نموذج الاتصال

الاستراتيجيات والأساليب الأساسية لإزالة السموم الداخلية أثناء تنقية الحمض النووي البلازميد

عديد السكاريد الدهني, LPS

استخدام البلازميدات الخالية من السموم الداخلية ينبغي أن تؤخذ في الاعتبار عند استخدام الحمض النووي البلازميد المستخرج لترنسفكأيشن من الابتدائي, تعليق, أو الخلايا الحساسة, دراسات إسكات الجينات, المعالجة الدقيقة لحقن الخلايا, العلاج الجيني أو لقاحات الحمض النووي,وغيرها من التجارب الصعبة للغاية.

يشير إزالة السموم الداخلية للبلازميد إلى خطوة إزالة السموم الداخلية (عديد السكاريد الدهني, LPS) أثناء تنقية الحمض النووي البلازميد. الذيفان الداخلي عبارة عن مركب عديد السكاريد الدهني والبروتيني الموجود في الجدار الخلوي للبكتيريا سالبة الجرام والذي يتم إطلاقه عندما تتحلل البكتيريا. يؤثر وجود الذيفان الداخلي بشكل كبير على كفاءة ترنسفكأيشن وقد ينشط تفاعلات غير محددة للخلايا المناعية, مما أدى إلى نتائج إيجابية كاذبة في التجربة. لذلك, من أجل ضمان ارتفاع معدل ترنسفكأيشن وارتفاع معدل بقاء الخلايا المنقولة, يجب إزالة الذيفان الداخلي من عملية تحضير البلازميد.

أهمية إزالة الذيفان الداخلي:

1.تؤثر على كفاءة ترنسفكأيشن: سوف يقلل الذيفان الداخلي من كفاءة ترنسفكأيشن الخلايا الأولية والخلايا المستنبتة الحساسة, وتتداخل مع ترنسفكأيشن في المختبر من الخلايا المناعية.

2.تنشيط الاستجابة المناعية: يمكن أن يؤدي الذيفان الداخلي أيضًا إلى الحمى, انخفاض ضغط الدم, ضيق في التنفس, التخثر داخل الأوعية الدموية, ومتلازمة الصدمة السمية الداخلية, يمكن أن يحفز الذيفان الداخلي تخليق العوامل الالتهابية IL-1, إيل-6, إيل-10, وTNF-α عن طريق تفعيل TLR4.

3,.المتطلبات التنظيمية للأدوية: تنص إدارة الأدوية الحكومية على أن محتوى الذيفان الداخلي في منتجات لقاح الحمض النووي يجب ألا يكون أعلى من 0.01 الاتحاد الأوروبي/ميكروغرام, ويجب ألا تتجاوز الجرعة المخصصة للاستخدام الشخصي 20 الاتحاد الأوروبي.

هناك استراتيجيتان لإزالة السموم الداخلية:

1. الإزالة في مرحلة الربط: تتم إزالة الذيفان الداخلي في مرحلة ربط DNA البلازميد.

2. الإزالة بعد الشطف: إزالة الذيفان الداخلي بعد شطف DNA البلازميد.

تشمل طرق إزالة السموم الداخلية الحالية بشكل أساسي:

1. إزالة غير انتقائية: مثل الامتزاز, الترشيح الفائق, والاستبعاد اللوني.

2. هطول انتقائي: على سبيل المثال, باستخدام بوليميكسين ب, الهستيدين, وكروماتوجرافيا تقارب بولي-L-يسين.

3. كروماتوغرافيا التفاعل الكارهة للماء وكروماتوغرافيا التبادل الأيوني.

ملكنا مجموعة استخراج الحمض النووي البلازميد الخالي من السموم الداخلية (طريقة حبة مغناطيسية) يعتمد صيغة حل فريدة لا تتطلب سوى عدد قليل من عمليات الغسل البسيطة لإزالة السموم الداخلية, البروتينات, السكريات, وغيرها من الشوائب, ثم يحصل على DNA البلازميد عالي الجودة. يقوم هذا المنتج باستخراج وتنقية الحمض النووي البلازميدي مع ضرر بسيط للبلازميدات, تركيز استخراج عالية, ونسبة عالية من الحلزون الفائق. يمكن استخدام DNA البلازميد المستخرج في عملية الهضم, تفاعل البوليميراز المتسلسل, التسلسل, ربط,ن والتحول.

مجموعة أدوات استخراج الحمض النووي البلازميد الخالي من السموم الداخلية للعينات صغيرة الحجم

مزود

شركة شنغهاي لينغجون للتكنولوجيا الحيوية, المحدودة.تأسست في 2016 وهي شركة متخصصة في تصنيع المواد المغناطيسية الحيوية وكواشف استخلاص الحمض النووي.

لدينا خبرة غنية في استخراج وتنقية الحمض النووي, تنقية البروتين, فصل الخلايا, التألق الكيميائي والمجالات التقنية الأخرى.

منتجاتنا تستخدم على نطاق واسع في العديد من المجالات, مثل الفحوصات الطبية, الاختبارات الجينية, البحوث الجامعية, التكاثر الوراثي, وهكذا. نحن لا نقدم المنتجات فحسب، بل يمكننا أيضًا إجراء تصنيع المعدات الأصلية, أوديإم, وغيرها من الاحتياجات. إذا كان لديك حاجة ذات صلة, لا تتردد في الاتصال بنا علىsales01@lingjunbio.com.

العلامات

تحديثات النشرة الإخبارية

أدخل عنوان بريدك الإلكتروني أدناه واشترك في نشرتنا الإخبارية

المشاركات ذات الصلة