المشاكل الشائعة في طريقة الخرز المغناطيسي لاستخراج الحمض النووي

في عملية الكشف عن الحمض النووي, يتم استخدام استخراج الخرز المغناطيسي على نطاق واسع بسبب حساسيته العالية للكشف, عملية قابلة للأتمتة, إنتاجية عالية, أمان, والسرعة. لكن, في عملية استخلاص الحمض النووي, هناك المزيد من التفاصيل التي يجب الانتباه إليها; خطأ سيؤدي إلى فشل النتائج; ما يلي لمساعدتك في تنظيم بعض المشاكل والإجابات الشائعة. آمل أن تكون مفيدا.

هل يمكن تحسين كفاءة استخلاص الحمض النووي عن طريق زيادة كمية الخرز المغناطيسي?

عندما تكون نتيجة الاستخراج ليست جيدة, قد يعتقد بعض الناس أن زيادة جرعة الخرز المغناطيسي يمكن أن تمتص المزيد من الأحماض النووية وتحسن كمية استخلاص الحمض النووي, ولكن في الواقع, ليس من السهل تحقيق الغرض من هذه الطريقة.

سوف تؤدي الجرعة المفرطة من الخرز المغناطيسي إلى عدم قدرتها على الانتشار بالتساوي في نظام الحل في كل خطوة, تقليل تشتتها ويؤدي إلى الامتزاز غير الكامل, غسل, وعمليات الشطف. الكميات المفرطة من الخرز المغناطيسي سوف تمتص أيضًا المزيد من الشوائب, وغياب مواقع ربط الحمض النووي على سطح الخرز المغناطيسي سيوفر المزيد من الفرص لربط الشوائب. على العموم, كمية الخرز المغناطيسي الواردة في مجموعة استخراج الحمض النووي بطريقة الخرز المغناطيسي كافية لتلبية سيناريوهات التطبيق الشائعة; إذا واجهت مشكلة انخفاض إنتاجية استخراج الحمض النووي, تحتاج إلى إيلاء الاعتبار الكامل للانقسام والربط, عملية التنظيف والشطف.

كيفية تجنب تدهور الحمض النووي أثناء استخراج الحمض النووي?

ينبغي لكل خطوة الاهتمام بتوحيد الخلط المناسب لتجنب بقايا التكتلات التي تؤثر على النتائج التجريبية; في الشطف, درجة حرارة طويلة جدًا أو مرتفعة جدًا, قد يتحلل الحمض النووي; تذكر العينات بعدم تكرار التجميد والذوبان, ويجب الحرص على حفظ العينات المستخرجة عند درجة الحرارة المناسبة, الحفاظ على المدى الطويل إلى أقصى حد ممكن -80 درجه مئوية.

تأثير تحلل العينة ليس جيدًا, هل يمكننا زيادة كمية المحللة المستخدمة لتحسين تأثير التحلل وتعزيز تأثير الاستخراج?

لطريقة الخرزة المغناطيسية, كل زيادة في حجم السائل تقلل من فرصة اصطدام الخرزات المغناطيسية, في حين أن تقليل فرصة اصطدام الخرزات المغناطيسية سيؤدي إلى انخفاض كبير في معدل الامتصاص. في كثير من الأحيان, على الرغم من أن زيادة محلول التحلل ومحلول الغسيل يمكن أن يلعب بالفعل دورًا في تعزيز التحلل والغسيل, جوهر استخراج الخرزة المغناطيسية هو كفاءة امتصاص الخرزة المغناطيسية للحمض النووي, لا يمكن ضمان كفاءة اصطدام حبة المغناطيسية ليست قادرة على ضمان كفاءة استخراج الحمض النووي, لذا فإن مجرد زيادة كمية الكواشف لتحسين تأثير الاستخلاص ليس بالضرورة فعالاً تمامًا.

نقاء استخراج الحمض النووي ليست عالية, هناك بقايا البروتين أو الملح, هل من الأفضل التنظيف مرات أكثر؟?

