Veelvoorkomende problemen bij de extractie van nucleïnezuren met magnetische kralen

Tijdens het detectieproces van nucleïnezuren, magnetische parelextractie wordt veel gebruikt vanwege de hoge detectiegevoeligheid, automatiseerbare werking, hoge doorvoer, veiligheid, en snelheid. Echter, tijdens het proces van nucleïnezuurextractie, er zijn meer details waar u op moet letten; een fout zal leiden tot het mislukken van de resultaten; het volgende om u te helpen enkele veelvoorkomende problemen en antwoorden te ordenen. Ik hoop dat je behulpzaam zult zijn.

Kan de efficiëntie van nucleïnezuurextractie worden verbeterd door de hoeveelheid magnetische kralen te vergroten??

Wanneer het extractieresultaat niet goed is, sommige mensen denken misschien dat het verhogen van de dosering van magnetische kralen meer nucleïnezuren kan absorberen en de hoeveelheid nucleïnezuurextractie kan verbeteren, maar in feite, het is niet eenvoudig om het doel van deze methode te bereiken.

Een overmatige dosering van magnetische kralen zal ertoe leiden dat ze niet bij elke stap gelijkmatig in het oplossingssysteem kunnen worden gedispergeerd, waardoor hun dispergeerbaarheid wordt verminderd en dit leidt tot onvolledige adsorptie, wassen, en elutieprocessen. Overmatige hoeveelheden magnetische kralen zullen ook meer onzuiverheden adsorberen, en de afwezigheid van nucleïnezuurbindingsplaatsen op het oppervlak van magnetische kralen zal meer mogelijkheden bieden voor de binding van onzuiverheden. In het algemeen, de hoeveelheid magnetische korrels die wordt gegeven in de nucleïnezuurextractiekit met magnetische korrelmethode is voldoende om aan de gebruikelijke toepassingsscenario's te voldoen; als u het probleem tegenkomt van een lage opbrengst aan nucleïnezuurextractie, je moet volledige aandacht schenken aan de splitsing en binding, reinigings- en elutieproces.

Hoe de afbraak van nucleïnezuren tijdens de extractie van nucleïnezuren kan worden vermeden?

Bij elke stap moet aandacht worden besteed aan een adequate menguniformiteit om te voorkomen dat agglomeratenresten de experimentele resultaten beïnvloeden; in de elutie, te lang of te hoge temperatuur, het nucleïnezuur kan worden afgebroken; monsters onthouden dat ze niet herhaaldelijk moeten invriezen en ontdooien, geëxtraheerde monsters moeten zorgvuldig worden bewaard bij de juiste temperatuur, behoud op lange termijn, voor zover mogelijk -80 ℃.

Het monsterlyse-effect is niet goed, kunnen we de hoeveelheid lysaat verhogen die wordt gebruikt om het lysiseffect te verbeteren en het extractie-effect te versterken?

Voor de magnetische kralenmethode, elke toename van het vloeistofvolume verkleint de kans op botsingen van de magnetische kralen, terwijl het verminderen van de kans op botsingen van de magnetische kralen zal leiden tot een significante afname van de adsorptiesnelheid. Heel vaak dus, hoewel het verhogen van de lyse-oplossing en de wasoplossing inderdaad een rol kan spelen bij het verbeteren van de lyse en het wassen, de kern van magnetische parelextractie is de efficiëntie van magnetische pareladsorptie van nucleïnezuur, kan de efficiëntie van botsingen met magnetische kralen niet garanderen. kan de efficiëntie van de extractie van nucleïnezuren niet garanderen, het simpelweg verhogen van de hoeveelheid reagentia om het extractie-effect te verbeteren is niet noodzakelijkerwijs volledig effectief.

De zuiverheid van de nucleïnezuurextractie is niet hoog, er zijn eiwit- of zoutresten, Is het beter om vaker schoon te maken??

De zuiverheid van de nucleïnezuurextractie is niet hoog, Het kan aangewezen zijn om het aantal keren dat u één of twee keer schoonmaakt te verhogen. Als het aantal reinigingen te hoog is, het zal de hoeveelheid nucleïnezuurverlies tijdens het reinigingsproces vergroten. In het algemeen, het aantal schoonmaakbeurten in 2-4 tijden is passend.

Is het mogelijk om het extractie-effect te vergroten door de hoeveelheid geëxtraheerd monster te vergroten??

Binnen het bereik dat het monster een hoog nucleïnezuurgehalte heeft en volledig door het lysaat kan worden gesplitst, het vergroten van het monstervolume kan het extractie-effect vergroten, integendeel, als het lysaat onvoldoende is en het monstervolume te groot is, het kan het splitsingseffect beïnvloeden, wat kan leiden tot een afname van de kwaliteit van de winning. Echter, voor monsters met een laag nucleïnezuurgehalte, het vergroten van het monstervolume zal in plaats daarvan meer onzuiverheden introduceren en de kwaliteit van de uiteindelijke nucleïnezuurextractie verminderen. Voor dergelijke monsters, Het wordt aanbevolen om de verrijkings- of concentratiestap in de voorbehandeling te doorlopen voordat met de extractie wordt begonnen.

Waarom is het effect van magnetische kralen, wat oorspronkelijk heel goed was, verminderd na het vervangen van een kit?

Er zijn veel soorten magnetische kralen, verschillende deeltjesgrootte, verschillende spreiding, verschillende magnetische responstijd, verschillende inkapselingsbasismatrix, verschillende functionele groepen voor modificatie van de buitenlaag, verschillende inkapselingsdichtheid, verschillende armlengtes van functionele groepen, wat zal leiden tot een groot verschil in de kenmerken van magnetische kralen.

De experimenten en systemen die zijn aangepast aan verschillende magnetische kralen zijn dus ook verschillend. De magnetische kralen die goed presteren in het oorspronkelijke systeem zijn de beste combinatie na een reeks screening en methodemapping. Als de magnetische kralen worden veranderd in een nieuw systeem, het is normaal dat het extractie-effect afneemt. In de meeste gevallen, de magnetische kralen en reagenssystemen moeten een bepaalde tijd met de aanpassing bezig zijn.

Het extractie-effect is niet zo goed als bij een bepaalde kit; zijn de magnetische kralen slecht?

Veel gebruikers zijn bezig met het screenen van magnetische kralen in het reeds volwassen reagenssysteem, gewoon een gelijke hoeveelheid vervanging van magnetische kralen, gebruikt om het effect van magnetische kralen te vergelijken. Het is gemakkelijk om te concluderen dat de werking van een bepaalde kraal niet goed is, maar in feite, omdat verschillende kralen geschikt zijn voor verschillende systemen en doseringen, moeten vaak worden aangepast om betere extractieresultaten te verkrijgen.

Introductie van leveranciers

Shanghai Lingjun Biotechnologie Co., Ltd. werd opgericht in 2016 dat een professionele fabrikant is van biomagnetische materialen en reagentia voor nucleïnezuurextractie.

We hebben een rijke ervaring in de extractie en zuivering van nucleïnezuren, eiwit zuivering, cel scheiding, chemiluminescentie en andere technische gebieden.

Onze producten worden op veel gebieden veel gebruikt, zoals medische testen, genetische testen, universitair onderzoek, genetische veredeling, enzovoort. Wij leveren niet alleen producten, maar kunnen ook OEM ondernemen, ODM, en andere behoeften. Als u gerelateerde behoeften heeft, neem dan gerust contact met ons op via sales01@lingjunbio.com.