश्यकता होती है.

आपूर्तिकर्ता परिचय

शंघाई लिंगजुन बायोटेक्नोलॉजी कंपनी, लिमिटेड. में स्थापित किया गया था 2016 जो बायोमैग्नेटिक सामग्रियों और न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण अभिकर्मकों का एक पेशेवर निर्माता है.

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