نقاء استخراج الحمض النووي ليست عالية, يمكن أن يكون من المناسب زيادة عدد مرات التنظيف مرة أو مرتين. إذا كان عدد التنظيف مرتفعًا جدًا, سيزيد من كمية فقدان الحمض النووي في عملية التنظيف. على العموم, عدد مرات التنظيف في 2-4 الأوقات مناسبة.

هل من الممكن تعزيز تأثير الاستخراج عن طريق زيادة كمية العينة المستخرجة?

ضمن النطاق الذي تحتوي فيه العينة على نسبة عالية من الحمض النووي ويمكن تقسيمها بالكامل بواسطة المحللة, زيادة حجم العينة يمكن أن يزيد من تأثير الاستخراج, على العكس تماما, إذا كانت المحللة غير كافية وحجم العينة أكثر من اللازم, قد يؤثر على تأثير الانقسام, مما قد يؤدي إلى انخفاض جودة الاستخراج. لكن, للعينات ذات المحتوى المنخفض من الحمض النووي, زيادة حجم العينة ستؤدي بدلاً من ذلك إلى إدخال المزيد من الشوائب وتقليل جودة استخلاص الحمض النووي النهائي. لمثل هذه العينات, يوصى بالمرور بخطوة التخصيب أو التركيز في المعالجة المسبقة قبل البدء في الاستخراج.

لماذا تأثير الخرز المغناطيسي, والتي كانت في الأصل جيدة جدًا, تم تخفيضها بعد تغيير المجموعة?

هناك أنواع كثيرة من الخرز المغناطيسي, حجم الجسيمات المختلفة, تشتت مختلفة, زمن استجابة مغناطيسي مختلف, مصفوفة قاعدة التغليف المختلفة, مجموعات وظيفية مختلفة لتعديل الطبقة الخارجية, كثافة التغليف مختلفة, أطوال أذرع المجموعة الوظيفية المختلفة, مما سيؤدي إلى اختلاف كبير في خصائص الخرز المغناطيسي.

لذا فإن التجارب والأنظمة التي تم تكييفها مع الخرزات المغناطيسية المختلفة مختلفة أيضًا. تعتبر الخرزات المغناطيسية التي تعمل بشكل جيد في النظام الأصلي هي أفضل مجموعة بعد سلسلة من الفحص ورسم خرائط الطريقة. إذا تم تغيير الخرز المغناطيسي إلى نظام جديد, فمن الطبيعي أن نرى انخفاضا في تأثير الاستخراج. في معظم الحالات, يجب أن تستغرق الخرزات المغناطيسية وأنظمة الكاشف وقتًا معينًا في التعديل.

تأثير الاستخراج ليس جيدًا مثل مجموعة معينة; هل الخرز المغناطيسي سيء?

يقوم العديد من المستخدمين بعملية فحص الخرز المغناطيسي في نظام الكاشف الناضج بالفعل, ببساطة كمية متساوية من استبدال الخرز المغناطيسي, تستخدم لمقارنة تأثير الخرز المغناطيسي. من السهل أن نستنتج أن تأثير حبة معينة ليس جيدًا, ولكن في الواقع, لأن الخرزات المختلفة مناسبة لأنظمة وجرعات مختلفة, غالبًا ما تحتاج إلى تعديل للحصول على نتائج استخلاص أفضل.

مقدمة المورد

شركة شنغهاي لينغجون للتكنولوجيا الحيوية, المحدودة. تأسست في 2016 وهي شركة متخصصة في تصنيع المواد المغناطيسية الحيوية وكواشف استخلاص الحمض النووي.

لدينا خبرة غنية في استخراج وتنقية الحمض النووي, تنقية البروتين, فصل الخلايا, التألق الكيميائي والمجالات التقنية الأخرى.

منتجاتنا تستخدم على نطاق واسع في العديد من المجالات, مثل الفحوصات الطبية, الاختبارات الجينية, البحوث الجامعية, التكاثر الوراثي, وهكذا. نحن لا نقدم المنتجات فحسب، بل يمكننا أيضًا إجراء تصنيع المعدات الأصلية, أوديإم, وغيرها من الاحتياجات. إذا كان لديك الاحتياجات ذات الصلة, لا تتردد في الاتصال بنا على sales01@lingjunbio.com.