Cómo proporcionar soluciones eficientes para la clasificación de fragmentos de ADN?

Actualmente, Muchos problemas en la investigación de biología molecular requieren clasificar el ADN según su tamaño., lo que se conoce como clasificación de fragmentos. La electroforesis en gel de agarosa permite la separación del ADN en el rango de 10 ⁵~cientos de pares de bases. En contraste, La electroforesis en gel de acrilamida permite la separación del ADN en el rango de miles de pares de bases.. Para conseguir una alta resolución en estos procesos de separación, la diferencia de tamaño para separar dos fragmentos debe ser 10% y un contenido de ácido nucleico de hasta 5 a 10 miligramos.

El método de precipitación selectiva., una combinación de polietilenglicol y perlas magnéticas biológicas, destaca como un enfoque más eficiente y conveniente para la clasificación de fragmentos. En altas concentraciones de soluciones de PEG y NaCl., PEG altera la capa de hidratación fuera de las moléculas de ADN, provocando que se agreguen y precipiten. Esto expone los grupos fosfato cargados negativamente., que luego forman un "puente de sal"’ con los grupos carboxilo en las perlas magnéticas’ superficie, permitiendo que el ADN sea adsorbido en las perlas.

Cuanto más largo sea el ADN, Cuanto más grupos fosfato cargados negativamente están expuestos en la superficie, haciendo que toda la molécula esté más cargada negativamente y sea más fácil de adsorber en perlas magnéticas, y se puede recuperar con concentraciones más bajas de PEG y NaCl. Cuanto más corto sea el ADN, cuanto mayor sea la concentración de PEG y NaCl necesaria para romper completamente la capa de hidratación en su superficie, exponer suficientes grupos fosfato cargados negativamente para ser adsorbidos por perlas magnéticas y luego recuperados. Si desea recuperar fragmentos de ADN más cortos, necesitas agregar un volumen mayor de cuentas magnéticas. La proporción entre la suspensión de perlas magnéticas y la muestra también afecta el tamaño de la detección de fragmentos.. A medida que aumenta la concentración de suspensión de perlas magnéticas, Las perlas magnéticas aumentarán su capacidad de adsorción para fragmentos pequeños además de fragmentos grandes..

Cuando una longitud específica de un fragmento de ADN debe separarse mediante perlas magnéticas, Normalmente se realizan dos rondas de clasificación.. en la primera ronda, Las perlas magnéticas se unen al ADN con mayor peso molecular., que luego se elimina desechando las cuentas. La segunda ronda involucra el producto restante., donde las perlas magnéticas se unen al ADN con mayor peso molecular y eliminan el ADN con menor peso molecular desechando el sobrenadante.

Tanto el ADN de doble cadena, ADN monocatenario, y el ARN puede disociar grupos fosfato cargados negativamente en solución para que puedan purificarse y recuperarse con perlas magnéticas. Sin embargo, El ADN y el ARN monocatenarios no se pueden analizar para determinar el tamaño de los fragmentos.. La estructura secundaria del ADN bicatenario es generalmente una molécula de doble hélice lineal relativamente estable.. En presencia de PEG, el número de grupos fosfato cargados negativamente disociados se correlaciona positivamente con su longitud. Sin embargo, El ARN y el ADN monocatenario tienen estructuras secundarias complejas., que impiden que los grupos negativos expuestos se correlacionen positivamente con la longitud, haciendo imposible detectar fragmentos como el ADN. Además, debido a la diferente estabilidad del ADN y el ARN a diferentes valores de pH, El pH de los tampones utilizados para purificar ADN y ARN es diferente porque el ADN y el ARN tienen diferente estabilidad en diferentes condiciones de pH..

Las cuentas magnéticas de clasificación de fragmentos de Shanghai Lingjun Biotechnology se desarrollan y producen de forma independiente desde materias primas hasta cuentas magnéticas terminadas., con un estricto control de calidad para garantizar que el rendimiento y la consistencia del producto final cumplan con altos estándares y garanticen un suministro estable del producto.. La empresa invierte continuamente en investigación y desarrollo., manteniendo siempre un énfasis absoluto en la calidad del producto, satisfacción del cliente, y competitividad del mercado.

Introducción del proveedor

Shanghai Lingjun Biotecnología Co., Limitado.se estableció en 2016 que es un fabricante profesional de materiales biomagnéticos y reactivos de extracción de ácidos nucleicos..

Tenemos una rica experiencia en extracción y purificación de ácidos nucleicos., purificación de proteínas, separación celular, quimioluminiscencia y otros campos técnicos.

Nuestros productos son ampliamente utilizados en muchos campos., como pruebas médicas, pruebas genéticas, investigación universitaria, mejoramiento genético, etcétera. No solo proporcionamos productos sino que también podemos realizar OEM, ODM, y otras necesidades. Si tienes necesidades relacionadas, no dude en contactarnos en ventas01@lingjunbio.com.