Vanlige problemer i magnetisk perlemetoden nukleinsyreekstraksjon

I ferd med å oppdage nukleinsyre, magnetisk perleekstraksjon er mye brukt på grunn av sin høye deteksjonsfølsomhet, automatisert drift, høy gjennomstrømning, sikkerhet, og hurtighet. Imidlertid, i prosessen med nukleinsyreekstraksjon, det er flere detaljer å være oppmerksom på; en feil vil føre til feil i resultatene; følgende for å hjelpe deg med å organisere noen vanlige problemer og svar. Jeg håper du vil være til hjelp.

Kan effektiviteten av nukleinsyreekstraksjon forbedres ved å øke mengden magnetiske perler?

Når utvinningsresultatet ikke er bra, noen mennesker tror kanskje at å øke dosen av magnetiske perler kan absorbere flere nukleinsyrer og forbedre mengden av nukleinsyreekstraksjon, men faktisk, det er ikke lett å oppnå formålet med denne metoden.

Overdreven dosering av magnetiske perler vil resultere i at de ikke klarer å bli jevnt fordelt i løsningssystemet ved hvert trinn, reduserer deres dispergerbarhet og fører til ufullstendig adsorpsjon, vask, og elueringsprosesser. Store mengder magnetiske perler vil også adsorbere flere urenheter, og fraværet av nukleinsyrebindingsseter på overflaten av magnetiske perler vil gi flere muligheter for binding av urenheter. Generelt sett, mengden magnetiske perler gitt i nukleinsyreekstraksjonssettet med magnetisk perlemetode er nok til å møte de vanlige bruksscenariene; hvis du støter på problemet med lavt nukleinsyreutvinningsutbytte, du må ta full hensyn til spaltningen og bindingen, rense- og elueringsprosess.

Hvordan unngå nukleinsyrenedbrytning under nukleinsyreekstraksjon?

Hvert trinn bør ta hensyn til tilstrekkelig blandingsuniformitet for å unngå at rester av agglomerater påvirker de eksperimentelle resultatene; i elueringen, for lang eller for høy temperatur, nukleinsyren kan brytes ned; prøver husk å ikke gjentatt frysing og tining, ekstraherte prøver bør være nøye med å lagre ved riktig temperatur, langsiktig bevaring av så langt som mulig -80 ℃.

Prøvelyseringseffekten er ikke god, kan vi øke mengden lysat som brukes for å forbedre lyseringseffekten og forsterke ekstraksjonseffekten?

For den magnetiske perlemetoden, hver økning i væskevolumet reduserer sjansen for kollisjon av de magnetiske kulene, mens reduksjon av sjansen for kollisjon av de magnetiske kulene vil føre til en betydelig reduksjon i adsorpsjonshastigheten. Så veldig ofte, selv om økning av lyseringsløsningen og vaskeløsningen faktisk kan spille en rolle i å forbedre lysisen og vaskingen, Kjernen i magnetisk perleekstraksjon er effektiviteten av magnetisk perleadsorpsjon av nukleinsyre, kan ikke garantere effektiviteten av magnetisk perlekollisjon er ikke i stand til å garantere effektiviteten av nukleinsyreekstraksjon, så bare å øke mengden av reagenser for å forbedre ekstraksjonseffekten er ikke nødvendigvis helt effektiv.

Nukleinsyreekstraksjonsrenheten er ikke høy, det er protein- eller saltrester, er det bedre å rydde flere ganger?

Nukleinsyreekstraksjonsrenheten er ikke høy, kan være hensiktsmessig å øke antall ganger en eller to rengjøring. Hvis antallet rengjøring er for høyt, det vil øke mengden nukleinsyretap i renseprosessen. Generelt sett, antall rengjøringstider i 2-4 tider er passende.

Er det mulig å øke ekstraksjonseffekten ved å øke mengden av ekstrahert prøve?

Innenfor området at prøven har høyt nukleinsyreinnhold og kan spaltes fullstendig av lysatet, å øke prøvevolumet kan øke ekstraksjonseffekten, tvert imot, hvis lysatet er utilstrekkelig og prøvevolumet er for stort, det kan påvirke spaltningseffekten, som kan føre til reduksjon av kvaliteten på utvinningen. Imidlertid, for prøver med lavt nukleinsyreinnhold, øke prøvevolumet vil i stedet introdusere flere urenheter og redusere kvaliteten på den endelige nukleinsyreekstraksjonen. For slike prøver, det anbefales å gå gjennom anriknings- eller konsentrasjonstrinnet i forbehandlingen før man starter ekstraksjonen.

Hvorfor er effekten av magnetiske perler, som opprinnelig var veldig bra, redusert etter bytte av et sett?

Det finnes mange typer magnetiske perler, ulik partikkelstørrelse, annen spredning, ulik magnetisk responstid, forskjellig innkapslingsgrunnmatrise, forskjellige ytre lag modifikasjonsfunksjonelle grupper, forskjellig innkapslingstetthet, ulike funksjonsgruppe armlengder, som vil føre til en stor forskjell i egenskapene til magnetiske perler.

Så eksperimentene og systemene tilpasset forskjellige magnetiske perler er også forskjellige. De magnetiske kulene som fungerer godt i det originale systemet er den beste kombinasjonen etter en serie med screening og metodekartlegging. Hvis de magnetiske kulene endres til et nytt system, det er normalt å se en reduksjon i ekstraksjonseffekten. I de fleste tilfeller, de magnetiske kulene og reagenssystemene må gjøre en viss tid med justeringen.

Ekstraksjonseffekten er ikke like god som et visst sett; er de magnetiske perlene dårlige?

Mange brukere er i ferd med å screene magnetiske perler i det allerede modne reagenssystemet, ganske enkelt lik mengde erstatning av magnetiske perler, brukes til å sammenligne effekten av magnetiske perler. Det er lett å konkludere med at effekten av en viss perle ikke er god, men faktisk, fordi forskjellige perler er egnet for forskjellige systemer og doseringer, må ofte justeres for å få bedre utvinningsresultater.

Leverandørintroduksjon

Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd. ble etablert i 2016 som er en profesjonell produsent av biomagnetiske materialer og nukleinsyreekstraksjonsreagenser.

Vi har rik erfaring innen utvinning og rensing av nukleinsyre, proteinrensing, celleseparasjon, kjemiluminescens og andre tekniske felt.

Våre produkter er mye brukt på mange felt, som medisinsk testing, genetisk testing, universitetsforskning, genetisk avl, og så videre. Vi leverer ikke bare produkter, men kan også påta oss OEM, ODM, og andre behov. Hvis du har relaterte behov, ta gjerne kontakt med oss ​​på sales01@lingjunbio.com.