DNA 断片選別のための効率的なソリューションを提供する方法?

現在のところ, 分子生物学研究における多くの問題では、サイズに応じて DNA を分類する必要があります, これはフラグメントソートとして知られています. アガロースゲルでの電気泳動により、以下の範囲の DNA を分離できます。 10 ⁵～数百の塩基対. 対照的に, アクリルアミドゲルでの電気泳動により、数千塩基対の範囲の DNA を分離できます。. これらの分離プロセスで高分解能を達成するには, 2 つのフラグメントを分離するためのサイズの差は次のとおりです。 10% 最大の核酸含有量 5 に 10 ミリグラム.

選択的沈殿法, ポリエチレングリコールと生体磁気ビーズの組み合わせ, フラグメントソートに対するより効率的で便利なアプローチとして際立っています. 高濃度のPEGおよびNaCl溶液中, PEGはDNA分子の外側の水和層を破壊します, それらが凝集して沈殿する原因となる. これにより、マイナスに帯電したリン酸基が露出します。, それが「塩の橋」を形成します’ 磁気ビーズ上のカルボキシル基と’ 表面, DNA をビーズに吸着させる.

DNAが長いほど, 負に帯電したリン酸基が表面に露出するほど、, 分子全体がよりマイナスに帯電し、磁気ビーズに吸着しやすくなります。, より低い濃度のPEGとNaClで回収できます。. DNAが短いほど, 表面の水和層を完全に破壊するために必要なPEGとNaClの濃度が高くなる, 磁気ビーズに吸着されて回収されるのに十分な負に帯電したリン酸基を露出させる. より短いDNA断片を回収したい場合, より多くの量の磁気ビーズを追加する必要があります. 磁気ビーズ懸濁液とサンプルの比率も、スクリーニングする断片のサイズに影響します。. 磁性ビーズ懸濁液の濃度が増加するにつれて、, 磁気ビーズは、大きな破片に加えて小さな破片の吸着能力も高めます。.

磁気ビーズで特定の長さのDNA断片を分離したい場合, 通常、2 ラウンドの並べ替えが実行されます。. 最初のラウンドでは, 磁気ビーズはより高い分子量の DNA に結合します, その後、ビーズを廃棄することで除去されます。. 第 2 ラウンドには残りの製品が含まれます, 磁気ビーズは高分子量の DNA に結合し、上清を廃棄することで低分子量の DNA を除去します。.

両方の二本鎖 DNA, 一本鎖DNA, RNA は溶液中の負に帯電したリン酸基を解離できるため、磁気ビーズを使用して精製および回収できます。. しかし, 一本鎖 DNA および RNA は断片サイズについてスクリーニングできません. 二本鎖 DNA の二次構造は、一般に比較的安定した直鎖状の二重らせん分子です。. PEG存在下, 解離した負に帯電したリン酸基の数は、その長さと正の相関があります。. しかし, RNAや一本鎖DNAは複雑な二次構造を持っています, これにより、露出されたネガティブグループが長さと正の相関関係を持つことが妨げられます。, DNAなどの断片のスクリーニングが不可能になる. 加えて, 異なる pH 値では DNA と RNA の安定性が異なるため, DNA と RNA は pH 条件が異なると安定性が異なるため、DNA と RNA の精製に使用されるバッファーの pH は異なります。.

Shanghai Lingjun Biotechnologyのフラグメントソーティング磁気ビーズは、原料から完成品の磁気ビーズまで独自に開発、生産されています。, 最終製品の性能と安定性が高い基準を満たしていることを確認し、製品の安定供給を確保するために厳格な品質管理を行っています。. 同社は研究開発に継続的に投資しています, 常に製品の品質を絶対的に重視し続ける, 顧客満足度, と市場競争力.

サプライヤー紹介

上海霊軍生物技術有限公司, 株式会社に設立されました 2016 生体磁性材料と核酸抽出試薬の専門メーカーです.

核酸抽出・精製の経験が豊富です。, タンパク質の精製, 細胞分離, 化学発光およびその他の技術分野.

当社の製品はさまざまな分野で広く使用されています, 医療検査など, 遺伝子検査, 大学の研究, 遺伝子育種, 等々. 製品のご提供だけでなくOEMも承ります, ODM, その他のニーズ. 関連するニーズがある場合, お気軽にお問い合わせください。 sales01@lingjunbio.com.