المهنية في صناعة الخرز المغناطيسي الحيوي
الاستراتيجيات والأساليب الأساسية لإزالة السموم الداخلية أثناء تنقية الحمض النووي البلازميد
The use of endotoxin-free plasmids should be considered when the extracted plasmid DNA is used for transfection of primary, تعليق, أو الخلايا الحساسة, دراسات إسكات الجينات, المعالجة الدقيقة لحقن الخلايا, gene therapy or DNA vaccines,and other extremely demanding experiments.
Plasmid de-endotoxinization refers to the step of removing endotoxin (lipopolysaccharide, LPS) during the purification of plasmid DNA. Endotoxin is a lipopolysaccharide and protein complex in the cell wall of Gram-negative bacteria that is released when the bacteria lyse. The presence of endotoxin greatly affects the transfection efficiency and may activate non-specific reactions of immune cells, resulting in false positives in the experiment. لذلك, in order to ensure a high transfection rate and high survival of transfected cells, endotoxin must be removed from the process of plasmid preparation.
The importance of endotoxin removal is:
1.Affect the transfection efficiency: endotoxin will reduce the transfection efficiency of primary cells and sensitive cultured cells, and interfere with the in vitro transfection of immune cells.
2.Activate immune response: endotoxin can also lead to fever, hypotension, respiratory distress, intravascular coagulation, and endotoxic shock syndrome, endotoxin can stimulate the synthesis of inflammatory factors IL-1, IL-6, IL-10, and TNF-α by activating TLR4.
3,.Drug regulatory requirements: The State Drug Administration stipulates that the content of endotoxin in DNA vaccine products should not be higher than 0.01 EU/μg, and the dose for personal use should not exceed 20 EU.
There are two strategies for endotoxin removal:
1. Removal at the binding stage: endotoxin is removed at the plasmid DNA binding stage.
2. Removal after elution: remove endotoxin after plasmid DNA elution.
The current endotoxin removal methods mainly include:
1. Non-selective removal: such as adsorption, ultrafiltration, and exclusion chromatography.
2. Selective precipitation: على سبيل المثال, using polymyxin B, histidines, and poly-L-lysine affinity chromatography.
3. Hydrophobic interaction chromatography and ion exchange chromatography.
ملكنا endotoxin-free plasmid DNA extraction kit (طريقة حبة مغناطيسية) adopts a unique solution formula that requires only a few simple washes to remove endotoxin, البروتينات, السكريات, وغيرها من الشوائب, and then obtains high-quality plasmid DNA. This product extracts and purifies plasmid DNA with little damage to plasmids, high extraction concentration, and a high proportion of super-helix. The extracted plasmid DNA can be used for digestion, تفاعل البوليميراز المتسلسل, التسلسل, ربط,n and transformation.
مزود
شركة شنغهاي لينغجون للتكنولوجيا الحيوية, المحدودة.تأسست في 2016 وهي شركة متخصصة في تصنيع المواد المغناطيسية الحيوية وكواشف استخلاص الحمض النووي.
لدينا خبرة غنية في استخراج وتنقية الحمض النووي, تنقية البروتين, فصل الخلايا, التألق الكيميائي والمجالات التقنية الأخرى.
منتجاتنا تستخدم على نطاق واسع في العديد من المجالات, مثل الفحوصات الطبية, الاختبارات الجينية, البحوث الجامعية, التكاثر الوراثي, وهكذا. نحن لا نقدم المنتجات فحسب، بل يمكننا أيضًا إجراء تصنيع المعدات الأصلية, أوديإم, وغيرها من الاحتياجات. إذا كان لديك حاجة ذات صلة, لا تتردد في الاتصال بنا علىsales01@lingjunbio.com.
- تحسين درجة الحرارة والوقت للخرز المغناطيسي القائم على السيليكا في اختيار جزء الحمض النووي
- هل لا يزال بإمكانك استخدام الخرز المغناطيسي الحيوي النانوي منتهية الصلاحية؟?
- التعامل اللطيف: خط الأساس غير القابل للتفاوض لاختيار جزء الحمض النووي
- دقة “التحرير” من قانون الحياة: قيمة التطبيق والخيارات الفنية لاختيار جزء الحمض النووي
- كيف يمكن التخفيف من التأثير المثبط للخرزات المغناطيسية على تفاعل البوليميراز المتسلسل?
