Problemas comunes en la extracción de ácidos nucleicos con el método de perlas magnéticas

En el proceso de detección de ácidos nucleicos., La extracción de perlas magnéticas se usa ampliamente debido a su alta sensibilidad de detección., operación automatizable, alto rendimiento, seguridad, y rapidez. Sin embargo, en el proceso de extracción de ácidos nucleicos, hay más detalles a los que prestar atención; un error provocará el fracaso de los resultados; lo siguiente para ayudarle a organizar algunos problemas y respuestas comunes. Espero que seas útil.

¿Se puede mejorar la eficiencia de la extracción de ácidos nucleicos aumentando la cantidad de perlas magnéticas??

Cuando el resultado de la extracción no es bueno, Algunas personas pueden pensar que aumentar la dosis de perlas magnéticas puede absorber más ácidos nucleicos y mejorar la cantidad de extracción de ácidos nucleicos., pero de hecho, No es fácil lograr el propósito de este método..

Una dosis excesiva de perlas magnéticas provocará que no se dispersen uniformemente en el sistema de solución en cada paso., reduciendo su dispersabilidad y conduciendo a una adsorción incompleta, lavado, y procesos de elución. Cantidades excesivas de perlas magnéticas también absorberán más impurezas., y la ausencia de sitios de unión de ácidos nucleicos en la superficie de las perlas magnéticas brindará más oportunidades para la unión de impurezas.. En general, la cantidad de perlas magnéticas proporcionadas en el kit de extracción de ácido nucleico con método de perlas magnéticas es suficiente para cumplir con los escenarios de aplicación comunes; si encuentra el problema del bajo rendimiento de extracción de ácido nucleico, Debes prestar completa atención a la división y unión., proceso de limpieza y elución.

Cómo evitar la degradación del ácido nucleico durante la extracción de ácido nucleico?

Cada paso debe prestar atención a la uniformidad de mezcla adecuada para evitar que los residuos de aglomerados afecten los resultados experimentales.; en la elución, temperatura demasiado larga o demasiado alta, El ácido nucleico puede degradarse.; Recuerde no congelar y descongelar repetidamente las muestras., Las muestras extraídas deben tener cuidado de guardarse a la temperatura adecuada., preservación a largo plazo en la medida de lo posible -80 ℃.

El efecto de lisis de la muestra no es bueno., ¿Podemos aumentar la cantidad de lisado utilizado para mejorar el efecto de lisis y mejorar el efecto de extracción??

Para el método de las perlas magnéticas, Cada aumento en el volumen del líquido reduce la posibilidad de colisión de las perlas magnéticas., Al mismo tiempo, reducir la posibilidad de colisión de las perlas magnéticas conducirá a una disminución significativa en la tasa de adsorción.. Muy a menudo, aunque aumentar la solución de lisis y la solución de lavado puede desempeñar un papel en la mejora de la lisis y el lavado, El núcleo de la extracción de perlas magnéticas es la eficiencia de la adsorción de ácido nucleico por perlas magnéticas., no puede garantizar la eficiencia de la colisión de perlas magnéticas no puede garantizar la eficiencia de la extracción de ácido nucleico, por lo que simplemente aumentar la cantidad de reactivos para mejorar el efecto de extracción no es necesariamente completamente efectivo.

La pureza de la extracción de ácido nucleico no es alta., hay residuos de proteínas o sal, ¿Es mejor limpiar más veces??

La pureza de la extracción de ácido nucleico no es alta., Puede ser apropiado aumentar el número de veces una o dos limpiezas.. Si el número de limpiezas es demasiado alto, aumentará la cantidad de ácido nucleico perdido en el proceso de limpieza. En general, el número de veces de limpieza en 2-4 los tiempos son apropiados.

¿Es posible mejorar el efecto de extracción aumentando la cantidad de muestra extraída??

Dentro del rango en el que la muestra tiene un alto contenido de ácido nucleico y puede ser escindida completamente por el lisado, aumentar el volumen de la muestra puede aumentar el efecto de extracción, de lo contrario, si el lisado es insuficiente y el volumen de muestra es demasiado, puede afectar el efecto de escisión, lo que puede conducir a la disminución de la calidad de la extracción.. Sin embargo, para muestras con bajo contenido de ácido nucleico, En cambio, aumentar el volumen de la muestra introducirá más impurezas y reducirá la calidad de la extracción final del ácido nucleico.. Para tales muestras, Se recomienda pasar por el paso de enriquecimiento o concentración en el pretratamiento antes de comenzar la extracción..

¿Por qué es el efecto de las cuentas magnéticas?, que originalmente era muy bueno, reducido después de cambiar un kit?

Hay muchos tipos de cuentas magnéticas., diferente tamaño de partícula, diferente dispersión, diferente tiempo de respuesta magnética, matriz base de encapsulación diferente, diferentes grupos funcionales de modificación de la capa exterior, diferente densidad de encapsulación, diferentes longitudes de brazos de grupos funcionales, lo que conducirá a una gran diferencia en las características de las cuentas magnéticas.

Por eso los experimentos y sistemas adaptados a diferentes perlas magnéticas también son diferentes.. Las perlas magnéticas que funcionan bien en el sistema original son la mejor combinación después de una serie de pruebas y mapeo de métodos.. Si las cuentas magnéticas se cambian a un nuevo sistema, es normal ver una disminución en el efecto de extracción. en la mayoría de los casos, Las perlas magnéticas y los sistemas de reactivos tienen que pasar una cierta cantidad de tiempo con el ajuste..

El efecto de extracción no es tan bueno como el de cierto kit.; ¿Son malas las cuentas magnéticas??

Muchos usuarios en el proceso de detección de perlas magnéticas en el sistema de reactivos ya maduro, cantidad simplemente igual de reemplazo de perlas magnéticas, Se utiliza para comparar el efecto de las cuentas magnéticas.. Es fácil concluir que el efecto de una determinada cuenta no es bueno., pero de hecho, porque diferentes perlas son adecuadas para diferentes sistemas y dosis, A menudo es necesario ajustarlo para obtener mejores resultados de extracción..

Introducción del proveedor

Shanghai Lingjun Biotecnología Co., Limitado. se estableció en 2016 que es un fabricante profesional de materiales biomagnéticos y reactivos de extracción de ácidos nucleicos..

Tenemos una rica experiencia en extracción y purificación de ácidos nucleicos., purificación de proteínas, separación celular, quimioluminiscencia y otros campos técnicos.

Nuestros productos son ampliamente utilizados en muchos campos., como pruebas médicas, pruebas genéticas, investigación universitaria, mejoramiento genético, etcétera. No solo proporcionamos productos sino que también podemos realizar OEM, ODM, y otras necesidades. Si tienes necesidades relacionadas, no dude en contactarnos en ventas01@lingjunbio.com.