Problemas comunes en la extracción de ácidos nucleicos con el método de perlas magnéticas

En el proceso de detección de ácidos nucleicos., La extracción de perlas magnéticas se usa ampliamente debido a su alta sensibilidad de detección., operación automatizable, alto rendimiento, seguridad, y rapidez. Sin embargo, in the process of nucleic acid extraction, there are more details to pay attention to; an error will lead to the failure of the results; the following to help you organize some common problems and answers. I hope you will be helpful.

Can the efficiency of nucleic acid extraction be improved by increasing the amount of magnetic beads?

When the extraction result is not good, some people may think that increasing the dosage of magnetic beads can absorb more nucleic acids and improve the amount of nucleic acid extraction, but in fact, it isn’t easy to achieve the purpose of this method.

Excessive dosage of magnetic beads will result in their inability to be evenly dispersed into the solution system at each step, reduciendo su dispersabilidad y conduciendo a una adsorción incompleta, lavado, y procesos de elución. Cantidades excesivas de perlas magnéticas también absorberán más impurezas., y la ausencia de sitios de unión de ácidos nucleicos en la superficie de las perlas magnéticas brindará más oportunidades para la unión de impurezas.. En general, la cantidad de perlas magnéticas proporcionadas en el kit de extracción de ácido nucleico con método de perlas magnéticas es suficiente para cumplir con los escenarios de aplicación comunes; si encuentra el problema del bajo rendimiento de extracción de ácido nucleico, Debes prestar completa atención a la división y unión., proceso de limpieza y elución.

Cómo evitar la degradación del ácido nucleico durante la extracción de ácido nucleico?

Cada paso debe prestar atención a la uniformidad de mezcla adecuada para evitar que los residuos de aglomerados afecten los resultados experimentales.; en la elución, temperatura demasiado larga o demasiado alta, El ácido nucleico puede degradarse.; Recuerde no congelar y descongelar repetidamente las muestras., Las muestras extraídas deben tener cuidado de guardarse a la temperatura adecuada., preservación a largo plazo en la medida de lo posible -80 ℃.

El efecto de lisis de la muestra no es bueno., ¿Podemos aumentar la cantidad de lisado utilizado para mejorar el efecto de lisis y mejorar el efecto de extracción??

Para el método de las perlas magnéticas, Cada aumento en el volumen del líquido reduce la posibilidad de colisión de las perlas magnéticas., Al mismo tiempo, reducir la posibilidad de colisión de las perlas magnéticas conducirá a una disminución significativa en la tasa de adsorción.. Muy a menudo, aunque aumentar la solución de lisis y la solución de lavado puede desempeñar un papel en la mejora de la lisis y el lavado, El núcleo de la extracción de perlas magnéticas es la eficiencia de la adsorción de ácido nucleico por perlas magnéticas., no puede garantizar la eficiencia de la colisión de perlas magnéticas no puede garantizar la eficiencia de la extracción de ácido nucleico, por lo que simplemente aumentar la cantidad de reactivos para mejorar el efecto de extracción no es necesariamente completamente efectivo.

La pureza de la extracción de ácido nucleico no es alta., hay residuos de proteínas o sal, ¿Es mejor limpiar más veces??

La pureza de la extracción de ácido nucleico no es alta., Puede ser apropiado aumentar el número de veces una o dos limpiezas.. Si el número de limpiezas es demasiado alto, aumentará la cantidad de ácido nucleico perdido en el proceso de limpieza. En general, el número de veces de limpieza en 2-4 times is appropriate.

Is it possible to enhance the extraction effect by increasing the amount of sample extracted?

Within the range that the sample has high nucleic acid content and can be fully cleaved by the lysate, increasing the sample volume can increase the extraction effect, on the contrary, if the lysate is insufficient and the sample volume is too much, it may affect the cleavage effect, which may lead to the decrease of the quality of the extraction. Sin embargo, for samples with low nucleic acid content, increasing the sample volume will instead introduce more impurities and reduce the quality of the final nucleic acid extraction. For such samples, it is recommended to go through the enrichment or concentration step in the pre-treatment before starting the extraction.

¿Por qué es el efecto de las cuentas magnéticas?, que originalmente era muy bueno, reducido después de cambiar un kit?

Hay muchos tipos de cuentas magnéticas., diferente tamaño de partícula, diferente dispersión, diferente tiempo de respuesta magnética, matriz base de encapsulación diferente, diferentes grupos funcionales de modificación de la capa exterior, diferente densidad de encapsulación, diferentes longitudes de brazos de grupos funcionales, lo que conducirá a una gran diferencia en las características de las cuentas magnéticas.

Por eso los experimentos y sistemas adaptados a diferentes perlas magnéticas también son diferentes.. Las perlas magnéticas que funcionan bien en el sistema original son la mejor combinación después de una serie de pruebas y mapeo de métodos.. Si las cuentas magnéticas se cambian a un nuevo sistema, es normal ver una disminución en el efecto de extracción. en la mayoría de los casos, Las perlas magnéticas y los sistemas de reactivos tienen que pasar una cierta cantidad de tiempo con el ajuste..

El efecto de extracción no es tan bueno como el de cierto kit.; ¿Son malas las cuentas magnéticas??

Muchos usuarios en el proceso de detección de perlas magnéticas en el sistema de reactivos ya maduro, cantidad simplemente igual de reemplazo de perlas magnéticas, Se utiliza para comparar el efecto de las cuentas magnéticas.. Es fácil concluir que el efecto de una determinada cuenta no es bueno., but in fact, porque diferentes perlas son adecuadas para diferentes sistemas y dosis, A menudo es necesario ajustarlo para obtener mejores resultados de extracción..

Introducción del proveedor

Shanghai Lingjun Biotecnología Co., Limitado. se estableció en 2016 que es un fabricante profesional de materiales biomagnéticos y reactivos de extracción de ácidos nucleicos..

Tenemos una rica experiencia en extracción y purificación de ácidos nucleicos., purificación de proteínas, separación celular, quimioluminiscencia y otros campos técnicos.

Nuestros productos son ampliamente utilizados en muchos campos., como pruebas médicas, pruebas genéticas, investigación universitaria, mejoramiento genético, etcétera. No solo proporcionamos productos sino que también podemos realizar OEM, ODM, y otras necesidades. Si tienes necesidades relacionadas, no dude en contactarnos en ventas01@lingjunbio.com.