Problèmes courants dans l’extraction d’acide nucléique par méthode de billes magnétiques

En cours de détection d'acide nucléique, l'extraction par billes magnétiques est largement utilisée en raison de sa sensibilité de détection élevée, opération automatisable, haut débit, sécurité, et rapidité. Cependant, en cours d'extraction d'acide nucléique, il y a plus de détails auxquels il faut prêter attention; une erreur entraînera l'échec des résultats; ce qui suit pour vous aider à organiser certains problèmes courants et leurs réponses. J'espère que vous serez utile.

L'efficacité de l'extraction des acides nucléiques peut-elle être améliorée en augmentant la quantité de billes magnétiques?

Lorsque le résultat de l'extraction n'est pas bon, Certaines personnes peuvent penser qu'augmenter le dosage des billes magnétiques peut absorber plus d'acides nucléiques et améliorer la quantité d'acide nucléique extraite., mais en fait, il n'est pas facile d'atteindre le but de cette méthode.

Un dosage excessif de billes magnétiques entraînera leur incapacité à être dispersées uniformément dans le système de solution à chaque étape., réduisant leur dispersibilité et conduisant à une adsorption incomplète, lavage, et processus d'élution. Des quantités excessives de billes magnétiques adsorberont également plus d'impuretés, et l'absence de sites de liaison aux acides nucléiques à la surface des billes magnétiques offrira plus de possibilités de liaison des impuretés. En général, la quantité de billes magnétiques fournie dans le kit d'extraction d'acide nucléique par méthode de billes magnétiques est suffisante pour répondre aux scénarios d'application courants; si vous rencontrez le problème du faible rendement d'extraction des acides nucléiques, vous devez prêter pleinement attention au clivage et à la reliure, processus de nettoyage et d'élution.

Comment éviter la dégradation des acides nucléiques lors de l'extraction des acides nucléiques?

Chaque étape doit prêter attention à une uniformité de mélange adéquate pour éviter que les résidus d'agglomérats n'affectent les résultats expérimentaux; dans l'élution, trop longtemps ou température trop élevée, l'acide nucléique peut être dégradé; les échantillons n'oubliez pas de ne pas procéder à des congélations et décongélations répétées, les échantillons extraits doivent veiller à les conserver à la bonne température, conservation à long terme autant que possible -80 ℃.

L'effet de lyse de l'échantillon n'est pas bon, pouvons-nous augmenter la quantité de lysat utilisée pour améliorer l'effet de lyse et renforcer l'effet d'extraction?

Pour la méthode des billes magnétiques, chaque augmentation du volume du liquide réduit le risque de collision des billes magnétiques, tout en réduisant le risque de collision des billes magnétiques, cela entraînera une diminution significative du taux d'adsorption. Alors très souvent, bien que l'augmentation de la solution de lyse et de la solution de lavage puisse effectivement jouer un rôle dans l'amélioration de la lyse et du lavage, le cœur de l’extraction par billes magnétiques est l’efficacité de l’adsorption de l’acide nucléique par billes magnétiques, ne peut pas garantir l'efficacité de la collision des billes magnétiques n'est pas en mesure de garantir l'efficacité de l'extraction des acides nucléiques, donc simplement augmenter la quantité de réactifs pour améliorer l'effet d'extraction n'est pas forcément complètement efficace.

La pureté de l'extraction des acides nucléiques n'est pas élevée, il y a des résidus de protéines ou de sel, est-il préférable de nettoyer plus de fois?

La pureté de l'extraction des acides nucléiques n'est pas élevée, peut être approprié d'augmenter le nombre de fois un ou deux nettoyages. Si le nombre de nettoyages est trop élevé, cela augmentera la quantité de perte d'acide nucléique dans le processus de nettoyage. En général, le nombre de fois de nettoyage dans 2-4 les horaires sont appropriés.

Est-il possible d'améliorer l'effet d'extraction en augmentant la quantité d'échantillon extrait?

Dans la plage où l'échantillon a une teneur élevée en acide nucléique et peut être entièrement clivé par le lysat, augmenter le volume de l'échantillon peut augmenter l'effet d'extraction, au contraire, si le lysat est insuffisant et le volume de l'échantillon est trop important, cela peut affecter l'effet de clivage, ce qui peut conduire à une diminution de la qualité de l’extraction. Cependant, pour les échantillons à faible teneur en acides nucléiques, augmenter le volume de l'échantillon introduira plutôt plus d'impuretés et réduira la qualité de l'extraction finale de l'acide nucléique. Pour de tels échantillons, il est recommandé de passer par l'étape d'enrichissement ou de concentration dans le prétraitement avant de commencer l'extraction.

Pourquoi l'effet des billes magnétiques, ce qui était à l'origine très bien, réduit après changement d'un kit?

Il existe de nombreux types de billes magnétiques, taille de particule différente, dispersion différente, temps de réponse magnétique différent, matrice de base d'encapsulation différente, différents groupes fonctionnels de modification de la couche externe, densité d'encapsulation différente, différentes longueurs de bras de groupes fonctionnels, ce qui entraînera une grande différence dans les caractéristiques des billes magnétiques.

Ainsi les expériences et systèmes adaptés aux différentes billes magnétiques sont également différents. Les billes magnétiques qui fonctionnent bien dans le système d'origine constituent la meilleure combinaison après une série de criblage et de cartographie des méthodes.. Si les billes magnétiques sont remplacées par un nouveau système, il est normal de constater une diminution de l'effet d'extraction. Dans la plupart des cas, les billes magnétiques et les systèmes de réactifs doivent consacrer un certain temps à l'ajustement.

L'effet d'extraction n'est pas aussi bon qu'un certain kit; les perles magnétiques sont-elles mauvaises?

De nombreux utilisateurs sont en train de cribler des billes magnétiques dans le système de réactifs déjà mature, quantité simplement égale de remplacement des billes magnétiques, utilisé pour comparer l'effet des billes magnétiques. Il est facile de conclure que l’effet d’une certaine perle n’est pas bon, mais en fait, car différentes billes conviennent à différents systèmes et dosages, doivent souvent être ajustés pour obtenir de meilleurs résultats d’extraction.

Présentation du fournisseur

Société de biotechnologie Shanghai Lingjun., Ltée. a été établi en 2016 qui est un fabricant professionnel de matériaux biomagnétiques et de réactifs d'extraction d'acide nucléique.

Nous avons une riche expérience dans l'extraction et la purification des acides nucléiques, purification des protéines, séparation cellulaire, chimiluminescence et autres domaines techniques.

Nos produits sont largement utilisés dans de nombreux domaines, comme les tests médicaux, tests génétiques, recherche universitaire, sélection génétique, et ainsi de suite. Nous fournissons non seulement des produits, mais pouvons également entreprendre des OEM, ODM, et autres besoins. Si vous avez des besoins connexes, n'hésitez pas à nous contacter au sales01@lingjunbio.com.