Wéi liwwert een effizient Léisunge fir DNA Fragment Sortéierung?

Am Moment, vill Probleemer an der molekulare Biologiefuerschung erfuerderen d'DNA no Gréisst ze klasséieren, déi als Fragmenter Sortéierung bekannt ass. Elektrophorese op Agarosegel erlaabt d'Trennung vun DNA am Beräich vun 10 ⁵~ Honnerte vu Basispaaren. Am Géigesaz, Elektrophorese op Acrylamidgel erlaabt d'Trennung vun DNA am Beräich vun Dausende vu Basepairen. Fir héich Opléisung an dësen Trennungsprozesser z'erreechen, der Gréisst Ënnerscheed zu trennen zwee Fragmenter soll 10% an en Nukleinsäuregehalt vu bis zu 5 zu 10 milligramm.

Déi selektiv Nidderschlagsmethod, eng Kombinatioun vu Polyethylenglycol a biologesche magnetesche Perlen, steet eraus als eng méi effizient a praktesch Approche fir Fragmenter ze sortéieren. An héich Konzentratioune vu PEG an NaCl Léisungen, PEG stéiert d'Hydratatiounsschicht ausserhalb vun DNA Molekülen, verursaache se aggregéiert an ausfällt. Dëst beliicht déi negativ gelueden Phosphatgruppen, déi dann eng ‘Salzbréck bilden’ mat de Carboxylgruppen op de magnetesche Perlen’ Uewerfläch, erlaabt DNA op d'Pärelen ze adsorbéieren.

Wat méi laang d'DNA ass, déi méi negativ gelueden Phosphatgruppen sinn op der Uewerfläch ausgesat, mécht de ganze Molekül méi negativ gelueden a méi einfach op magnetesch Perlen ze adsorbéieren, an et kann mat méi nidderegen Konzentratioune vu PEG an NaCl erholl ginn. Wat méi kuerz ass d'DNA, wat méi héich ass d'Konzentratioun vu PEG an NaCl néideg fir d'Hydratatiounsschicht op senger Uewerfläch grëndlech ofzebriechen, genuch negativ gelueden Phosphatgruppen ausgesat fir vu magnetesche Perlen adsorbéiert ze ginn an duerno erëmgewielt ze ginn. Wann Dir wëllt méi kuerz DNA Fragmenter recuperéieren, Dir musst e méi grousst Volumen vu magnetesche Perlen addéieren. D'Verhältnis vun der magnetescher Perlensuspension zum Probe beaflosst och d'Gréisst vun de Fragmenter Screening. Wéi d'Erhéijung vun der Konzentratioun vu magnetesche Perlensuspension, déi magnetesch Perlen wäerten hir Adsorptiounskapazitéit fir kleng Fragmenter zousätzlech zu grousse Fragmenter erhéijen.

Wann eng spezifesch Längt vum DNA Fragment duerch magnetesch Perlen getrennt ass, zwou Ronnen vun Zortéieren typesch duerchgefouert. An der éischter Ronn, déi magnetesch Perlen binden un DNA mat méi héije Molekulargewiicht, déi dann ewechgeholl gëtt andeems d'Kärelen ewechgehäit ginn. Déi zweet Ronn ëmfaasst de Rescht Produit, wou d'magnetesch Perlen un DNA mat méi héije Molekulargewiicht binden an DNA mat méi nidderegen Molekularegewiicht ewechhuelen andeems de Supernatant entsuergt gëtt.

Béid duebelstrengeg DNA, eenzegstrengeg DNA, an RNA kann negativ gelueden Phosphatgruppen an der Léisung dissoziéieren sou datt se gereinegt a mat magnetesche Perlen erholl kënne ginn. Allerdéngs, Single-strenged DNA an RNA kënnen net fir Fragmentgréisst gepréift ginn. Déi sekundär Struktur vun duebelstrengegen DNA ass allgemeng e relativ stabile linear Duebelhelix Molekül. A Präsenz vu PEG, d'Zuel vun negativ gelueden Phosphatgruppen dissoziéiert ass positiv mat senger Längt korreléiert. Allerdéngs, RNA an eenzegstrengeg DNA hu komplex sekundär Strukturen, déi verhënneren datt déi ausgesat negativ Gruppen positiv mat der Längt korreléiert ginn, mécht et onméiglech fir Fragmenter wéi DNA ze screenen. Zousätzlech, wéinst der variéierter Stabilitéit vun DNA a RNA bei verschiddene pH Wäerter, den pH vun de Puffer benotzt fir d'DNA an d'RNA ze purifizéieren sinn ënnerschiddlech well DNA an RNA verschidde Stabilitéit ënner verschiddene pH Bedéngungen hunn.

Shanghai Lingjun Biotechnologie Fragment sortéieren magnetesch Perlen sinn onofhängeg entwéckelt a produzéiert vu Rohmaterial bis fäerdeg magnetesch Perlen, mat strikter Qualitéitskontroll fir sécherzestellen datt d'Performance an d'Konsistenz vum Endprodukt héich Normen entspriechen an eng stabil Versuergung vum Produkt garantéieren. D'Firma investéiert kontinuéierlech a Fuerschung an Entwécklung, ëmmer en absolute Schwéierpunkt op Produktqualitéit erhalen, Client Zefriddenheet, a Maart Kompetitivitéit.

Fournisseur Aféierung

Shanghai Lingjun Biotechnology Co., Ltd., Ltd.gouf etabléiert an 2016 deen e professionnelle Hiersteller vu biomagnetesche Materialien an Nukleinsäure Extraktiounsreagenz ass.

Mir hu räich Erfahrung an Nukleinsäure Extraktioun an Offäll, Protein Reinigung, Zell Trennung, Chemilumineszenz an aner technesch Felder.

Eis Produkter gi wäit a ville Beräicher benotzt, wéi medizinesch Tester, genetesch Tester, Universitéit Fuerschung, genetesch Zucht, an esou weider. Mir bidden net nëmmen Produkter, awer och kënnen OEM ënnerhuelen, ODM, an aner Besoinen. Wann Dir verbonne Besoinen hutt, weg fillen gratis eis ze kontaktéieren um sales01@lingjunbio.com.